具有抗炎特性的肽制造技术

本发明专利技术的方面涉及具有抗炎活性的肽、含有一种或多种所述肽的组合物以及所述肽治疗与动物特别是人和其他哺乳动物中的过度炎症相关的病状的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有抗炎特性的肽相关申请的交叉引用根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求2014年10月14日提交的美国临时专利申请序列号62/063,909的优先权益，所述申请的公开内容特此以引用的方式整体并入本文。
本专利技术的方面涉及具有抗炎活性的肽、含有一种或多种所述肽的组合物以及所述肽治疗与动物特别是人和其他哺乳动物中的过度炎症相关的病状的用途。
技术介绍
在正常条件下，炎症为帮助动物从损伤中恢复的过程。急性炎症为组织对有害刺激物的初始响应。它涉及一种复杂的高度调节的过程，所述过程当受损组织中存在的细胞(包括巨噬细胞、树突细胞、组织细胞、枯否细胞以及肥大细胞)感测与损伤相关的分子并且变得激活时开始。在激活时，这些细胞释放炎症介质，诸如血管扩张剂。血管扩张剂诱导在损伤附近的血流和血管渗透性增加。这进而诱导血浆和白细胞(包括嗜中性粒细胞和巨噬细胞)从血液到受损组织的移动增加。因此炎症介质通常快速降解，所以急性炎症需要不断刺激来持续。因此，一旦有害刺激被去除，急性炎症就结束。各种刺激试剂(包括但不限于细菌、病毒、物理损伤、化学损伤、癌症、化学疗法以及辐射疗法)根据特定试剂和暴露于所述试剂的动物的遗传组成可以引起延长的且过量的炎症。据信此炎症(称为慢性炎症)为许多普遍且导致虚弱的疾病的贡献因素，所述疾病包括心脏病、癌、呼吸道疾病、中风、神经病诸如阿尔兹海默病、糖尿病以及肾病。慢性炎症的结果为正常组织破坏以及其被富含胶原的结缔组织替换。富含胶原的结缔组织也称为瘢痕组织，其展现出与正常组织相比减少的组织功能。持续且延长的瘢痕组织形成进而导致纤维化。纤维化为影响肺部、皮肤、肝脏、心脏和骨髓的疾病的常见症状，并且为诸如特发性肺纤维化、硬皮病、瘢痕瘤、肝硬化、心肌纤维化、糖尿病肾病、脊髓发育不良综合征以及其他病症等疾病的关键性因素。慢性炎症和纤维化的研究已指示不管活化剂和受影响组织如何，信号蛋白的常见网络倾向于一起起作用，以建立促炎状态。信号蛋白的此网络包括许多不同的细胞因子、细胞因子受体、转录因子和微RNA，包括TGFβ、TGFβRII和miRNA19b。尽管关于涉及过量炎症的病状(诸如慢性炎症和纤维化)的知识逐渐增长，但是此类病状的治疗仍然不清楚。许多药物和其他物质已显示具有体内或体外的抗炎活性，但是对于由炎症引起或加重的许多并发症而言，仍不存在疗法。另外，许多抗炎疗法与有害的副作用相关。因此，仍急需鉴别减少炎症而无有害副作用的治疗剂。
技术实现思路
本专利技术部分基于具有强烈的体外和体内抗炎活性的新型肽的发现。本专利技术还部分基于以下发现：本专利技术的肽特异性结合一种或多种信号蛋白上的关键性功能区域，所述信号蛋白特别是促炎性细胞因子、巨噬细胞抑制蛋白和组蛋白调节蛋白。本专利技术还部分基于以下发现：本专利技术的肽在循环中足够稳定，以允许静脉内施用。因此，在一方面，本专利技术提供一种包含抗炎性多肽的组合物。在某些实施方案中，抗炎性多肽的长度为3至24个氨基酸残基并且包含由交替的疏水性模块和亲水性模块组成的条带性亲疏(striapathic)区域。在某些实施方案中，每个亲水性模块由一个或多个(例如，1-5、1-4、1-3)亲水性氨基酸残基的序列组成。在某些实施方案中，每个疏水性模块由一个或多个(例如，1-5、1-4、1-3)疏水性氨基酸残基的序列组成。在某些实施方案中，抗炎性多肽的条带性亲疏区域包含m个亲水性模块和n个疏水性模块，其中m和n为正整数。例如，在某些实施方案中，条带性亲疏区域包含两个亲水性模块和两个疏水性模块(2:2)、两个亲水性模块和三个疏水性模块(2:3)、三个亲水性模块和两个疏水性模块(3:2)、三个亲水性模块和三个疏水性模块(3:3)、三个亲水性模块和四个疏水性模块(3:4)或者四个亲水性模块和三个疏水性模块(4:3)。在某些实施方案中，抗炎性多肽的条带性亲疏区域的长度为至少5、6、7、8、9或10个氨基酸残基。在优选的实施方案中，条带性亲疏区域的长度为7与12个之间的氨基酸残基。在某些实施方案中，条带性亲疏区域构成多肽长度的至少25％。例如，在某些实施方案中，条带性亲疏区域构成多肽长度的至少30％、35％、40％、45％、50％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。在某些实施方案中，抗炎性多肽的条带性亲疏区域采用螺旋二级结构。