一种细菌营养培养基及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种用于制备细菌营养培养基的方法，该培养基制备过程科学，包含了兔肝粉的制备过程，制得的培养基对于细菌的培养效果较好。本发明专利技术还提供了一种细菌营养培养基，细菌营养培养基能够对一般细菌均可进行培养，可利用此培养基进行药敏实验，达到准确有效的利用药物对病原菌导致的疾病进行治疗的效果。

A bacterial culture medium and its preparation method

The invention provides a method for preparing bacterial nutrient medium, and the preparation process of the medium includes the preparation process of rabbit liver powder, and the culture medium obtained has better culture effect on bacteria. The invention also provides a bacterial nutrient medium, which can cultivate common bacteria, and can use this medium to carry out drug sensitivity test, so as to achieve accurate and effective use of drugs to treat diseases caused by pathogenic bacteria.

【技术实现步骤摘要】
一种细菌营养培养基及其制备方法
本专利技术涉及兽医微生物领域，尤其涉及一种细菌营养培养基及其制备方法。
技术介绍
目前，畜牧业养殖场中病原菌会导致牲畜患病，并且难以通过临床症状对病原菌导致的疾病进行准确的诊断，导致用药不准以及药物滥用。例如，对于兔场而言，巴氏杆菌、波氏杆菌和魏氏梭菌等为獭兔发病的主要病原菌，但是难以通过临床症状对上述病原菌导致的疾病进行准确的诊断，导致用药不对症，或者用药对症但是用量过多过少造成致病菌对一些常用抗生素产生耐药性，导致用药对症却没有明显效果。为了能够有效快捷的治疗病原菌，一般的方式是：通过提供一种能够对一般细菌均可进行培养的全营养培养基，进行细菌的培养，然后通过药敏实验对培养基中的细菌进行药物敏感度测定，通过细菌对药物敏感度的高低以决定使用哪种药物以及使用多少含量，从而准确有效的对病原菌导致的疾病进行治疗。目前被相关技术人员广泛接受的可用于对一般细菌均能够进行培养且用来进行快速药敏实验的全营养培养基为三种：(1)高氏一号培养基、(2)营养琼脂培养基、(3)加血清血红素的普通兔鲜血培养基。但是这三种培养基均存在一定的问题，例如高氏一号培养基属于合成培养基，这种培养基的各种成分是已知的各种化学物质，微生物在这类培养基中生长较慢。另外，培养基的质量受培养基制备过程的影响。目前，培养基制备过程中通常会存在以下问题：培养基制备过程不科学，导致制得的培养基对于细菌的培养效果不好。因此，提供一种能够对一般细菌均可进行培养的全营养培养基，并且可利用此培养基进行药敏实验，从而准确有效的利用药物对病原菌导致的疾病进行治疗以及提供一种能够制备这种全营养培养基的制备方法，使制得的培养基对于一般细菌具有良好的培养效果具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术旨在解决上面描述的问题。本专利技术的目的是提供一种针对一般细菌均可培养的全营养培养基及其制备方法。