月季花瓣中类胡萝卜素的高效提取及测定方法技术

本发明专利技术提供月季花瓣中类胡萝卜素的高效提取及测定方法，包括步骤：a制备类胡萝卜素标准品溶液；b制备类胡萝卜素待测样品溶液；c高效液相色谱分析；d液质联用分析，获得月季花瓣中类胡萝卜素的质谱信息；e根据保留时间、紫外可见吸收光谱图、质谱图、类胡萝卜素标准品和和文献资料对月季花瓣样品中类胡萝卜素的结构进行鉴定；f根据类胡萝卜素标准品的线性回归方程，对月季花瓣样品中的类胡萝卜素进行定量分析。本发明专利技术方法样品用量少、提取效率高、结果重复性好、数据准确可靠，是一种适合月季花瓣类胡萝卜素提取以及定性、定量分析的优良方法。

【技术实现步骤摘要】
月季花瓣中类胡萝卜素的高效提取及测定方法
本专利技术涉及类胡萝卜素的提取方法，具体地说，涉及月季花瓣中类胡萝卜素的高效提取及测定方法。
技术介绍
月季(Rosaspp.)是一种具有重要经济价值的观赏植物，花色是其最重要的观赏性状之一。黄色月季是月季育种史上的一大奇迹，胡萝卜素是赋予月季黄色和橙色的重要物质。类胡萝卜素是一种由多个异戊二烯骨架串联而成的萜类化合物(多数为C40)。由于存在共轭体系，因此在可见光下类胡萝卜素呈现黄色、橙色或红色。对植物而言，类胡萝卜素具有核心的生物学功能，例如在光合作用中对光能传递、光保护及自由基清除等方面发挥重要作用，同时胡萝卜素是合成植物激素脱落酸和独脚金内酯的前体物质。并且类胡萝卜素可赋予植物花朵、果实及种子各种颜色，对于吸引传粉者、传播种子等具有重要作用。对人类而言，类胡萝卜素是合成维生素A的前体，是一种优良的天然色素，同时在抗氧化、提高免疫力、保护视力及防癌等方面具有显著功效。月季长势健壮，适应性广、四季开花，因此月季花瓣有望成为胡萝卜素制备的重要材料。建立月季花瓣中类胡萝卜素提取及测定方法，对黄色月季育种和黄色月季中类胡萝卜素的提取利用具有重大本文档来自技高网...

【技术保护点】
月季花瓣中类胡萝卜素的高效提取及测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、称取类胡萝卜素标准品，用甲醇‑甲基叔丁基醚溶液溶解，制备类胡萝卜素标准品溶液；其中，所述甲醇‑甲基叔丁基醚溶液中甲醇和甲基叔丁基醚的体积比为1:1；S2、将月季花瓣样品在液氮中迅速研磨，依次用甲醇、正己烷和正己烷‑乙醚溶液振荡提取；收集有机相，挥干，得到胡萝卜素干粉；向胡萝卜素干粉中加入含有6％KOH的甲醇溶液，在黑暗条件下进行皂化反应；向皂化后的样品中加入10％NaCl水溶液，震荡后静置，然后加入正己烷‑乙醚溶液振荡提取1～2次，直到残渣为白色，收集有机相，挥干，得到皂化后的胡萝卜素干粉样品；其中，所述正己烷‑乙醚溶液...

【技术特征摘要】
1.月季花瓣中类胡萝卜素的高效提取及测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、称取类胡萝卜素标准品，用甲醇-甲基叔丁基醚溶液溶解，制备类胡萝卜素标准品溶液；其中，所述甲醇-甲基叔丁基醚溶液中甲醇和甲基叔丁基醚的体积比为1:1；S2、将月季花瓣样品在液氮中迅速研磨，依次用甲醇、正己烷和正己烷-乙醚溶液振荡提取；收集有机相，挥干，得到胡萝卜素干粉；向胡萝卜素干粉中加入含有6％KOH的甲醇溶液，在黑暗条件下进行皂化反应；向皂化后的样品中加入10％NaCl水溶液，震荡后静置，然后加入正己烷-乙醚溶液振荡提取1～2次，直到残渣为白色，收集有机相，挥干，得到皂化后的胡萝卜素干粉样品；其中，所述正己烷-乙醚溶液中正己烷和乙醚的体积比为3:1；S3、高效液相色谱分析；S4、液质联用分析，获得月季花瓣中类胡萝卜素的质谱信息；S5、根据保留时间、紫外可见吸收光谱图、质谱图、类胡萝卜素标准品和和文献资料对月季花瓣样品中类胡萝卜素的结构进行鉴定；S6、根据类胡萝卜素标准品的线性回归方程，对月季花瓣样品中的类胡萝卜素进行定量分析。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，各步操作中使用的有机试剂中均含有0.1％BHT，整个提取过程均在避光或黄光以及温度不超过23℃的条件下进行。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2具体为：(1)将月季花瓣样品在液氮中迅速研磨成粉末，称取0.2-0.3g样品，加入4ml甲醇，置于振荡培养箱中振荡提取20min；(2)向(1)所得体系中加入4ml正己烷，置于振荡培养箱中振荡提取20-30min；(3)向(2)所得体系中加入10％NaCl水溶液2ml，手动摇晃30s，静置分层，收集上层有机相；(4)向(3)所得下层溶液中加入2ml正己烷-乙醚溶液，置于振荡培养箱中振荡提取20-30min，静置分层，收集上层有机相；用正己烷-乙醚溶液重复提取，直到残渣为白色；(5)将(3)和(4)收集的上层有机相混合，用氮吹仪吹干，得到胡萝卜素干粉；(6)向胡萝卜素干粉中加入含有6％KOH的甲醇溶液1ml，置于振荡培养箱中振荡12h，进行皂化反应；(7)向皂化后的样品中加入10％NaCl水溶液1ml，然后加入1ml正己烷-乙醚溶液，置于振荡培养箱中振荡提取1h，取出后静置分层取上清；(8)向(7)的上清中加入0.5ml正己烷-乙醚溶液，置于振荡培养箱中振荡提取1h，取出后静置分层取上清；用正己烷-乙醚溶液重复提取，直到残渣为白色；(9)收集(8)的有机相用真空离心浓缩仪浓缩至干燥，将皂化后的胡萝卜素干粉置于棕色离心管中，于-80℃保存。...

【专利技术属性】
技术研发人员：张启翔，万会花，韩瑜，程堂仁，王佳，于超，潘会堂，李生，蔡勇，乔亚西，王李亮，
申请(专利权)人：北京林业大学，江苏苏北花卉股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11