用于治疗肌肉疾病和病症的方法和组合物技术

本发明专利技术提供通过施用稳定、长效的血管活性肠肽治疗剂治疗肌肉肌病的方法，所述肌肉肌病包括肌营养不良和心肌病。这些作用剂包括一种或多种弹性蛋白样肽且可以低剂量施用。

Methods and compositions for the treatment of muscle diseases and diseases

The present invention provides a method for treating muscular myopathy by applying stable and long-acting vasoactive intestinal peptide, which includes muscular dystrophy and cardiomyopathy. These agents include one or more elastin like peptides and can be used at low doses.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗肌肉疾病和病症的方法和组合物相关申请的交叉引用本申请要求保护2015年2月9日提交的美国临时申请号62/113,943、2015年4月10日提交的美国临时申请号62/145,770和2015年4月21日提交的62/150,679的权益，其每一篇的内容此处通过提述以其整体并入。电子提交的文本文件的说明此处电子提交的文本文件内容在本文通过提述以其整体并入：序列表的计算机可读形式拷贝(文件名:PHAS_032/04WO__SeqList_ST25.txt，记录日期：2016年2月9日，文件大小32千字节)。
技术介绍
杜氏和贝克肌营养不良症(DMD和BMD)代表人中最常见的神经肌肉疾病，依赖于研究群体其在出生的男性中发生率为1/6000至1/3500(Bushby等人(2010))。DMD和BMD是肌营养不良蛋白基因中的突变导致的等位基因病症。在DMD中，功能性的肌营养不良蛋白在肌肉中完全不存在，在BMD中尽管存在一定的肌营养不良蛋白，但数量对于正常肌肉功能是不足的。除骨骼肌无力，心肌中的肌营养不良蛋白缺陷还导致进行性心肌病。目前，不存在批准的特异性治疗DMD/BMD的疗法。高剂量皮质类固醇经常用于治疗肌无力和尽可能地维持行走，但其涉及不可接受的副作用和/或不良响应。这些治疗剂是否帮助或阻碍心脏功能也尚不明确。需要其他治疗方式以治疗肌营养不良的骨骼和心脏异常二者。专利技术概述本专利技术提供长效的血管活性肠肽(VIP)疗法以治疗、延迟、预防或改善肌肉疾病。肌病肌肉在反复收缩的过程中受到损伤，但由于其缺乏适当自身修复的能力，肌肉发展出缺陷如纤维化病变。这些缺陷经常通过损伤肌肉收缩的能力抑制肌肉功能。预防、延迟或改善这些缺陷的形成可治疗患者中的肌肉肌病。本文公开的VIP治疗剂还可在具有肌肉肌病的患者中改善心脏功能。一些方面，本专利技术提供用于治疗肌肉疾病的方法，其包括对有需要的患者施用含有血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。一些方面，本专利技术提供在有需要的患者中用于防范肌肉收缩诱导的损伤的方法，其包括施用含有血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。一些方面，本专利技术提供用于减缓心肌病进展的方法，其包括对有需要的患者施用含有血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。一些方面，本专利技术提供用于治疗心肌病的方法，其包括对有需要的患者施用含有血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。一些方面，所述药物组合物包含SEQIDNO:15的氨基酸序列。附图简述图1A-B显示经由超声心动图监测的心脏功能：n＝10-11，*P<0.05vs对照。小图A显示MDX(肌营养不良蛋白缺陷型小鼠)中的分数面积缩短。小图B显示MDX小鼠中的E/A比率。PB1046治疗在治疗的32周后保持分数面积缩短。