一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒制造技术

一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，包括：盒体、盒盖，其中，盒体内部设有两块隔板，将盒体分隔成三个容腔；每个容腔内设与容腔大小适配的硬质海绵，分别为海绵A，海绵B与海绵C，海绵A上设有竖直放置96微孔板的凹槽；海绵B上设有竖直放置反应缓冲液试剂瓶，增强液试剂瓶，浓缩清洗液试剂瓶的对应试剂瓶孔；海绵C上设有竖直放置包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶，铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶，STXⅡ校准品试剂瓶的对应试剂瓶孔。本实用新型专利技术试剂盒利用镧系元素铕的荧光、高效价的单克隆抗体和免疫磁珠的富集作用，达到灵敏特异快速的对血清中的抗原进行定量检测的目的，操作简易，便于临床使用，利于大规模推广应用。

A time resolved fluorescence immunoassay kit based on STX II immunomagnetic beads

An analysis kit, resolved fluorescence immunoassay based on STX II immunomagnetic time including: box body and a box cover, wherein the box body is provided with a partition board, the box body is divided into 3 cavities; each cavity of a hard sponge and the cavity size adaptation, respectively A B sponge sponge. C and sponge, sponge is arranged on the vertical groove A 96 microplate; sponge B is provided with a vertical reaction buffer reagent bottle, enhanced reagent bottle, corresponding reagent bottle hole cleaning liquor bottle; sponge C is provided with vertically placed coated beads reagent bottle STX II monoclonal antibody, anti EU standard STX II monoclonal antibody solution reagent bottle, corresponding reagent bottle hole STX II calibrator reagent bottle. Monoclonal antibody and immunomagnetic enrichment kit by the utility model, the fluorescence of lanthanide europium in the high titer, sensitivity and specificity of serum to achieve rapid antigen in quantitative detection, simple operation, convenient for clinical use, conducive to large-scale popularization and application.

