一种用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒制造技术

本实用新型专利技术涉及一种用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒，包括检测卡、比色卡和/或胶体金定量读数仪，检测卡包括上样垫、胶体金结合垫、具有检测线和质控线的承载膜、吸样垫及底板，指标包括心脏肌钙蛋白、N末端脑钠肽和中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白，胶体金结合垫包括结合垫本体和涂覆于结合垫本体上的胶体金标记抗体涂层，其中胶体金标记抗体涂层中的抗体为所述指标的抗体；采用CTnI、NT‑proBNP和NGAL三种标记物,可即时监测糖尿病人的心肾损伤风险。

A colloidal gold kit for monitoring renal function in people with diabetes

The utility model relates to a colloidal gold kit of diabetic heart kidney function monitoring, including testing card, card and / or quantitative colloidal gold detection card reading instrument, including the sample pad, a colloidal gold combined pad, with a detection line and a quality control line bearing, sample suction pad and bottom plate, including index cardiac troponin N terminal brain natriuretic peptide and neutrophil gelatinase associatedlipocalin, colloidal gold combined pad includes a combination of cushion body and coated on the pad body on the combination of colloidal gold labeled monoclonal antibody coating, the colloidal gold labeled antibody on antibody coating in the index by CTnI, NT proBNP; NGAL and three markers, can heart and kidney injury risk monitoring in patients with diabetes.