在mdx和双敲除小鼠中心肌病发展前施用PB1046保持QRS的持续时间，并减缓mdx小鼠中心脏功能的恶化(分数面积缩短和E/A比率)。图2A-E显示终端步骤中MDX小鼠左心室功能的体内评估。n＝4-5(MDX)且n＝2(DKO)，*P<0.05vs对照。mdx和双敲除治疗的动物都显示保持的dP/dtmax(收缩)和更快的Tau(松弛)。图3A-B显示从MDX小鼠分离的趾长伸肌中骨骼肌生理评估的结果。n＝4-16。相比未治疗的小鼠，使用PB1046治疗维持偏心收缩，表明治疗组中的肌肉对收缩诱导的损伤更耐受。图4A-C显示使用天狼星红染色(SiriusRedstaining)测量的MDX小鼠中的胶原含量(小图A-B)。巨噬细胞的识别经由免疫组化确定(小图C)n＝4-7，*P<0.05vs对照。如通过胶原沉积所确定，纤维化程度在骨骼肌(腓肠肌)和心肌中都减少。专利技术详述可能影响骨骼肌和心肌的肌肉肌病是其中肌肉纤维不再正确发挥功能的病症，其导致肌肉无力，肌肉无力可使肌肉萎缩、瘫痪，甚至死亡。心脏功能障碍是多种肌肉肌病的常见表现，且是具有这些病况的个体的常见死因。经常，在遗传性肌病如肌营养不良中，患者在肌营养不良蛋白基因中呈现突变。肌营养不良蛋白基因在肌肉收缩中起结构和调节两种作用。肌营养不良蛋白是较大的跨膜复合物肌营养不良蛋白糖蛋白复合物(DGC)(Lapidos等人(2004))的一部分，其不存在会直接影响收缩性。在许多肌肉疾病患者(例如杜氏或贝克肌营养不良症或肌营养不良蛋白相关心肌病)中，肌营养不良蛋白蛋白可完全不存在或仅发挥部分功能。肌营养不良蛋白不存在增加细胞内的钙并导致一氧化氮的过量产生，其触发蛋白降解、纤维化、坏死、巨噬细胞活化并最终导致骨骼肌和心肌病(Townsend等人(2011)；Judge等人(2011))。在心肌细胞中，这些病理后果部分由钙渗透性的增加和增加的肌细胞钙浓度介导，其随后初始级联事件，包括肌细胞内炎症细胞因子的表达和炎症细胞对肌细胞坏死的响应(Zhou等人(2010)；Klinger等人(2012))。此外，细胞内环鸟苷酸单磷酸(cGMP)信号通路的破坏直接促使肌肉功能丧失(Lapidos等人(2004))；Townsend等人(2011)；Byers等人(1991))。除对肌肉功能的直接影响，肌营养不良蛋白的丧失和一氧化氮合酶活性的相应变化导致线粒体和代谢压力，其刺激细胞因子的产生和细胞凋亡。这些事件导致肌肉质量的进一步丧失，肌肉功能的丧失和最终的纤维化。具体而言，心肌细胞压力增加IL-6和TGF-β的产生，其刺激成纤维细胞、胶原合成和巨噬细胞浸润，其全部促使纤维化增加。在健康肌肉中，急性组织损伤后，浸润性炎症细胞和固有的干细胞恢复组织动态平衡。然而，在长期组织损伤过程如肌营养不良症中，炎症细胞浸润和成纤维细胞活化持续，而干细胞(例如卫星细胞)的修复能力减弱。在多种营养不良症中，肌肉经历与慢性炎症相关的纤维降解的恒定循环。在DMD中，负责修复肌肉损伤的卫星细胞群体随时间枯竭或其丧失介导修复的能力，且肌肉组织逐渐由脂肪和纤维组织替代。肌营养不良症中肌肉组织的纤维化和丧失都减少运动和收缩功能。肌纤维化是肌肉纤维间疤痕组织纤维带的过度形成。尽管纤维化可在任何器官中发展，但骨骼肌纤维化和心肌纤维化是仅有的已知的肌肉纤维化。纤维疤痕组织在肌肉已损伤后发展以填补损伤肌肉中的开放空间，为与其粘附的再生肌肉纤维提供更多表面积。包含疤痕组织的结缔组织细胞不能收缩和松弛以允许运动。一旦纤维疤痕组织开始过度产生，肌肉逐渐变弱。血管活性肠肽(VIP)在纤维化发展中起作用。除其他活性外，VIP通过VPAC1和VPAC2受体发挥作用以增加cAMP和cGMP的水平。重要的是，在鼠类巨噬细胞中，VIP已显示减少TGF-β(DMD中心脏纤维化的重要调节因子)的产生(Ameen等人(2010)；Burks等人(2011)；Bujak等人(2007))。VIP还刺激抑制肌营养不良症中的肌肉炎症和损伤的调节性T细胞(Treg)(Villata等人(2014))。本专利技术提供通过施用稳定、长效的血管活性肠肽(VIP)治疗剂在肌病患者中预防、延迟或改善症状发作(包括肌肉纤维化的发展)的方法。