未成熟卵母细胞的体外成熟培养液及其应用制造技术

本发明专利技术涉及细胞培养，具体公开了一种未成熟卵母细胞的培养方案其可促进未成熟卵母细胞的体外成熟，具体其包含卵泡颗粒细胞和培养该卵泡颗粒细胞的培养液，所述培养该卵泡颗粒细胞的培养液中含有CNP或其变体或其类似物和HDAC(组蛋白去乙酰化酶)抑制剂。本发明专利技术进一步地提供了包含CNP或其变体或其类似物和HDAC抑制剂的体外成熟培养液及其相关组合物，以及上述培养基、培养液以及组合物在促进未成熟卵母细胞体外成熟的应用。

【技术实现步骤摘要】
未成熟卵母细胞的体外成熟培养液及其应用
本专利技术涉及未成熟卵母细胞的体外成熟培养液、相关组合物及培养方法，属于医药生物领域。
技术介绍
在人类临床辅助生殖中，广泛采用促性腺激素对女性患者做超数排卵操作，之后利用所获成熟卵母细胞施行体外受精或单精子注射等，实现其孕育后代的目标。但是由于环境、精神压力以及个体对促性腺激素的响应性存在差异等原因，导致部分患者在实施超数排卵操作后，往往出现所得卵母细胞有相当一部分没有成熟的情况，这就大大降低了对该患者施行辅助生殖助孕的成功率，降低了对所采集的卵母细胞的利用效率。遗憾的是，目前临床上所用的卵母细胞成熟培养方法及所使用的培养液，一定程度上都不能解决上述问题。因此，如果能够开发出一种全新的体外培养人类未成熟卵母细胞的方法，使得这部分未成熟卵母细胞能够在体外培养一段时间后，成熟并具备相应的发育潜能，将在很大程度上促进辅助生殖技术的进步，提高助孕的成功率，为患者带来福音。目前，制约我国家畜繁殖业发展的一个重要因素是优质种畜的数量少且繁育速度慢，造成了生产性能落后的局面。胚胎工程技术的发展极大地促进了繁殖技术体系的进步。为此，利用胚胎工程技术体系，将体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种培养基，其包含卵泡颗粒细胞和培养该卵泡颗粒细胞的培养液，其中培养该卵泡颗粒细胞的培养液中含有CNP或其变体或其类似物和HDAC抑制剂。

【技术特征摘要】
1.一种培养基，其包含卵泡颗粒细胞和培养该卵泡颗粒细胞的培养液，其中培养该卵泡颗粒细胞的培养液中含有CNP或其变体或其类似物和HDAC抑制剂。2.根据权利要求1所述的培养基，其中所述培养基通过培养该卵泡颗粒细胞的培养液培养卵泡颗粒细胞4-6h而获得。3.根据权利要求1所述的培养基，其中所述HDAC抑制剂选自HDAC1抑制剂、HDAC2抑制剂和HDAC3抑制剂中的一种或更多种。4.根据权利要求3所述的培养基，其中所述HDAC抑制剂为HDAC3抑制剂；所述HDAC3抑制剂选自HDACi4b、Entinostat(MS-275)、BG45、RG2833(RGFP109)、RGFP966中的一种或更多种。5.根据权利要求1所述的培养基，其中培养该卵泡颗粒细胞的培养液含有30-120ng/mL的CNP或其变体或其类似物和1-10μM的HDAC抑制剂。6.根据权利要求5所述的培养基，其中培养该卵泡颗粒细胞的培养液含有40-80ng/mL的CNP或其变体或其类似物和3-7μM的HDAC抑制剂。7.根据权利要求5或6所述的培养基，其中培养该卵泡颗粒细胞的培养液还含有：5-15％FBS，0.01-0.5mg/mL谷氨酰胺，10-200IU/mL青霉素，10-200IU/mL链霉素。8.一种体外成熟培养液，其可用于未成熟卵母细胞的体外成熟培养，所述培养液中含有CNP或其变体或其类似物和HDAC抑制剂，其通过与卵泡颗粒细胞接触进而构成一种用于未成熟卵母细胞的体外成熟培养的培养基。9.根据权利要求8所述的体外成熟培养液，其中所述HDAC抑制剂选自HDAC1抑制剂、HDAC2抑制剂和HDAC3抑制剂中的一种或更多种。10.根据权利要求9所述的体外成熟培养液，其中所述HDAC抑制剂为HDAC3抑制剂；所述HDAC3抑制剂选自HDACi4b、Entinostat(MS-275)、BG45、RG2833(RGFP109)、RGFP966中的一种或更多种。11.根据权利要求8所述的体外成熟培养液，其中所述培养液含有30-120ng/...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏国良，王超，王华荣，蔡晗，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11