【技术实现步骤摘要】
一种用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒
本技术涉及生物技术诊断领域，具体涉及一种用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒。
技术介绍
糖尿病是以慢性高血糖为特征的代谢性疾病。据世界卫生组织统计，糖尿病并发症高达100多种，而心血管疾病和肾病又是糖尿病人的主要并发症，并严重影响糖尿病人的生命。据统计，糖尿病死亡者有一半以上是心脑血管所致，10%是肾病变所致。临床数据显示，糖尿病发病后10年左右，将有30%～40%的患者至少会发生一种并发症，且并发症一旦产生，药物治疗很难逆转，尤其是心梗和肾病。因此，早期即时监测糖尿病人的心血管损伤和肾脏损伤风险，可预防重大疾病如心梗、晚期肾病的发生，及时挽救病人的生命。CTnI为心肌肌钙蛋白(cTn)的三个亚单位(cTnI，cTnC和cTnT)之一，是肌肉组织收缩的调节蛋白，在心肌细胞膜完整的情况下，cTnI不能透出细胞膜进入血循环。当心肌细胞因缺血、缺氧发生变性坏死时，cTnI通过破损细胞膜释放入血。由于cTnI分子量较小并持续从变性细胞内逸出，故AMI发生后，在血中出现较早，并持续相当长时间。与其他血清酶相比，cTnI是心肌损伤的更特异的标记物，同时它也很敏感，可以诊断心脏手术（例如：钙化性主动脉瓣狭窄和冠状动脉旁路手术）周围的微小梗死和缺血出现4h的AMI。cTnI在正常人血液中含量很低，约为20.4pg/ml。cTnI>20.4pg/ml，对心肌损伤就有诊断意义。患者在出现胸痛症状前几天的微小心肌损伤即可以用cTnI检测出来。在AMI发生2.2-6.8小时，它的浓度开始升高，大约在11.2小时达到峰值195.9ng/ml，持续时间久，5～10天后可降至正常。cTnI具有以下优点：血中出现时间早，因为分子量较CK-MB小，心肌损伤后更易释放入血；灵敏度高；特异性高，骨骼肌损伤不影响结果的判断，也可推测非心脏手术病人的手术类型对cTnI无明显影响；持续时间长，因此可在心肌损伤早期和后期通过检测cTnI来明确诊断和判断心肌损伤程度。在急性心梗诊断、治疗及预后具有重要的临床应用价值。NT-proBNP（N末端脑钠肽），是BNP前体(proBNP)被内肽酶切割后的产物，含N端76个氨基酸。当发生心力衰竭时，BNP释放到血液中，随后降解为NT-proBNP和BNP，检测血液中NT-proBNP和BNP的含量，可监测心力衰竭的程度。由于NT-proBNP的半衰期较长(120min)，体外稳定性强，在心力衰竭患者中的浓度较BNP高，更有利于心力衰竭的诊断，因此NT-proBNP作为心力衰竭诊断的敏感指标，并评估心功能损害严重程度。2002年美国FDA批准Roche公司的ElecsysproBNP上市，检测血液中的NT-proBNP。美国心脏协会(AHA)、美国临床生化学院(NACP)制定的“心衰诊断和治疗指南”及“心脏标志物的应用指南”中，把NT-proBNP作为心力衰竭的诊断和预后指标。中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白(NGAL)是一种小分子量分泌型蛋白，由Kjeldsedn等人于1993年发现，是Lipocalin家族的新成员。生理条件下，NCAL少量合成于骨髓中性粒细胞和肾小管等多个系统的上皮细胞，炎症反应和恶性肿瘤可诱使其在多组织(如子宫、前列腺、唾液腺、肺、肾、气道及消化道上皮等)中大量生成，几个小时内就可以达到峰值，产生速度明显快于其它相关生物标记物。NGAL在急性肾小管损伤早期就已经表达，反映肾小管功能紊乱，它浓度的升高提示肾小管损伤发生，而传统指标血肌酐升高则需24小时以上。NGAL也是目前新型AKI诊断的首选指标物。现有技术中，糖尿病的检测指标以血糖为主，虽然糖尿病并发症严重影响病人的生命质量，但糖尿病人和临床医生往往侧重于血糖的管理，忽视了心血管和肾脏损伤的监测。一方面，现有技术多是单指标检测，如胸痛检测心肌酶指标，尿血了才去检测肾脏指标；另一方面，现有的检测技术不够完善，平台技术不通用，如CTnI、NGAL或者NT-proBNP的检测试剂以不同形式在临床上应用，制作原理及操作程序各不相同，兼容性比较差；三是，早期监测指标应用不普及，往往发现时病人已经是心梗或肾衰的晚期，极大地影响了对患者的准确诊断，从而造成很多病人因延误救治而病情恶化甚至导致死亡。为克服上述技术的缺陷，本技术提供了一种可以实现心肾损伤同步、快速、即时监测的试剂盒，实现糖尿病人在家庭、养老院、社区卫生所、急诊等随时随地检测，避免恶性心肾损伤的发生。
技术实现思路
本技术所要解决的技术问题是提供一种用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒。为解决以上技术问题，本技术采用如下技术方案：一种用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒，其包括检测卡、比色卡和/或胶体金定量读数仪，检测卡包括上样垫、胶体金结合垫、具有检测线和质控线的承载膜、吸样垫及底板，检测指标包括心脏肌钙蛋白（CTnI）、N末端脑钠肽（NT-proBNP）和中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白（NGAL），胶体金结合垫包括结合垫本体和涂覆于结合垫本体上的胶体金标记抗体涂层，其中胶体金标记抗体涂层中的抗体为所述指标的抗体；检测线有三条，这三条检测线相互分离且分别为能够与胶体金标记的抗体特异性结合的配对抗体或抗原形成的涂层。根据本技术的一个具体方面，检测卡由上样垫、胶体金结合垫、承载膜及吸样垫依次相互交错粘贴在底板上构成。根据本技术的一个优选方面，检测卡还包括滤血膜，滤血膜覆设在上样垫上，上样垫、胶体金结合垫、承载膜及吸样垫依次相互交错粘贴在底板上。根据本技术的又一优选方面，检测卡还包括助推垫，且检测卡由上样垫、胶体金结合垫、助推垫、承载膜及吸样垫依次相互交错粘贴在底板上构成。根据本技术的还一优选方面，检测卡还包括滤血膜和助推垫，滤血膜覆设在上样垫上，上样垫、胶体金结合垫、助推垫、承载膜及吸样垫依次相互交错粘贴在底板上。优选地，助推垫的材质为玻璃纤维素膜或无纺布。根据本技术的一个优选方面，承载膜仅有一条，三条检测线、质控线相互平行且沿着所述承载膜的长度方向依次设置在所述承载膜上。进一步地，三条检测线中靠近胶体金结合垫的检测线为心脏肌钙蛋白的配对抗体或抗原涂层，靠近吸样垫的检测线为中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白的配对抗体或抗原涂层，中间的检测线为N末端脑钠肽的配对抗体或抗原涂层，质控线位于承载膜的靠近吸样垫的端部。根据本技术的又一优选方面，承载膜包括三条承载分膜，三条检测线分别分布在三条承载分膜上。在各承载分膜上分别设置有质控线。根据本技术的又一优选方面，检测卡包括三个独立的检测分卡，上样垫、结合垫、吸样垫和底板分别有三条，每一条上样垫、结合垫、承载分膜、吸样垫和底板组装成一个检测分卡。优选地，质控线通过包被包括但不限于羊抗鼠IgG、羊抗鸡IgY或羊抗兔IgG等形成。优选地，检测垫为硝酸纤维素膜且为孔径5～12um的多孔样结构膜；上样垫、胶体金结合垫的材质为玻璃纤维素膜或无纺布，吸样垫的材质为吸水滤纸。免疫胶体金技术是已知的。本技术所述的胶体金免疫标记抗体可采用本领域熟知的方法制备。由于以上技术方案的实施，本技术与现有技术相比具有如下优点：本技术试剂盒包括快速检测心肾本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒，所述胶体金试剂盒为多指标胶体金试剂盒，其包括检测卡、比色卡和/或胶体金定量读数仪，所述检测卡包括上样垫（1）、胶体金结合垫（2）、具有检测线和质控线（C）的承载膜（3）、吸样垫（4）及底板（5），其特征在于：所述指标包括心脏肌钙蛋白、N末端脑钠肽和中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白，所述胶体金结合垫（2）包括结合垫本体（20）和涂覆于所述结合垫本体上的胶体金标记抗体涂层（21），其中所述胶体金标记抗体涂层中的抗体为所述指标的抗体；所述检测线有三条，这三条检测线（T1、T2、T3）相互分离且分别为能够与所述胶体金标记的抗体特异性结合的配对抗体或抗原形成的涂层。