血管活性肠肽血管活性肠肽(VIP)是结本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗肌肉肌病的方法，其包括对有需要的患者施用包含血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.02.09 US 62/113,943;2015.04.10 US 62/145,770;1.用于治疗肌肉肌病的方法，其包括对有需要的患者施用包含血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。2.用于在有需要的患者中预防肌肉收缩诱导的损伤的方法，其包括施用含有血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。3.用于减缓心肌病进展的方法，其包括对有需要的患者施用含有血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。4.用于治疗心肌病的方法，其包括对有需要的患者施用含有血管活性肠肽(VIP)和一种或多种弹性蛋白样肽(ELP)的药物组合物。5.权利要求1-4任一项的方法，其中所述药物组合物减少肌肉纤维化。6.上述权利要求任一项的方法，其中所述ELP包含SEQIDNO:1-13任一项的重复单元，或其组合。7.上述权利要求任一项的方法，其中所述ELP包含VPGXG(SEQIDNO:3)的重复单元。8.权利要求7的方法，其中所述ELP包含VPGXG的120个重复单元，其中X独立选自Val、Ala和Gly。9.权利要求8的方法，其中X以约5:2:3的比率独立选自Val、Ala和Gly。10.权利要求1-4任一项的方法，其中相比于对VPAC1，所述VIP肽对VPAC2具有相对结合偏好。11.权利要求1-4任一项的方法，其中所述药物组合物经配制用于皮下、肌内或静脉内施用。12.权利要求11的方法，其中所述药物组合物通过皮下施用。13.权利要求1-4任一项的方法，其中所述药物组合物以低剂量施用。14.权利要求13的方法，其中所述剂量为0.1mg/kg每日至10mg/kg每日。15.权利要求1-4任一项的方法，其中所述药物组合物每日施用。16.权利要求1-4任一项的方法，其中所述药物组合物每周施用1-3次。17.权利要求1-4任一项的方法，其中所述药物组合物每周施用。18.权利要求1-4任一项的方法，其中所述药物组合物每月施用1-2次。19.权利要求5的方法，其中相比未治疗的患者所述肌肉纤维化减少约5％、10％、20％、30％、40％或50％。20.权利要求5的方法，其中相比未治疗的患者，所述肌肉纤维化延迟约1个月、6个月、1年或5年。21.权利要求1-4任一项的方法，其中肌肉收缩性在所述患者中保持。22.权利要求21的方法，其中相比健康受试者，所述肌肉收缩性在所述患者中以约90％、80％、70％、60％或50％保持。23.权利要求1-4任一项的方法，其中肌肉强度在所述患者中保持。24.权利要求23的方法，其中相比健康受试者，所述肌肉强度在所述患者中以约90％、80％、70％、60％或50％保持。25.权利要求19-24任一项的方法，其中所述肌肉是骨骼肌。26.权利要求19-24任一项的方法，其中所述肌肉是心肌。27.权利要求1-4任一项的方法，其中相比于未治疗的肌细胞，所述药物组合物使肌细胞保持缩短。28.权利要求1-4任一项的方法，其中相比于未治疗的肌细胞，所述药物组合物使肌细胞保持再伸长速度。29.权利要求1-4任一项的方法，其中相比于未治疗的肌细胞，所述药物组合物使肌细胞保持收缩性。30.权利要求1-4任一项的方法，其中相比于未治疗的肌细胞，所述药物组合物使肌细胞保持松弛。31.权利要求27-30任一项的方法，其中所述肌细胞是心肌细胞。32.权利要求27-30任一项的方法，其中所述肌细胞是骨骼肌肌细胞。33.权利要求1-4任一项的方法，其中所述患者具有肌营养不良症。34.权利要求33的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·戈尔戈普洛斯，S·阿诺德，D·J·巴兰斯，
申请(专利权)人：费斯生物制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US