Rapid preparation method of the invention relates to a protein chip, the method of the invention is based on the construction of the recombinant protein; among them, the recombinant protein is highly variable amino acid sequence between different microbial total amino acid sequence, or one or several naturally occurring amino acid sequences are established between different microorganisms. Compared with the prior art, the invention is universal, efficient, fast, short preparation cycle characteristics, in the absence of genetic material or genetic material highly variable under the condition of rapid acquisition of protein or protein gene, total soluble protein amino acid sequence corresponding to the fast preparation of protein chip for microorganisms, especially the foundation; Study on pathogens of highly pathogenic, highly infectious, high mutation rate characteristic, provide fast, efficient and comprehensive research method and technology platform, so as to lay the foundation for the diagnosis, prevention, vaccine and drug development.
【技术实现步骤摘要】
一种蛋白质芯片的快速制备方法
本专利技术涉及一种蛋白质芯片的快速制备方法,具体涉及在没有遗传材料或遗传材料高度可变的情况下,快速获取蛋白质或蛋白质共有氨基酸对应的基因、可溶性蛋白质,快速制备蛋白质芯片。
技术介绍
2000年以后,新发重大传染病的频率逐步提高,带来的卫生灾难越来越大,呈愈演愈烈之势,SARS冠状病毒、埃博拉病毒、MERS冠状病毒、寨卡病毒等,给当地居民的生命健康带来巨大威胁。同时,一些常见的微生物,如流感病毒、登革病毒、艾滋病毒、结核分枝杆菌、霍乱弧菌等,通过遗传突变,使其能够逃避宿主免疫系统,产生耐药性,极大降低当前诊断、治疗措施的有效性,也给当地居民的健康产生巨大挑战。因此,快速、高效、系统、全面地了解微生物的生物学特性,尤其是病原微生物的免疫原性、致病机理、与宿主间的相互作用等,是有效诊断技术发展、新疫苗研制、治疗方案开发的关键。此外,高致病性、高传染性、高突变率等特性,进一步加大了相应微生物基础研究的难度。作为一种高通量分析检测平台,凭借其独特的优势,如体积小、通量高、分析检测速度快、样品需求量少等,蛋白质芯片已在生命科学及医学等相关领域发挥了巨大作用。借助蛋白质芯片技术,可实现快速、高效、系统地了解病毒及其他微生物的生物学特性。但是,蛋白质芯片的制备是其应用的前提。目前蛋白质芯片制备的缺陷,主要集中于以下几个方面:制备周期长;过程极其繁琐;严重依赖原始遗传材料或基于原始遗传材料而构建的cDNA文库;忠实反应原始核酸序列,增加异源表达获得足够、相应可溶性蛋白质的难度;无法应对核酸序列高度可变的状况等。这些缺点限制了蛋白质芯片的制备效 ...
【技术保护点】
一种蛋白质芯片的快速制备方法,其特征在于,所述制备方法是基于重组蛋白质构建的;其中,所述重组蛋白质是不同微生物之间存在的高度可变氨基酸序列的共有氨基酸序列,或者是不同微生物之间存在的某一个或者几个自然存在的既定氨基酸序列。
【技术特征摘要】
1.一种蛋白质芯片的快速制备方法,其特征在于,所述制备方法是基于重组蛋白质构建的;其中,所述重组蛋白质是不同微生物之间存在的高度可变氨基酸序列的共有氨基酸序列,或者是不同微生物之间存在的某一个或者几个自然存在的既定氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的蛋白质芯片的快速制备方法,其特征在于,所述重组蛋白质是通过转化子构建,蛋白质异源表达,高通量获得亲和纯化用标签融合的重组蛋白质。3.根据权利要求2所述的蛋白质芯片的快速制备方法,其特征在于,所述转化子构建中采用的遗传材料是通过全基因合成的;其中,所述遗传材料的序列信息是通过如下方法获取的:通过分析不同微生物的现有蛋白质氨基酸序列,获得高度可变氨基酸序列的共有氨基酸序列,或者某一个或者几个自然存在的既定氨基酸序列;并按照标准密码子表将所述氨基酸序列转化成对应的核苷酸序列,进一步优化,即得相应遗传材料的序列信息。4.根据权利要求3所述的蛋白质芯片的快速制备方法,其特征在于,所述优化的...
【专利技术属性】
技术研发人员:陶生策,祁环,郭书娟,李阳,
申请(专利权)人:上海交通大学,
类型:发明
国别省市:上海,31
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