The invention provides a new 25 hydroxy vitamin D3 artificial antigen, its preparation method and application. It mainly solves the technical problems that the structure of the artificial antigen of the 25 hydroxy vitamin D3 is defective and can not be detected accurately. The 25 hydroxy vitamin D3 artificial antigen is characterized by the following structural formula:
【技术实现步骤摘要】
一种25羟基维生素D3人工抗原、制备方法及应用
本专利技术涉及抗原、制备方法及应用，具体是一种25羟基维生素D3人工抗原、制备方法及应用。
技术介绍
血清25羟维生素D3是合成1,25(OH)2VD3的前体,是维生素D的主要循环形式，其半寿期较长,血中浓度较稳定,可直接反映机体维生素D的水平。维生素D参与不但钙磷代谢的调节作用，近年来维生素D被证实具有更为广泛的生物学效应和免疫学效应，包括用以预防及治疗佝偻病、骨软化病和婴儿手足搐搦症，抑制多种类型细胞的增殖，诱导细胞调亡和分化，调节机体免疫系统的功能等。因此，血清中的25羟维生素D3已经成为健康体检的重要指标。现在有越来越多公司参与开发25羟维生素D3检测试剂盒。高品质的抗原，是开发25羟维生素D3检测试剂盒的关键技术和基础。由于维生素D化学合成技术非常复杂，多数公司因为缺乏维生素D化学技术，在开发25羟维生素D3抗原策略中，绝大多数都是采取修饰3位羟基，或者25位羟基。在羟基接入链接臂，虽然比较简单好实现，但是25羟维生素D3的羟基被偶联后使得关键基团被覆盖。这种策略下得到的抗原，以及用这种抗原免疫得到的抗体，...
【技术保护点】
一种25羟基维生素D3人工抗原，其特征是结构式如下：
【技术特征摘要】
1.一种25羟基维生素D3人工抗原，其特征是结构式如下：，是25羟基维生素D3的C19位置原子通过链接臂与载体链接。2.根据权利要求1所述的一种25羟基维生素D3人工抗原，其特征是所述链接臂是长度1~20个原子的碳链；所述载体是天然蛋白质，牛血清白蛋白、人血清白蛋白、兔血清白蛋白、卵清白蛋白、匙孔血蓝蛋白、谷胱甘肽S转移酶、纯化的重组蛋白、人工合成多肽、牛血清白蛋白、兔血清白蛋白、人血清白蛋白、卵清蛋白、钥孔戚血蓝蛋白、多价抗原肽中的一种,或是人工蛋白、酶、多肽、聚合物中的一种。3.根据权利要求2所述的一种25羟基维生素D3人工抗原，其特征是链接臂碳链上的原子被N，O，S，P之一原子，或者被多元环，杂环取代。4.根据权利要求2所述的一种25羟基维生素D3人工抗原，其特征是每个载体上链接的25羟基维生素D3数目是1~50。5.权利要求1所述25羟基维生素D3人工抗原的制备方法，其特征是：将25羟基维生素D3利用选择性臭氧化，把25羟基维生素D3的C10=C19双键打开变成共轭酮，然后通过重新构建双键手段，把含有特征链接功能下述基团之一：C端，N端，羧基，氨基，羟基，巯基，马来酰亚胺基团或生物素特征基团的链接臂接到中间体得到半抗原，最后通过半抗原的链接端与载体偶联反应，得到25羟基维生素D3人工抗原，反应式如下：R是羧基，氨基，羟基，巯基，马来酰亚胺基团或生物素特征基团中的一种。6.根据权利要求5所述的25羟基维生素D3人工抗原的制备方法，其特征是：所述的半抗原的制备步骤是：将把25羟基维生素D3溶解在乙醇中，在-78℃，通入臭氧反应5小时。反应结束后，蒸掉溶剂，用硅胶柱层析方法，以乙酸乙酯正己烷洗脱，收集组分，旋干得到中间体2，中间体2溶解在二甲苯或甲苯中，加热100-150℃，加入原料3...
【专利技术属性】
技术研发人员：程华威，李秀芬，
申请(专利权)人：上海惠斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。