螺旋二级结构的实例包括310-螺旋、α-螺旋、π-螺旋以及多脯氨酸螺旋。在其他实施方案中，抗炎性多肽的条带性亲疏区域采用β-链二级结构。在优选的实施方案中，抗炎性多肽的条带性亲疏区域具有两亲性构象。在某些实施方案中，抗炎性多肽包含具有与本文所公开的结构式中任一种(例如，式I-LIII中任一种)相符的序列的条带性亲疏区域，大致上由所述区域组成或者由所述区域组成。在某些实施方案中，抗炎性多肽为表3-9中列出的多肽之一。在其他实施方案中，抗炎性多肽与表3-9中公开的多肽中的任一种具有至少70％、80％或90％同源性。在某些实施方案中，抗炎性多肽结合至少一种信号蛋白。在优选的实施方案中，抗炎性多肽以足够的亲和力体外和/或体内结合至少一种信号蛋白，以调节信号蛋白的活性。抗炎性多肽所结合的信号蛋白的实例包括用作促炎性细胞因子的蛋白质、抑制巨噬细胞活性的蛋白质或者调节组蛋白功能的蛋白质。在某些实施方案中，抗炎性多肽结合选自由以下组成的组的蛋白质靶标：NFkBII类蛋白(例如，RelA、RelB、cRel、NF-kB1和NF-kB2)、TGFβ、Notch受体(例如，Notch1)、Wnt受体(例如，Wnt8R)、TRAIL、EGFR、白介素受体(例如，IL6R、IL10R)、周期素依赖性激酶(例如，CDK6)、CD47、SIRP-α、转谷氨酰胺酶(例如，TGM2)、LEGUMAIN、CD209、FAS、程序性细胞死亡蛋白1(PD-1/CD279)、促分裂原活化蛋白激酶激酶7(MKK7)、核糖核苷酸还原酶(RNR)以及组蛋白甲基转移酶。在优选的实施方案中，抗炎性多肽结合两个、三个、四个或更多个此类信号蛋白。例如，在某些实施方案中，抗炎性多肽结合NF-kBII类蛋白(例如，RelB)和用作促炎性细胞因子、巨噬细胞活性抑制剂或组蛋白功能调节剂的至少一种其他信号蛋白。在优选的实施方案中，抗炎性多肽以与每个靶标足够的结合亲和力结合NF-kBII类蛋白和至少一种其他蛋白靶标，以调节两种靶标的体内活性。在优选的实施方案中，抗炎性多肽结合NFkBII类蛋白(例如，RelB)的二聚位点。在某些实施方案中，抗炎性多肽结合血液中的载体蛋白(例如，血清白蛋白)。在某些实施方案中，抗炎性多肽被修饰为包含例如接头、碳水化合物、脂质或聚合物(例如，PEG)。在某些实施方案中，第一抗炎性多肽连接至第二抗炎性多肽，以便形成多聚物，诸如二聚物。在某些实施例中，二聚物为同源二聚物。在其他实施例中，二聚物为异源二聚物。在某些实施方案中，接头为肽接头。在优选的实施方案中，肽接头与第一抗炎性多肽的C-末端形成肽键并且与第二抗炎性多肽的N-末端形成肽键。在某些实施方案中，接头为可生物降解接头。在某些实施方案中，接头为二硫键。在某些实施方案中，二硫键通过一对半胱氨酸残基(例如，来自所连接的每个多肽的一个半胱氨酸残基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含肽的抗炎性组合物，其中所述肽的长度为3至24个氨基酸残基并且包含由交替的亲水性模块和疏水性模块组成的条带性亲疏区域，其中每个亲水性模块由1至5个亲水性氨基酸残基组成；其中每个疏水性模块由1至5个疏水性氨基酸残基组成；并且其中所述肽结合至NFkB II类蛋白上的二聚位点。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.14 US 62/063,9091.一种包含肽的抗炎性组合物，其中所述肽的长度为3至24个氨基酸残基并且包含由交替的亲水性模块和疏水性模块组成的条带性亲疏区域，其中每个亲水性模块由1至5个亲水性氨基酸残基组成；其中每个疏水性模块由1至5个疏水性氨基酸残基组成；并且其中所述肽结合至NFkBII类蛋白上的二聚位点。2.如权利要求1所述的抗炎性组合物，其中所述交替的亲水性模块和疏水性模块分别被定义为Xm模块和Yn模块，其中m和n为确定不同模块的正整数，其中每个Xm模块由根据式Xma-Xmb-Xmc-Xmd-Xme的序列组成，其中Xma选自由以下组成的组：天然存在的亲水性氨基酸、非天然存在的亲水性氨基酸和亲水性氨基酸模拟物，并且其中Xmb、Xmc、Xmd和Xme各自单独地不存在或选自由以下组成的组：天然存在的亲水性氨基酸、非天然存在的亲水性氨基酸和亲水性氨基酸模拟物，其中每个Yn模块由根据式Yna-Ynb-Ync-Ynd-Yne的序列组成，其中Yna选自由以下组成的组：天然存在的疏水性氨基酸、非天然存在的疏水性氨基酸和疏水性氨基酸模拟物，并且其中Ynb、Ync、Ynd和Yne各自单独地不存在或选自由以下组成的组：天然存在的疏水性氨基酸、非天然存在的疏水性氨基酸和疏水性氨基酸模拟物。