一种靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪和miR‑205共载外泌体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪(DTIC)和miR‑205共载外泌体及其制备方法和应用。本发明专利技术发现DTIC和miR‑205联用对人黑色素瘤有协同抑制作用，进一步采用胆固醇修饰的核酸适体Ap16为靶头，来源于泌乳中期牛奶的外泌体(exosomes)包载DTIC和miR‑205，通过冻融法成功构建Ap16‑exosome/(DTIC/miR‑205)纳米给药系统，证实了DTIC和miR‑205的协同抗肿瘤作用，以及适体Ap16介导共载外泌体提高miR‑205增强DTIC抗恶性黑色素瘤效果的可行性。本发明专利技术为构建抗恶性黑色素瘤纳米给药系统开辟了新途径，也为基因治疗与化疗联用提供了理论依据。

A targeted anti malignant melanoma in Dhaka and a total of 205 miR dacarbazine loaded exosomes and preparation method and application thereof

The invention relates to a targeted anti melanoma Dhaka dacarbazine (DTIC) and miR 205 sameload exosome and preparation method and application thereof. The present invention found that DTIC and miR 205 combined with a synergistic inhibitory effect on human melanoma, the nucleic acid cholesterol modified aptamer Ap16 as the target head, from the mid lactation milk excretion of body (exosomes) loaded DTIC and miR 205 by freeze thawing method was successfully constructed Ap16 exosome/ (DTIC/miR 205) nano drug delivery system was confirmed by DTIC and miR 205 synergistic antitumor effects, and aptamer mediated Ap16 carrying exosomes increased miR 205 enhanced the feasibility of the DTIC anti melanoma effect. The invention opens up a new way for constructing a nano drug delivery system for malignant melanoma, and provides a theoretical basis for the combination of gene therapy and chemotherapy.

【技术实现步骤摘要】
一种靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪和miR-205共载外泌体及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物医药
，特别涉及一种给药系统，具体地说，涉及一种靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪和miR-205共载外泌体及其制备方法和应用。
技术介绍
恶性黑色素瘤(malignantmelanoma，MM)是一种来源于黑色素细胞的恶性程度很高的肿瘤，多发生于体表皮肤，占皮肤恶性肿瘤的7％～20％，主要是由神经鞘细胞发生突变，酪氨酸代谢和色素生成异常所引起。早期的恶性黑色素瘤病人可通过手术治愈，但也有较多患者发生难以控制的侵袭和转移，这既是影响黑色素瘤患者生存的主要因素，又是治疗恶性黑色素瘤的最大障碍。恶性黑色素瘤一旦发生远处转移，其预后很差，5年内死亡率较高，其主要原因是转移性黑色素瘤对大多数细胞毒药物耐药，只有达卡巴嗪(Dacarbazine，DTIC)、替莫唑胺(Temozolomide)等少数几种药物可能有效，但它们的有效率也仅有10％～20％，无进展生存期约3～6个月。近年来MM的发病率有明显上升的趋势，包括原先发病率较低的地区也是如此，因此，亟需研究基因治疗、靶向治疗、生物化学治疗等以提高本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗恶性黑色素瘤的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物以达卡巴嗪和miR‑205为活性成分，并含有药学上可接受的载体。

【技术特征摘要】
1.一种治疗恶性黑色素瘤的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物以达卡巴嗪和miR-205为活性成分，并含有药学上可接受的载体。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的载体为牛奶外泌体，所述的达卡巴嗪和miR-205包载于牛奶外泌体的内部。3.一种靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪和miR-205共载外泌体，其特征在于，所述的靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪和miR-205共载外泌体为外部结合胆固醇修饰的核酸适体Ap16，内部包载达卡巴嗪和miR-205的牛奶外泌体。4.根据权利要求3所述的靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪和miR-205共载外泌体，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：a)收集处于泌乳中期奶牛生产的牛奶，采用超速离心方法制备牛奶外泌体；b)将胆固醇修饰的核酸适体Ap16和牛奶外泌体通过冻融法实现二者的结合，构建Ap16-牛奶外泌体；c)通过电穿孔方法完成Ap16-牛奶外泌体对达卡巴嗪和miR-205的包载。5.根据权利要求4所述的靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪和miR-205共载外泌体，其特征在于，步骤a)所述的采用超速离心方法制备牛奶外泌体具体为：将牛奶10000-15000g低温2-6℃离心20-40min，取上清液继续80000-120000g低温2-6℃离心40-80min，分离上清液再次120000-150000g低温2-6℃离心80-100min，弃去上清液，收集沉淀，即得。6.根据权利要求4所述的靶向抗恶性黑色素瘤的达卡巴嗪和miR-205共载外泌体...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱全刚，陈中建，李莹，信如娟，刘业强，沈翠娥，张红敏，安多朋，潘会君，
申请(专利权)人：上海市皮肤病医院，
类型：发明
国别省市：上海,31