鹰嘴豆壳二孢叶枯病真菌分子检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术涉及一种鹰嘴豆壳二孢叶枯病真菌分子检测试剂盒及检测方法，该试剂盒包括A液(PCR反应液)：含染料的2×Taq?PCR?MasterMix、上游引物7-5f(20μM)、下游引物7-5r(20μM)、超纯水；B液(阳性对照)为鹰嘴豆壳二孢叶枯病真菌标准株DNA，采用利用该试剂盒在鹰嘴豆壳二孢叶枯病病原真菌DNA、鹰嘴豆壳二孢叶枯病病残体、带病土壤及带病种子中均能特异地扩增出片段长度为440bp的特异扩增产物的方法进行检测。本发明专利技术所述的试剂盒用于生产实践中被鹰嘴豆壳二孢叶枯病病原菌感染的植物组织、土壤及种子的快速、灵敏、特异的检测，同时用于田间病害的早期监测，也可为海关进出口鹰嘴豆所携带的鹰嘴豆壳二孢叶枯病菌高灵敏快速分子检测和鉴定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农作物病害检测、鉴定及防治技术的领域，更具体涉及一种。
技术介绍
鹰嘴豆壳二孢叶枯病由鹰嘴豆壳二孢叶枯病病原菌Ascochyta rabiei引起,是一种毁灭性的病害。1911年，鹰嘴豆壳二孢叶枯病在巴基斯坦被首次发现，该病害的危害性很高，在鹰嘴豆的重要种植区巴基斯坦，年受害面积高达25-50%。冷凉的气候非常适合病害发展，常造成100%的产量损失。2007年，该病害在新疆北部的鹰嘴豆主栽区昌吉州木垒县、奇台县等地暴发，其中仅在木垒县发病面积为4000hm2，平均为害株率46%，严重田块为害株率达到100%，产量损失率为40% -50%。该病害主要危害叶片、叶柄、茎杆，也可侵染幼嫩的荚果。叶片被害后由叶缘向内扩散，形成“U”形或“V”形浅褐色至深褐色病斑，潮湿时病斑上产生分散的细小黑点，叶柄和茎杆受害初期产生水浸状病斑，随后病斑逐渐变为深褐色，病斑处凹陷并逐渐萎蔫干枯造成落叶断枝，严重时整株枯萎死亡。豆荚受害初期产生水浸状病斑，然后变成深褐色病斑，严重时豆荚干枯。雨水偏多年份，发病严重，产量损失极大。因此，开展鹰嘴豆壳二孢叶枯病菌检测，防止其从发病区向未发病区传播，以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鹰嘴豆壳二孢叶枯病病原菌的检测试剂盒，其特征在于该试剂盒为：A液PCR反应液和B液阳性对照组成；其中A液为PCR反应液，由含染料的2×Taq?PCR?MasterMix，上游引物7?5f20μM，下游引物7?5r20μM，超纯水重量浓度≥99％组成；B液为阳性对照：鹰嘴豆壳二孢叶枯病病原菌标准株DNA，DNA浓度为100ng/μL。

【技术特征摘要】
1.一种鹰嘴豆壳二孢叶枯病病原菌的检测试剂盒，其特征在于该试剂盒为A液PCR反应液和B液阳性对照组成；其中 A液为PCR反应液，由含染料的2XTaq PCR MasterMix，上游引物7_5f20 μ M，下游引物7-5r20yM，超纯水重量浓度> 99%组成； B液为阳性对照鹰嘴豆壳二孢叶枯病病原菌标准株DNA，DNA浓度为IOOng/ μ L。2.根据权利要求I所述的试剂盒，其特征在于A液中的上游引物为7-5f25bp 5 ' -CCCGCTACCTCTTACCCATGTCTTT-3 '，下游引物为 7_5r23bp 5' -GTCGTTATGAGTGCAAAGCGCGA-3'。3.根据权利要求I所述的试剂盒，其特征在于A液中含染料的2XTaqPCR MasterMix中包含Taq D...

【专利技术属性】
技术研发人员：马德英，马丽娟，羌松，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：