根据本专利技术的一个方面，提供一种用于制备细菌营养培养基的方法，所述细菌为导致兔发病的病原菌，所述制备方法包括下述步骤：步骤1，制备兔肝粉；步骤2，取0.6～1.0L的水加入烧杯中，量取兔肝粉25～35g，NaCl3～7g，柠檬酸钠1～3g，葡萄糖5～15g，乳糖5～15g，甘露醇5～15g溶解于水中并搅拌均匀，得到混合均匀的混合液，然后量取琼脂15～25g加入混合液中，在90℃～98℃下对混合液加热至琼脂完全融化，并在此加热过程中不断搅拌混合液；步骤3，在步骤2中所得的加入琼脂的混合液中补加水0.1～0.3L，然后加入pH调节剂，将混合液的pH值调节至6.8～7.5；步骤4，将步骤3所得调节PH值之后的混合溶液在120℃～122℃，101～102KPa的条件下高温灭菌18～22分钟，得到高温灭菌后的混合溶液；步骤5，将步骤4中高温灭菌后的混合溶液冷却至44℃～55℃，加入兔鲜血75～85ml搅拌均匀得到所述细菌营养培养基。具体地，所述制备兔肝粉的步骤还包括：步骤11，取生兔肝脏140～160g，加水150～200ml煮沸8～12分钟，去水研磨成肉糊；步骤12，在步骤11所得肉糊中添加蛋白酶搅拌均匀，将搅拌均匀的肉糊置于55～65℃下保温11～13小时得到保温后的肉糊，对保温后的肉糊加水300～500ml进行水煮煮沸12～17分钟使保温后的肉糊中的蛋白酶失活，并形成兔肝脏浆液；步骤13，将步骤12中获得的兔肝脏浆液在离心机中以2800～3200转/分钟的转速离心处理4～6分钟，过滤掉残渣和油，得到过滤后的兔肝脏浆液，将所述过滤后的兔肝脏浆液干燥形成兔肝粉。其中，蛋白酶用量为0.29～0.31万U/g。具体地，所述制备方法包括下述步骤：步骤1，制备兔肝粉；步骤2，取0.8L的水加入烧杯中，量取兔肝粉30g，NaCl5g，柠檬酸钠2g，葡萄糖10g，乳糖10g，甘露醇10g溶解于水中并搅拌均匀，得到混合均匀的混合液，然后量取琼脂20g加入混合液中，在95℃下对混合液加热至琼脂完全融化，并在此加热过程中不断搅拌混合液；步骤3，在步骤2中所得的加入琼脂的混合液中补加水0.2L，然后加入pH调节剂，将混合液的pH值调节至7.2；步骤4，将步骤3所得调节PH值之后的混合溶液在121℃，101KPa的条件下高温灭菌20分钟，得到高温灭菌后的混合溶液；步骤5，将步骤4中高温灭菌后的混合溶液冷却至50℃，加入兔鲜血80ml搅拌均匀得到所述细菌营养培养基。具体地，所述制备兔肝粉的步骤还包括：步骤11，取生兔肝脏150g，加水170ml煮沸10分钟，去水研磨成肉糊；步骤12，在步骤11所得肉糊中添加蛋白酶搅拌均匀，将搅拌均匀的肉糊置于60℃下保温12小时得到保温后的肉糊，对保温后的肉糊加水400ml进行煮沸15分钟使保温后的肉糊中的蛋白酶失活，并形成兔肝脏浆液；步骤13，将步骤12中获得的兔肝脏浆液在离心机中以3000转/分钟的转速离心处理5分钟，过滤掉残渣和油，得到过滤后的兔肝脏浆液，将所述过滤后的兔肝脏浆液干燥形成兔肝粉。具体地，所述蛋白酶用量为0.3万U/g。具体地，所述pH调节剂包括碱性调节剂或酸性调节剂，其中所述碱性调节剂包括NaHCO3、NaOH中的至少一种，所述酸性调节剂包括HCl。根据本专利技术的另一个方面，所述方法制备的细菌营养培养基，其特征在于，所述细菌为导致兔发病的病原菌，所述细菌营养培养基包括兔肝粉、NaCl、柠檬酸钠、葡萄糖、乳糖、甘露醇、兔鲜血、水以及琼脂；其中，各组分的含量为：具体地，所述细菌营养培养基包括兔肝粉、NaCl、柠檬酸钠、葡萄糖、乳糖、甘露醇、兔鲜血、水以及琼脂；其中，各组分的含量为：根据本专利技术提供的制备细菌营养培养基的方法，上述制备方法按照步骤1～步骤5的顺序依次进行。其中，兔肝粉作为原料参与细菌营养培养基的制备，步骤2中水的含量与步骤3中水的含量计入本专利技术提供的细菌营养培养基制备的组分关系中。本专利技术中的兔肝粉是由兔肝脏为原料，通过步骤11～步骤13的顺序依次进行制得。兔肝粉可以以纯组分的形式作为细菌营养培养基配方中的组分参与到制备过程中的步骤2中，即将兔肝粉混于步骤2中的混合液中；也可由步骤13制备得到的过滤后的兔肝脏浆液的形式作为细菌营养培养基配方中的组分参与到制备过程中的步骤2中，即将过滤后的兔肝脏浆液混于步骤2中的混合液中，此时过滤后的兔肝脏浆液中的兔肝脏及作为溶剂的水的含量需满足本专利技术的细菌营养培养基制备的组分关系。也就是说，本专利技术中的培养基的配方可以为兔肝粉，也可以为过滤后的兔肝脏浆液。