一种白蛋白作为实体肿瘤筛查指标的检测方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种白蛋白作为实体肿瘤筛查指标的检测方法及应用。具体地，本发明专利技术首次发现，白蛋白在肿瘤组织(如甲状腺组织)中的含量显著高于癌旁组织(或癌旁正常组织)，因此白蛋白可作为区分肿瘤组织(如甲状腺肿瘤组织)和癌旁正常组织(如甲状腺癌旁正常组织)的标志物，并用于检测或辅助性检测肿瘤(如甲状腺肿瘤)。

A method and application of an albumin as a screening index for solid tumor

The present invention provides a detection method and application of albumin as a screening index for solid tumor. Specifically, the present invention is found for the first time, albumin in tumor tissue (such as thyroid tissue) in content was significantly higher than that of adjacent tissues (or tissues), so as to distinguish tumor tissue albumin (such as thyroid tumor tissue) and adjacent normal tissues (such as thyroid cancer adjacent normal tissues) markers and, for the detection or auxiliary detection of tumor (such as thyroid cancer).

【技术实现步骤摘要】
一种白蛋白作为实体肿瘤筛查指标的检测方法及应用
本专利技术涉及生物医学检测
，具体涉及一种高丰度白蛋白作为实体肿瘤筛查指标的检测方法及应用。
技术介绍
白蛋白是人血浆中含量最多的蛋白质，主要在肝脏中合成，占血浆总蛋白的40％-60％。白蛋白所执行的主要功能包括保持血浆的渗透压与PH，另外还有运输内源及外源物质的功能。对生物样本中的蛋白进行检测分析对于临床医学具有重要意义。但是由于生物样本的复杂性，对其中含有的蛋白进行快速准确的分析仍极具挑战性。目前医学领域对白蛋白的检测方法都是对血浆中的白蛋白进行检测，通过白蛋白在血浆中的含量的变化作为一种疾病相关的指标。对血浆中白蛋白检测的方法常用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合法，然后通过全自动生化分析仪进行检测。但这种方法不适用于组织中累积的白蛋白的分析。目前临床医学中对于组织中蛋白的检测主要还是通过专一性的免疫分析的方法。这种方法的灵敏度高，因此很适合于蛋白的分析。质谱(MS)是一种分析复杂混合物，提供有关分子信息、含量和被分析物的化学结构的强大工具。质谱基于其灵敏度高专一性好等优点也开始被应用于临床相关的蛋白检测和研究。但是用基于质谱的传统的蛋白质组学分析方法并没有像免疫分析一样已被应广泛用于临床疾病的诊断。这主要是因为传统的蛋白质组学的方法过程繁琐，成本高难以满足临床医学中快速分析的需要，也难以实现对组织中的蛋白进行快速分析。因此本领域迫切需要开发一种对组织中白蛋白快速检测，并将检测结果应用于实体瘤组织与正常组织的区分的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种对组织中白蛋白快速检测，并将检测结果应用于实体瘤组织与正常组织的区分的方法。在本专利技术的第一方面，提供了一种白蛋白或其检测试剂的用途，(i)用作区分肿瘤组织和癌旁正常组织的标志物；(ii)用于制备区分肿瘤组织和癌旁正常组织的诊断试剂或试剂盒；和/或(iii)用作诊断肿瘤的标志物。在另一优选例中，所述诊断包括辅助性诊断和/或确认性诊断。在另一优选例中，所述肿瘤为实体瘤。在另一优选例中，所述实体瘤选自下组：肝癌、肺癌、甲状腺肿瘤、黑色素瘤、恶性胶质瘤、卵巢瘤、结肠瘤、乳腺瘤、或其组合。在另一优选例中，所述肿瘤组织包括选自下组的肿瘤的肿瘤组织：肝癌、肺癌、甲状腺肿瘤、黑色素瘤、恶性胶质瘤、卵巢瘤、结肠瘤、乳腺瘤、或其组合。在另一优选例中，所述癌旁正常组织包括包括选自下组的肿瘤的癌旁正常组织：肝癌、肺癌、甲状腺肿瘤、黑色素瘤、恶性胶质瘤、卵巢瘤、结肠瘤、乳腺瘤、或其组合。在另一优选例中，所述诊断试剂包括抗体、引物、探针、测序文库、核酸芯片(如DNA芯片)或蛋白质芯片。在另一优选例中，所述的蛋白包括全长蛋白或蛋白片段。在另一优选例中，所述的白蛋白来源于哺乳动物，较佳地来源于啮齿动物(如小鼠、大鼠)、灵长动物和人。在另一优选例中，所述白蛋白的登录号为M12523.1。在另一优选例中，所述白蛋白从组织(较佳地，肿瘤组织，更佳地，甲状腺肿瘤组织)中提取。在另一优选例中，所述检测是组织样本检测。在另一优选例中，所述检测为利用基质辅助激光解吸质谱结合HM3检测器进行的检测。在另一优选例中，所述检测试剂包括白蛋白的特异性抗体、白蛋白的特异性结合分子、特异性扩增引物、探针或芯片。在另一优选例中，所述的白蛋白或其特异性抗体或特异性结合分子偶联有或带有可检测标记。在另一优选例中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。在另一优选例中，所述白蛋白的特异性抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。本专利技术第二方面提供了一种用于区分肿瘤组织和癌旁正常组织的诊断试剂盒，所述的试剂盒含有一容器，所述容器中含有检测白蛋白的检测试剂；以及标签或说明书，所述标签或说明书注明所述试剂盒用于(i)区分肿瘤组织和癌旁正常组织；(ii)诊断肿瘤。在另一优选例中，所述的检测白蛋白的检测试剂包括：(a).抗白蛋白的特异性抗体；和/或(b).特异性扩增白蛋白的mRNA或cDNA的特异性引物。在另一优选例中，所述检测是组织样本检测。在另一优选例中，所述的标签或说明书中注明以下内容：(i)当检测对象(subject)的待测组织(或疑似组织)中白蛋白的浓度C1与正常组织中白蛋白浓度C0之比(C1/C0)≥2，较佳地，≥3，更佳地，≥4，则提示该检测对象发生肿瘤的风险高于普通人群或提示所述待测组织为肿瘤组织。在另一优选例中，所述的检测对象为人或非人哺乳动物。在另一优选例中，所述的试剂盒用于检测人的肿瘤组织样品。本专利技术第三方面提供了一种区分肿瘤组织和癌旁正常组织的方法，所述方法包括：a)提供来自受试者的测试样品，所述测试样品为肿瘤组织样品(或疑似肿瘤组织样品)和癌旁正常组织样品；b)检测所述测试样品中肿瘤组织样品的白蛋白的浓度C1和癌旁正常组织样品的白蛋白的浓度C0；和c)将步骤b)中所测定的白蛋白的浓度C1与C0进行比较，从而区分肿瘤组织和癌旁正常组织。在另一优选例中，在步骤c)中，计算C1与C0的比值Rc(Rc＝C1/C0)，并与参考值(或阈值)R0进行比较，当Rc大于或等于R0，(例如当Rc≥2，较佳地，≥3，更佳地，≥4)，则表明受试者发生肿瘤的几率高于普通人群。在另一优选例中，所述的受试者为人或非人哺乳动物。在另一优选例中，所述方法为非诊断和非治疗性的。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1为本专利技术实施例1得到的甲状腺肿瘤组织(a)与正常组织(b)质谱分析图。图2为本专利技术实施例1中不同主要成分的裂解液对组织中的蛋白进行提取后，进行检测得到的质谱图的对比图。图3为本专利技术实施例1在分析前处理时基质与组织总蛋白提取液的混合比例不同得到的质谱图的对比图。图4为本专利技术实施例1得到的21对甲状腺肿瘤组织(Carcinoma)与正常组织(Para-carcinoma)样本峰强度的统计图；图5为本专利技术实施例2得到的4对甲状腺肿瘤组织与正常组织中白蛋白的相对含量图。图6为本专利技术实施实例3得到的5对甲状腺肿瘤组织与正常组织中白蛋白的含量的分布图。具体实施方式本专利技术人经过广泛而深入的研究，首次意外地发现，白蛋白在实体瘤中可以富集，并且白蛋白在实体瘤和癌旁正常组织的相对表达量有显著差异，因此白蛋白可以作为一种通用的广谱肿瘤标志物。具体地，实验表明，白蛋白在肿瘤组织(如甲状腺肿瘤组织)中的含量显著高于癌旁正常组织，因此白蛋白可作为区分肿瘤组织(如甲状腺肿瘤组织)和癌旁正常组织的标志物，并用于检测或辅助性检测肿瘤(如甲状腺肿瘤)。此外，本专利技术的方法还可以对组织中白蛋白快速检测。在此基础上，本专利技术人完成了本专利技术。样品本文中使用的术语“样品”或“样本”是指与受试者特异地相关联的材料，从其中可以确定、计算或推断出与受试者有关的特定信息。样品可以全部或部分由来自受试者的生物材料构成。样品也可以是以某种方式与受试者接触过的材料，这种接触方式使得对样品进行的测试可以提供与受试者有关的信息。样品也可以是已经与其它材料接触过的材料，这种其它材料不是受试者的，但是能够使第一材料随后被测试以确定与受试者有关的信息，例如样品可以是探针或解剖刀的清本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种白蛋白或其检测试剂的用途，其特征在于，(i)用作区分肿瘤组织和癌旁正常组织的标志物；(ii)用于制备区分肿瘤组织和癌旁正常组织的诊断试剂或试剂盒；和/或(iii)用作诊断肿瘤的标志物。

