The invention discloses a trehalose synthase mutant and its application in the preparation of trehalose, belonging to the field of gene engineering and enzyme engineering. The Thermobifida fusca YX trehalose synthase activity near the center of the 289th glutamate mutated glycine mutants will process 295th E289G; histidine into asparagine mutants H295N; 344th methionine lysine mutant M344K mutation; 367th methionine to leucine mutant M367L and double mutant. H295N/E289G, H295N/M344K, H295N/M367L mutants and H295N/M344K/M367L based on H295N. The mutant substrate even if it contains certain glucose, trehalose synthase enzyme conversion efficiency of trehalose production still will not be greatly affected, and has high industrial value.
【技术实现步骤摘要】
一种海藻糖合酶突变体及其在制备海藻糖中的应用本申请是申请号为:201510210023.X,申请日为:2015年4月28日,申请名称为:一种海藻糖合酶的突变体及其制备方法和应用的分案申请。
本专利技术涉及一种海藻糖合酶突变体及其在制备海藻糖中的应用,属于基因工程和酶工程领域。
技术介绍
海藻糖是一种安全无毒以1,1-糖苷键构成的非还原性二糖,有三种异构体即(α,α)、异海藻糖(β,β)、新海藻糖(α,β),一般以二水化合物的形式存在。与蛋白质或者氨基酸共同加热,不会产生美拉德反应,并且在酸性、碱性、高温、超低温环境都能保持一定的稳定性。其独特的生物活性,使得海藻糖得到广泛的应用。大量的研究表明,海藻糖是单细胞生物、动物组织和器官、蛋白质、生物膜、医药制剂等的保护剂,能够抑制脂质酸化、淀粉老化、蛋白质变性,具有矫味矫臭功能、搞玻璃转化温度、低吸湿性、低甜度等性质,能够将其应用到医药业、农业、生化制品业、化妆品行业、食品加工业。早期商业化的海藻糖是从酵母中提取的。1990年价格约700美元/kg,提取率过低,成本过高。1995年日本利用双酶法实现工业化生产,使得海藻糖 ...
【技术保护点】
一种海藻糖合酶突变体,其特征在于,相对于海藻糖合酶亲本,将第367位的甲硫氨酸突变成亮氨酸;或将第367位的甲硫氨酸突变成亮氨酸,同时将第295位的组氨酸突变成天冬酰胺;所述海藻糖合酶亲本的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种海藻糖合酶突变体,其特征在于,相对于海藻糖合酶亲本,将第367位的甲硫氨酸突变成亮氨酸;或将第367位的甲硫氨酸突变成亮氨酸,同时将第295位的组氨酸突变成天冬酰胺;所述海藻糖合酶亲本的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.制备权利要求1所述突变体的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)在亲本海藻糖合酶氨基酸序列的基础上确定突变位点;设计定点突变的突变引物,以携带海藻糖合酶基因的载体为模板进行...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴敬,宿玲恰,张悦,
申请(专利权)人:湖南汇升生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:湖南,43
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