用于快速筛查HER2基因外显子20突变的特异性引物及应用制造技术

本发明专利技术提供一种用于快速筛查HER2基因外显子20突变的特异性引物及其应用方法，包括以下步骤：(1)提取外周血样品基因组DNA；(2)设计合成用于扩增HER2基因外显子20的特异性引物共1对；(3)使用上述引物对样品基因组DNA进行高分辨率熔解曲线分析联合触底PCR；(4)曲线分析中得到阳性结果的样本，即发生HER2基因突变。本发明专利技术的检测方法不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在PCR结束后直接运行高分辨熔解，即可完成对样品突变的分析。操作简便快速，使用成本低，结果准确，能够实现真正的闭管操作。同时针对人群快速筛查，具有高通量、速度快、可试剂盒化、检测成本低等特点。

【技术实现步骤摘要】
用于快速筛查HER2基因外显子20突变的特异性引物及应用
本专利技术涉及基因工程
尤其是涉及一种用于快速筛查HER2基因外显子20突变的特异性引物及其应用。
技术介绍
肿瘤是全世界范围内发病率和死亡率最高的疾病，寻找有效地早期诊断及治疗方法已成为当前医学研究领域中的重大课题。肿瘤的发病的过程常常涉及各种基因突变，肿瘤细胞在基因组水平上与正常体细胞存在显著差异，在肿瘤细胞发生发展的过程中存在被稳定复制的一些重要的驱动基因突变，可作为生物标志物，对肿瘤的预防、诊断、治疗以及预后判断提供重要的信息。乳腺癌目前是中国女性发病率第1位的恶性肿瘤,严重威胁着患者的健康。HER-2阳性乳腺癌约占侵袭性乳腺癌的20％～30％,与肿瘤的高侵袭性、高复发风险、进展快速及不良预后相关。大量针对HER-2靶点药物的研发及临床应用,改变了这部分患者的预后,但抗HER-2靶向药物的耐药极大限制了该类药物的应用。随着精准医学测序技术的发展,越来越多的HER-2基因突变被报道,HER-2基因的突变现象可能会对疾病的发生、发展及治疗产生影响,可能是抗HER-2药物耐药的一个重要原因。当HER2基因发生突变时，本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于快速筛查HER2基因外显子20突变的特异性引物，其特征在于，其核苷酸序列是：HER2外显子20正向引物：如SEQ ID No.1所示；HER2外显子20反向引物：如SEQ ID No.2所示。

【技术特征摘要】
1.用于快速筛查HER2基因外显子20突变的特异性引物，其特征在于，其核苷酸序列是：HER2外显子20正向引物：如SEQIDNo.1所示；HER2外显子20反向引物：如SEQIDNo.2所示。2.权利要求1所述的特异性引物用于高分辨率熔解曲线分析联合触底PCR方法快速筛查HER2基因外显子20突变。3.一种快速筛查HER2基因外显子20突变的检测方法，其特征在于，使用权利要求1所述的特异性引物，进行高分辨率熔解曲线分析联合触底PCR。4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(1)提取外周血样品基因组DNA；(2)合成权利要求1所述的特异性引物共1对；(3)使用上述引物对样品基因组DNA进行高分辨率熔解曲线分析联合触底PCR，95℃预变性10min，60℃15s，72℃15s，95℃10s，50个循环；95℃1min，40℃1min，从65℃开始，以0.02℃每秒的斜率采集熔解曲线，到95℃，之后40℃10s结束，用分析软件对采集后的曲线进行分析；(4)HRM曲线分析...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾瀚，其他发明人请求不公开姓名，
申请(专利权)人：北京青航基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11