【技术特征摘要】
1.一种白蛋白或其检测试剂的用途，其特征在于，(i)用作区分肿瘤组织和癌旁正常组织的标志物；(ii)用于制备区分肿瘤组织和癌旁正常组织的诊断试剂或试剂盒；和/或(iii)用作诊断肿瘤的标志物。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为实体瘤。3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述实体瘤选自下组：肝癌、肺癌、甲状腺肿瘤、黑色素瘤、恶性胶质瘤、卵巢瘤、结肠瘤、乳腺瘤、或其组合。4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测试剂包括白蛋白的特异性抗体、白蛋白的特异性结合分子、特异性扩增引物、探针或芯片。5.一种用于区分肿瘤组织和癌旁正常组织的诊断试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒含有一容器，所述容器中含有检测白蛋白的检测试剂；以及标签或说明书，所述标签或说明书注明所述试剂盒用于(i)区分肿瘤组织和癌旁正常组织；(ii)诊断肿瘤。6.如权利要求5所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述的检测白蛋白的检测试剂包括：(a).抗白蛋白的特异性抗体；和/或(b).特异性扩增白蛋白的mRNA或cDNA的特异性引物。7.如权利要求5所...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭寅龙，王珊珊，张菁，张立，张芳，
申请(专利权)人：中国科学院上海有机化学研究所，
类型：发明
国别省市：上海,31