【技术实现步骤摘要】
一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒
本技术属于免疫检测分析技术和纳米生物
，特别是针对这一领域的试剂盒方面，具体涉及为一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒。
技术介绍
产志贺毒素大肠杆菌(Shigatoxin-producingEscherichia.Coli,STEC)是一类人畜共患肠道致病菌。能引起包括水样腹泻(Diarrhea)、出血性结肠炎(HemorrhagicColitis,HC)，溶血性尿毒综合征(HemolyticUremicSyndrome,HUS)等一系列人体疾病，特别是HUS可对患者肾脏造成不可恢复的功能性损伤，病死率较高。STEC感染具有暴发性、强烈的致病性与致死性等特点，严重威胁着人类健康，是我国及世界面临的又一重大公共卫生挑战。大量研究指出：志贺毒素(Shigatoxin,STX)是STEC主要毒力因子。该毒素分为STX1和STX2两个亚型，均由A、B二种亚基组成，一个A亚基单体与B亚基的五聚体以非共价键结合构成全毒素。其中STX2被认为是感染性溶血性尿毒综合征(hemolyticuremicsyndrome,HUS)的主要致病原,介导了致病菌对宿主最为严重的致病过程，成为决定病人预后的关键性因素。作为引发HUS的物质基础，STXⅡ已成为诊断、治疗STEC感染及其并发症的靶向分子。用这种广谱的标志物为靶向，可建立快速、易操作、不依赖血清型的定量诊断方法，补充和丰富传统依靠病原体分离进行确诊的STEC诊断，从而大大提高对非O157血清型STEC感染的检出率。目前以STX毒素为靶标的STEC诊断方法有免疫胶体金层析法、酶联免疫法(ELISA)等。对于STEC感染者而言，存在于病人血清或粪便中的STX毒素的量较低，用常规的ELISA灵敏度不易达到，需要更高灵敏度的检测方法以提高检出限。基于免疫磁珠的以稀土离子螯合物作为标记物的时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolvedfluorescenceimmunoassay,TRFIA)是一种高灵敏、特异、稳定的免疫检测方法，包被特异性抗体的磁珠可与含有相应抗原的靶物质特异性地结合形成免疫磁珠-抗原-稀土离子螯合物标记抗体的复合物，然后通过外加磁场，使磁珠和溶液快速分离，除拥有常规TRFIA技术优点外，经过化学基团修饰的磁性微球代替常规微孔板用于免疫分离，表面积更大，吸附作用更牢固。在短时间内将待测样品中的目标分子捕获富集，缩短反应和检测时间，进一步提高检测灵敏度，可解决传统和常规检测方法存在的费时费力，血清型依赖和灵敏度偏低等问题。免疫磁珠结合时间分辨荧光免疫分析检测是非放射标记超微量免疫检测技术和纳米标记技术的完美结合，无放射性同位素损伤和污染，在临床检测分析中被广泛推广使用。但目前针对STXⅡ毒素检测没有此种技术现成的试剂盒，或者存在一些试剂盒，但设计不合理、试剂取用不方便同样导致在使用中给操作者带来困扰的问题，因此需要一种将各种所需试剂归类放置，设计合理，方便使用的试剂盒。本技术基于现有技术中试剂盒的使用不便及设计不合理等问题，提供了一种基于志贺毒素II(STXⅡ)免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒。
技术实现思路
为了克服现有技术中试剂盒的使用不便及设计不合理等问题，本技术提供一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒。一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，包括：盒体、盒盖，其特征在于，盒体内部设有两块隔板，将盒体分隔成三个容腔；每个容腔内设置与容腔大小适配的硬质海绵，分别为海绵A，海绵B与海绵C，海绵A上设有竖直放置96微孔板的凹槽；海绵B上设有竖直放置反应缓冲液试剂瓶，增强液试剂瓶，浓缩清洗液试剂瓶的对应试剂瓶孔；海绵C上设有竖直放置包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶，铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶，STXⅡ校准品试剂瓶的对应试剂瓶孔。此种设置可以有效将不同性质的试剂进行分隔，防止取放混乱，且微孔板的竖直放置可以有效节省试剂盒的水平空间。进一步，两个隔板水平放置，形成3个平行容腔，或者两隔板垂直设置，形成两个竖直容腔，一个水平容腔。进一步，所述海绵A、B、C设计不同的颜色，不同颜色的设计可以方便区分，使各种试剂区分更加直观明显。进一步，所述海绵A上设置1个96微孔板凹槽；所述海绵B上设置3个孔，分别为1个反应缓冲液试剂瓶孔、1个增强液试剂瓶孔，1个浓缩清洗液试剂瓶孔，对应试剂瓶孔内放置对应试剂瓶；所述海绵C上设置8个孔，分别为1个包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶孔，1个铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶孔，6个STXⅡ校准品试剂瓶孔，对应试剂瓶孔内放置对应试剂瓶，此种设置可以保证所有所需试剂都安置于试剂盒内。进一步，当3容腔水平设置时，所述海绵C上的试剂瓶孔分为两排，第一排设置6个STXⅡ校准品试剂瓶孔，第二排设置1个包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶孔，1个铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶孔；1个包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶孔与1个铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶孔设置于第二排的两边。此种设置可以更好的区分不同试剂，减小在一块海绵上取拿失误发生的概率。或者，当3容腔设置为两个竖直容腔，一个水平容腔设置时，所述海绵C上的试剂瓶孔设置1排，6个STXⅡ校准品试剂瓶孔设置在一侧，1个包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶孔与1个铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶孔设置于另一侧。进一步，所述微孔板由可拆式酶标板和放置在上面的酶标板条组成。进一步，所述微孔板为透明的96孔板，透明的微孔板设置适应时间分辨荧光仪器的读取要求。进一步，所述海绵A、B、C的高度相同且大于最大试剂瓶的高度。此种设置可以保证每个试剂瓶都很好的设置于海绵孔内，防止较大试剂瓶过于突出。进一步，对应设置试剂瓶孔的深度，使所有试剂瓶最终伸出的长度相同，这样可以保证试剂盒的整齐性及扣合的方便。进一步，所述海绵A的凹槽上方壁上设置方便取放微孔板的弧形口。弧形口的设置可以方便对微孔板的取拿。进一步，所述盒体内的两隔板与盒体一体连接。一体设置可以保证结构的稳定性。当三容腔水平设置时，所述盒体内的两隔板与盒体还可分离连接，盒体上设置放置隔板的滑槽。分离设置可保证对试剂盒控制的灵活性。进一步，所述隔板中部及盒体侧面设置向外突出的侧翼，海绵A、B、C上设置与侧翼对应的侧翼孔。进一步，所述盒体与盒盖通过转轴连接。转轴连接设置可以有效避免盒盖随处放置后对试剂盒的污染进一步，所述盒体与盒盖非连接侧设置卡扣结构。进一步，所述卡扣结构位对应突起结构。对应突起结构设置简单，但又可以保证盒体与盒盖的有效闭合。本技术试剂盒的有益效果为：隔板设计有效的将不同用途的材料和试剂分开，防止了取用混淆。硬质海绵和凹槽设计不仅固定了试剂瓶，避免在运输过程中发生晃动移位造成碰撞，保证了试剂瓶内的试剂或抗体溶液保存完好，又由于试剂瓶摆放合理紧凑，极大的节约了所述盒体内的空间。综上，本技术所述的试剂盒易操作，稳定性好，检测灵敏度更高，动态范围更广，达到优良的性能参数。通过所述基于志贺毒素II(STXⅡ)免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒对样本中的STXⅡ进行检测，由于所述试剂盒中试剂瓶放置稳定本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，包括：盒体(1)、盒盖(2)，其特征在于，盒体(1)内部设有两块隔板(6)，将盒体(1)分隔成三个容腔；每个容腔内设置与容腔大小适配的硬质海绵，分别为海绵A(3)，海绵B(4)与海绵C(5)，海绵A(3)上设有竖直放置96微孔板(31)的凹槽(32)；海绵B(4)上设有竖直放置反应缓冲液试剂瓶，增强液试剂瓶，浓缩清洗液试剂瓶的对应试剂瓶孔；海绵C(5)上设有竖直放置包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶，铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶，STXⅡ校准品试剂瓶的对应试剂瓶孔。