由此可见，本专利技术中的兔肝粉以及过滤后的兔肝脏浆液均可用来配制培养基。兔肝粉可储藏保存，当配制培养基时可直接取用加水配制。兔肝脏浆液可以通过兔场就地取材兔肝脏，制得兔肝脏浆液而不干燥成兔肝粉，以浆液的形式参与到配方配制中。由步骤2可知，首先取0.6～1.0L的水加入烧杯中，然后量取兔肝粉25～35g，NaCl3～7g，柠檬酸钠1～3g，葡萄糖5～15g，甘露醇5～15g溶解于水中搅拌均匀，得到混合均匀的混合液。首先在烧杯中加入0.6～1.0L的水，然后将兔肝粉、NaCl等各组分按相应含量溶解于水中，先加入水再添加其他组分溶解，避免了因先添加其他组分对于烧杯内壁造成粘附。先将除琼脂之外的药品溶解，再加入琼脂，因为部分药品很难溶解，而加入琼脂后不便本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于制备细菌营养培养基的方法，其特征在于，所述细菌为导致兔发病的病原菌，所述制备方法包括下述步骤：步骤1，制备兔肝粉；步骤2，取0.6～1.0L的水加入烧杯中，量取兔肝粉25～35g，NaCl 3～7g，柠檬酸钠1～3g，葡萄糖5～15g，乳糖5～15g，甘露醇5～15g溶解于水中并搅拌均匀，得到混合均匀的混合液，然后量取琼脂15～25g加入混合液中，在90℃～98℃下对混合液加热至琼脂完全融化，并在此加热过程中不断搅拌混合液；步骤3，在步骤2中所得的加入琼脂的混合液中补加水0.1～0.3L，然后加入pH调节剂，将混合液的pH值调节至6.8～7.5；步骤4，将步骤3所得调节PH值之后的混合溶液在120℃～122℃，101～102KPa的条件下高温灭菌18～22分钟，得到高温灭菌后的混合溶液；步骤5，将步骤4中高温灭菌后的混合溶液冷却至44℃～55℃，加入兔鲜血75～85ml搅拌均匀得到所述细菌营养培养基。

【技术特征摘要】
1.一种用于制备细菌营养培养基的方法，其特征在于，所述细菌为导致兔发病的病原菌，所述制备方法包括下述步骤：步骤1，制备兔肝粉；步骤2，取0.6～1.0L的水加入烧杯中，量取兔肝粉25～35g，NaCl3～7g，柠檬酸钠1～3g，葡萄糖5～15g，乳糖5～15g，甘露醇5～15g溶解于水中并搅拌均匀，得到混合均匀的混合液，然后量取琼脂15～25g加入混合液中，在90℃～98℃下对混合液加热至琼脂完全融化，并在此加热过程中不断搅拌混合液；步骤3，在步骤2中所得的加入琼脂的混合液中补加水0.1～0.3L，然后加入pH调节剂，将混合液的pH值调节至6.8～7.5；步骤4，将步骤3所得调节PH值之后的混合溶液在120℃～122℃，101～102KPa的条件下高温灭菌18～22分钟，得到高温灭菌后的混合溶液；步骤5，将步骤4中高温灭菌后的混合溶液冷却至44℃～55℃，加入兔鲜血75～85ml搅拌均匀得到所述细菌营养培养基。2.如权利要求1所述的细菌营养培养基制备方法，其特征在于，所述制备兔肝粉的步骤还包括：步骤11，取生兔肝脏140～160g，加水150～200ml煮沸8～12分钟，去水研磨成肉糊；步骤12，在步骤11所得肉糊中添加蛋白酶搅拌均匀，将搅拌均匀的肉糊置于55～65℃下保温11～13小时得到保温后的肉糊，对保温后的肉糊加水300～500ml进行水煮煮沸12～17分钟使保温后的肉糊中的蛋白酶失活，并形成兔肝脏浆液；步骤13，将步骤12中获得的兔肝脏浆液在离心机中以2800～3200转/分钟的转速离心处理4～6分钟，过滤掉残渣和油，得到过滤后的兔肝脏浆液，将所述过滤后的兔肝脏浆液干燥形成兔肝粉。3.如权利要求2所述的细菌营养培养基制备方法，其特征在于，所述蛋白酶用量为0.29～0.31万U/g。4.如权利要求1或2所述的细菌营养培养基制备方法，其特征在于，所述制备方法包括下述步骤：步骤1，制备兔肝粉；步骤2，取0.8L的水加入烧杯中，量取兔肝粉30g，NaCl5g，柠檬酸钠2g，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王雷，郅永伟，李振海，薛家兵，
申请(专利权)人：内蒙古东达獭兔循环产业研究院，
类型：发明
国别省市：内蒙古,15