胸腺五肽、利福霉素‑异烟肼的壳聚糖包合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种胸腺五肽、利福霉素‑异烟肼的壳聚糖包合物及其制备方法，所述包合物为壳聚糖包覆胸腺五肽和利福霉素‑异烟肼杂合物得到的纳米颗粒。本发明专利技术通过简单的包合作用将两种不同作用靶点的药物(胸腺五肽、利福霉素‑异烟肼杂合物)包合在一起，得到胸腺五肽、利福霉素‑异烟肼的壳聚糖包合物，其对结核分枝杆菌具有比利福霉素和异烟肼的混合物更好的抑菌效果，通过特定的给药方式将其送达给药部位后包合物分散开，两个或多个药物分子分别作用于各自的靶点而发挥作用，在保证药效的同时减少药物的服用量。

【技术实现步骤摘要】
胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物及其制备方法
本专利技术涉及医药合成
，具体涉及一种胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物及其制备方法。
技术介绍
结核病是一种世界范围内的流行性传染病，并且具有致命危险。对结核病治疗一般采用多种药剂合用，如异烟肼、利福平等组合使用六个月以上。患者将这些药物一起服用或分开服用，总的服用量比较大，而且服用方式给患者造成不便，患者需要记录好几种药物的服用时期。因此，制备几种药物的联合制剂对患者是有利的，目前临床上尚无治疗结核病的单一制剂。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的上述不足，提供一种胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物及其制备方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案是：提供一种胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物，所述包合物为壳聚糖包覆胸腺五肽和利福霉素-异烟肼杂合物得到的纳米颗粒。按上述方案，所述利福霉素-异烟肼杂合物的制备方法如下：1)合成噁嗪利福霉素：将利福霉素钠溶于N,N-二甲基甲酰胺中，得到利福霉素钠溶液，加入浓硫酸对利福霉素钠进行酸化，待溶液变为深红色后升温至35-50℃，缓慢滴加N,N-二羟甲基叔丁胺，滴加完毕后继续环合反应，反应结束后冷却至室温，用冰乙酸水溶液析出沉淀物，将沉淀物过滤、水洗、干燥得到噁嗪利福霉素；2)合成利福霉素-异烟肼杂合药物：将步骤1)所得噁嗪利福霉素溶于无水乙醇得到噁嗪利福霉素溶液，然后向所述噁嗪利福霉素溶液中加入哌嗪和异烟肼，升温至55-60℃进行缩合反应，反应结束后后处理得到福霉素-异烟肼杂合物。按上述方案，步骤1)所述利福霉素钠溶液浓度为0.02-0.08g/mL。按上述方案，步骤1)所述浓硫酸浓度为98％，其中硫酸与利福霉素钠摩尔比为1:2。按上述方案，步骤2)所述噁嗪利福霉素溶液浓度为0.03-0.08g/mL。本专利技术还提供上述胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物的制备方法，其步骤如下：将利福霉素-异烟肼杂合物溶于NaOH溶液中，得到利福霉素-异烟肼溶液，然后将利福霉素-异烟肼溶液加入胸腺五肽的NaOH溶液中，再加入三聚磷酸钠的水溶液，充分混合得混合液，然后将混合液缓慢滴加到壳聚糖醋酸溶液中，室温搅拌30min，加入乳糖作为保护剂，进行冷冻干燥48h后得到胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物。优选的是，所述利福霉素-异烟肼溶液浓度为0.001-0.004g/mL。优选的是，所述胸腺五肽的NaOH溶液的浓度为0.01-0.02g/mL。优选的是，所述三聚磷酸钠的水溶液浓度为0.001-0.004g/mL。优选的是，壳聚糖、利福霉素-异烟肼杂合物、胸腺五肽与三聚磷酸钠的质量比为5-10：0.5-1.5：1.5-3：1-2。优选的是，将混合液缓慢滴加到壳聚糖醋酸溶液中得到的反应液中壳聚糖的浓度为1.5-6.0g/L。实验结果表明,只有在特定浓度范围内,即反应液中壳聚糖浓度范围在1.5-6.0g/L时才能够形成壳聚糖纳米颗粒。本专利技术还包括包含上述胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物的药物组合物。以及上述胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物用于治疗结核病的用途。胸腺五肽(thymopentin，TP5)是人工合成的五肽，其氨基酸顺序和结构与由49个氨基酸组成的天然胸腺生成素(thymopoietin，TP)的32～36位氨基酸组成相同，即TP生物功能的活性基团Arg-Lys-Asp-Val-Tyr，具有TP相似的生物活性，是一种双向免疫调节剂，现临床广泛用于类风湿性关节炎、恶性肿瘤、慢性肝炎及严重感染等疾病的治疗，有广阔的发展前景。TP5在体内很快由蛋白酶和氨肽酶降解为氨基酸。目前TP5临床应用制剂均为注射用，通过进行化学结构修饰、加入酶抑制剂或改变给药途径(如鼻腔给药)可增加蛋白酶和氨肽酶稳定性或提高吸收度。其结构式如下：利福霉素类抗生素，是由地中海链丝菌产生的一类抗生素，它具有广谱抗菌作用，对结核杆菌、麻风杆菌、链球菌、肺炎球菌等革兰氏阳性细菌，特别是耐药性金黄色葡萄球菌的抑制作用都很强。异烟肼是抗结核杆菌药，用于肺结核，皮肤结核等，最早专利技术于1952年，它的专利技术使结核病的治疗起到了根本性的变化。通过杂合技术将利福霉素和异烟肼两者结合在一起得到的利福霉素-异烟肼杂合物具有较好的药效活性。结构式如下：根据“鸡尾酒疗法”将几种不同单一靶点药物联用或选择使用作用于多个分子靶标的“多靶点”药物治疗复杂疾病时则会有较佳疗效。通过药剂学中包合的方法，将具有不同靶点的药物分子包合起来以形成多靶点药物，由于两个药物分子缺少共性，所以在体内可各自保留原来分子的全部或部分结构特征。然后通过特定的给药方式，到达指定的给药部位，包合物分散开，两个或多个药物分子分别作用于各自的靶点而发挥作用。根据此发现，本申请人制备出胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物。通过对所合成的包合物的活性测试，发现此包合物相对其中任一组分都有较好的抗菌活性。本专利技术的有益效果在于：本专利技术通过简单的包合作用将两种不同作用靶点的药物(胸腺五肽、利福霉素-异烟肼杂合物)包合在一起，得到胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物，其对结核分枝杆菌具有比利福霉素和异烟肼的混合物更好的抑菌效果，通过特定的给药方式将其送达给药部位后包合物分散开，两个或多个药物分子分别作用于各自的靶点而发挥作用，在保证药效的同时减少药物的服用量。附图说明图1为胸腺五肽(TP5)、壳聚糖纳米颗粒、实施例1步骤2)制备的利福霉素-异烟肼杂合药物以及实施例1步骤3)制备的胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物的红外光谱图。具体实施方式为使本领域技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面结合附图对本专利技术作进一步详细描述。实施例1制备胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物，具体步骤如下：1)合成噁嗪利福霉素：在三口瓶中装入利福霉素S-钠盐1.00g(0.0014mol),加入20mLN,N-二甲基甲酰胺(DMF)将其溶解，放入搅拌用的磁子，常温下搅拌30分钟，待充分溶解后，加入98％的浓硫酸0.072g(0.0007mol)酸化，常温下搅拌30分钟，反应液由深蓝色变成深红色，然后升温至35～50℃，缓缓滴加N,N-二羟甲基叔丁胺0.352g(0.0026mol)，滴毕后，反应液由深红色变为深蓝色，继续保温反应2小时，冷却至室温，向反应液中加入滴加了2滴冰乙酸的水溶液200mL，间歇搅拌，有大量蓝色沉淀，反应结束后(用薄层层析硅胶板跟踪反应)析出，静置过夜，过滤，适量水洗，干燥后即可得到1.03g蓝色固体物质，即噁嗪利福霉素；2)合成利福霉素-异烟肼杂合药物：将步骤1)所得噁嗪利福霉素用20mL无水乙醇溶解，得到噁嗪利福霉素溶液，在100mL三口瓶中装入噁嗪利福霉素溶液和哌嗪0.13g(0.0015mol)与0.039g的异烟肼，升温至55-60℃，反应液由深蓝色变为红棕色，保温反应3小时，反应结束后(用薄层层析硅胶板跟踪反应)，在旋转蒸发仪中于45℃下将溶剂乙醇旋干，得到砖红色固体物质，即利福霉素-异烟肼杂合药物；3)合成胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物：a.将10mg壳聚糖固体(CS)溶于5mL体积分数为0.25％的醋酸溶液，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胸腺五肽、利福霉素‑异烟肼的壳聚糖包合物，其特征在于：所述包合物为壳聚糖包覆胸腺五肽和利福霉素‑异烟肼杂合物得到的纳米颗粒。