【技术特征摘要】
1.一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，包括：盒体(1)、盒盖(2)，其特征在于，盒体(1)内部设有两块隔板(6)，将盒体(1)分隔成三个容腔；每个容腔内设置与容腔大小适配的硬质海绵，分别为海绵A(3)，海绵B(4)与海绵C(5)，海绵A(3)上设有竖直放置96微孔板(31)的凹槽(32)；海绵B(4)上设有竖直放置反应缓冲液试剂瓶，增强液试剂瓶，浓缩清洗液试剂瓶的对应试剂瓶孔；海绵C(5)上设有竖直放置包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶，铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶，STXⅡ校准品试剂瓶的对应试剂瓶孔。2.根据权利要求1所述的基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其特征在于，两个隔板(6)水平放置，形成3个平行容腔。3.根据权利要求1所述的基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其特征在于，两隔板(6)垂直设置，形成两个竖直容腔，一个水平容腔。4.根据权利要求1所述的基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其特征在于，所述海绵A(3)上设置1个96微孔板(31)凹槽(32)；所述海绵B(4)上设置3个孔，分别为1个反应缓冲液试剂瓶孔(41)、1个增强液试剂瓶孔(42)，1个浓缩清洗液试剂瓶孔(43)，对应试剂瓶孔内放置对应试剂瓶；所述海绵C(5)上设置8个孔，分别为1个包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶孔(51)，1个铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶孔(52)，6个STXⅡ校准品试剂瓶孔(53)，对应试剂瓶孔内放置对应试剂瓶。5.根据权利要求2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：温恬，黄超，迟莹，李燕，曾晓燕，史凤娟，焦永军，
申请(专利权)人：江苏省疾病预防控制中心，
类型：新型
国别省市：江苏,32