虾夷扇贝中微囊藻毒素检测方法技术

本发明专利技术公开了一种虾夷扇贝中微囊藻毒素检测方法，包括如下步骤：1)、虾夷扇贝样品前处理，得样品液；2)、HLB/PDMS涂层搅拌棒的制备；3)、搅拌棒吸附萃取：先将HLB/PDMS涂层搅拌棒在甲醇中浸泡，然后置入5～10mL的样品液中，加酸调整pH值为3～7后进行富集；然后取出HLB/PDMS涂层搅拌棒放入乙腈中进行MCs解吸附，所得到的解吸附溶液用于液相色谱‑质谱分析；从而获得解吸附溶液中7种微囊藻毒素的浓度，最终获得虾夷扇贝样品7种微囊藻毒素的浓度。

Detection of microcystins in scallop

The present invention discloses a kind of Yesso Scallop in Shell microcystins in detection method, which comprises the following steps: 1), Yesso Scallop in Shell sample, sample solution; 2), preparation of HLB/PDMS coated stir bar; 3), stir bar sorptive extraction: the HLB/PDMS coating stirring rod immersed in methanol. Then in 5 ~ 10mL of sample solution, adding acid to adjust pH value from 3 to 7 after enrichment; then remove the HLB/PDMS coating stirring rod is placed in acetonitrile MCs solution adsorption, desorption solution obtained by liquid chromatography mass spectrometry for the analysis of; to obtain the concentration of 7 kinds of microcystins in desorption solution finally, the concentration of Yesso Scallop in Shell samples of 7 kinds of microcystins.

【技术实现步骤摘要】
虾夷扇贝中微囊藻毒素检测方法
本专利技术涉及一种虾夷扇贝中微囊藻毒素检测方法，属于生化分离
，更具体涉及一种利用搅拌棒吸附分离虾夷扇贝中7种微囊藻毒素并利用超高效液相色谱-质谱分析对其定性、定量分析的方法。
技术介绍
微囊藻毒素(Microcystins)为蓝藻水华释放的一类具有强烈致癌作用的肝毒素，其毒性较大，分布广泛，目前已发现异构体多约80余种，其结构由7个氨基酸组成，主要产自微囊藻(Microcystisaeruginosa)、鱼腥藻(Anabaena)、念珠藻(Nostocales)等浮游性蓝藻，其中MC-LR最为常见。调查表明，我国60％的水体由于过多接纳了氮和磷等营养物质而出现了蓝藻水华现象，该现象使水面湖靛堆积，大量消耗水中溶解氧致鱼类窒息死亡，藻体死亡分解过程中释放生物毒素类次级代谢产物，导致水体污染，水生动植物死亡。此外，已有研究证明，MCs进入人体肝细胞后，能强烈地抑制蛋白磷酸酶(PP1、PP2A)的活性，诱发细胞角蛋白高度磷酸化，导致肝细胞微丝分解、破裂和出血。因此，MCs通过食物链传递到水生动物中，并在水生动物体中积累富集而导致的人体健康潜在风险已经引本文档来自技高网...

【技术保护点】
虾夷扇贝中微囊藻毒素检测方法，其特征是包括如下步骤：1)、虾夷扇贝样品前处理：①、取1g待测虾夷扇贝肉进行匀浆；②、在浆液中加入10～20mL甲醇后于80±5℃超声提取20～30min；③、将超声提取所得物离心，取出上层清液；④、以离心所得的沉淀替代步骤②中的浆液重复上述步骤②～步骤③的超声提取和离心；⑤、将所有的上层清液合并后用氮气吹干，然后用5～10mL水复溶，得样品液；2)、HLB/PDMS涂层搅拌棒的制备：①、将搅拌棒清洗后烘干；②、配制PDMS溶胶：将100±5μL聚二甲基硅氧烷、100±5μL甲基三甲氧基硅烷、10±1μL聚甲基氢硅氧烷和100±5μL 95％三氟乙酸混合，得PDM...

【技术特征摘要】
1.虾夷扇贝中微囊藻毒素检测方法，其特征是包括如下步骤：1)、虾夷扇贝样品前处理：①、取1g待测虾夷扇贝肉进行匀浆；②、在浆液中加入10～20mL甲醇后于80±5℃超声提取20～30min；③、将超声提取所得物离心，取出上层清液；④、以离心所得的沉淀替代步骤②中的浆液重复上述步骤②～步骤③的超声提取和离心；⑤、将所有的上层清液合并后用氮气吹干，然后用5～10mL水复溶，得样品液；2)、HLB/PDMS涂层搅拌棒的制备：①、将搅拌棒清洗后烘干；②、配制PDMS溶胶：将100±5μL聚二甲基硅氧烷、100±5μL甲基三甲氧基硅烷、10±1μL聚甲基氢硅氧烷和100±5μL95％三氟乙酸混合，得PDMS溶胶；95％三氟乙酸为由95％三氟乙酸和5％水混合而得，％为体积％；③将步骤①所得的烘干搅拌棒浸入步骤②所得的PDMS溶胶，取出后在搅拌棒的表面裹上HLB微粒，然后于60～80℃干燥24～30h，得HLB/PDMS涂层搅拌棒；3)、搅拌棒吸附萃取：先将HLB/PDMS涂层搅拌棒在甲醇中浸泡20～30min，然后置入5～10mL的步骤1)所得的样品液中，加酸调整pH值为3～7，以600～1000rpm富集60～120min；然后取出HLB/PDMS涂层搅拌棒放入含有100±20μL乙腈的离心管中超声10～20min，使样品中的MCs解吸附，所得到的解吸附溶液用于液相色谱-质谱分析；4)、液相色谱-质谱条件：色谱柱：WatersXSelectHSST3(2.1mm×150mm，3.5μm)，流动相：A为含0.1％甲酸的乙腈溶液，B为含0.1％甲酸的水溶液；梯度洗脱程序...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈清，崔益玮，李诗言，戴志远，
申请(专利权)人：浙江工商大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33