【技术特征摘要】
1.一种胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物，其特征在于：所述包合物为壳聚糖包覆胸腺五肽和利福霉素-异烟肼杂合物得到的纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物，其特征在于所述利福霉素-异烟肼杂合物的制备方法如下：1)合成噁嗪利福霉素：将利福霉素钠溶于N,N-二甲基甲酰胺中，得到利福霉素钠溶液，加入浓硫酸对利福霉素钠进行酸化，待溶液变为深红色后升温至35-50℃，缓慢滴加N,N-二羟甲基叔丁胺，滴加完毕后继续环合反应，反应结束后冷却至室温，用冰乙酸水溶液析出沉淀物，将沉淀物过滤、水洗、干燥得到噁嗪利福霉素；2)合成利福霉素-异烟肼杂合药物：将步骤1)所得噁嗪利福霉素溶于无水乙醇得到噁嗪利福霉素溶液，然后向所述噁嗪利福霉素溶液中加入哌嗪和异烟肼，升温至55-60℃进行缩合反应，反应结束后后处理得到福霉素-异烟肼杂合物。3.根据权利要求2所述的胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物，其特征在于步骤1)所述利福霉素钠溶液浓度为0.02-0.08g/mL。4.根据权利要求2所述的胸腺五肽、利福霉素-异烟肼的壳聚糖包合物，其特征在于步骤1)所述浓硫酸浓度为98％，其中硫酸与利福霉素钠摩尔比...

【专利技术属性】
技术研发人员：祝宏，张焕，彭薇，杨昭，
申请(专利权)人：武汉工程大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42