【技术特征摘要】
1.一种用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒，所述胶体金试剂盒为多指标胶体金试剂盒，其包括检测卡、比色卡和/或胶体金定量读数仪，所述检测卡包括上样垫（1）、胶体金结合垫（2）、具有检测线和质控线（C）的承载膜（3）、吸样垫（4）及底板（5），其特征在于：所述指标包括心脏肌钙蛋白、N末端脑钠肽和中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白，所述胶体金结合垫（2）包括结合垫本体（20）和涂覆于所述结合垫本体上的胶体金标记抗体涂层（21），其中所述胶体金标记抗体涂层中的抗体为所述指标的抗体；所述检测线有三条，这三条检测线（T1、T2、T3）相互分离且分别为能够与所述胶体金标记的抗体特异性结合的配对抗体或抗原形成的涂层。2.根据权利要求1所述的用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒，其特征在于：所述检测卡还包括滤血膜（6），所述滤血膜（6）覆设在所述的上样垫（1）上，所述上样垫（1）、胶体金结合垫（2）、承载膜（3）及吸样垫（4）依次相互交错粘贴在底板（5）上。3.根据权利要求1所述的用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒，其特征在于：所述检测卡还包括助推垫（7），且所述检测卡由所述上样垫（1）、胶体金结合垫（2）、助推垫（7）、承载膜（3）及吸样垫（4）依次相互交错粘贴在底板（5）上构成。4.根据权利要求1所述的用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒，其特征在于：所述检测卡还包括滤血膜（6）和助推垫（7），所述滤血膜（6）覆设在所述的上样垫（1）上，所述上样垫（1）、胶体金结合垫（2）、助推垫（7）、承载膜（3）及吸样垫（4）依次相互交错粘贴在底板（5）上。5.根据权利要求3或4所述的用于糖尿病人心肾功能监测的胶体金试剂盒，其特征在于：所述助推垫（7）的材质为玻璃纤维素膜或无纺...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡文波，李静，
申请(专利权)人：江苏扬新生物医药有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏,32