3.如权利要求1或2所述的抗炎性组合物，其中所述肽还结合至人血清白蛋白。4.如权利要求1至3中任一项所述的抗炎性组合物，其中所述肽的所述条带性亲疏区域含有至少两个Xm模块(X1和X2)和至少两个Yn模块(Y1和Y2)。5.如权利要求1至4中任一项所述的抗炎性组合物，其中所述肽的所述条带性亲疏区域具有7至12个氨基酸残基的长度。6.如权利要求1至5中任一项所述的抗炎性组合物，其中所述肽的所述条带性亲疏区域：(i)在生理条件下具有两亲性构象；(ii)当结合至所述NFkBII类蛋白时具有两亲性310-螺旋构象、两亲性α-螺旋构象或两亲性π-螺旋构象；(iii)含有总容积为至少650立方埃的疏水性氨基酸残基；(iv)其特征在于疏水性氨基酸残基的容积的总和与亲水性氨基酸残基的容积的总和的比率，其中所述比率为至少0.75或更高；(v)包含至少一个脯氨酸残基并且采用包含富含脯氨酸螺旋的两亲性构象；或者(vi)采用两亲性β链构象。7.如权利要求6所述的抗炎性组合物，其中所述两亲性310-螺旋、α-螺旋或π-螺旋构象包含具有至少100°面部弧度的的疏水性部分。8.如权利要求1至7中任一项所述的抗炎性组合物，其中所述条带性亲疏区域包含由选自由以下组成的组的式定义的序列：Y1a-X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-X2b-Y3a(式VII)；X1a-Y1a-X2a-X2b-Y2a-Y2b-X3a-X3b-Y3a-Y3b(式XI)；Y1a-Y1b-X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-X2b-Y3a-X3a(式X)；Y1a-Y1b-X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-X2b-Y3a-Y3b(式IX)；Y1a-Y1b-Y1c-X1a-Y2a-Y2b-Y2c(式I)；Y1a-Y1b-Y1c-X1a-Y2a-Y2b-Y2c-X2a-Y3a-X3a(式II)；X2a-Y3a-X3a-Y1a-Y1b-Y1c-X1a-Y2a-Y2b-Y2c(式III)；X1a-X1b-X1c-Y2a-X2a-X2b-X2c(式IV)；Y1a-X1a-X1b-X1c-Y2a-X2a-X2b-X2c-Y3a-X3a(式V)；X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-X2b(式VI)；Y1a-X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-X2b-Y3a-Y3b-X3a(式VIII)；X1a-Y1a-Y1b-X2a-X2b-Y2a-Y2b-X3a-X3b-Y3a(式XII)；Y1a-X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-X2b-X2c-Y3a-Y3b(式XIII)；X1a-X1b-X1c-Y1a-Y1b-X2a-X2b-Y2a-Y2b-Y2c(式XIV)；Y1a-Y1b-Y1c-X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-X2b-X2c(式XV)；Y1a-Y1b-X1a-X1b-X1c-Y2a-Y2b-X2a-X2b-Y3a(式XVI)；Y1a-Y1b-X1a-X1b-Y2a-Y2b(式XVII)；X1a-Y1a-Y1b-X2a-X2b-Y2a-Y2b-X3a(式XVIII)；Y1a-Y1b-X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-Y3a-Y3b-X3a(式XIX)；X1a-Y1a-Y1b-X2a-Y2a-Y2b-X3a-X3b-Y3a-Y3b(式XX)；Y1a-Y1b-X1a-X1b-Y2a-X2a-X2b-Y3a-Y3b(式XXI)；X1a-Y1a-Y1b-X2a-X2b-X2c-Y2a-X3a-Y3a-Y3b(式XXII)；Y1a-Y1b-X1a-Y2a-X2a-X2b-X2c-Y3a-Y3b-X3a(式XXIII)；X1a-X1b-Y1a-X2a-Y2a-X3a-X3b(式XXIV)；Y1a-Y1b-Y1c-X1a-X1b-Y2a-X2a-Y3a-X3a-X3b(式XXV)；X1a-X1b-Y1a-X2a-Y2a-X3a-X3b-Y3a-Y3b-Y3c(式XXVI)；X1a-X1b-X1c-Y1a-Y1b-Y1c(式XXVII)；X1a-X1b-X1c-X1d-Y1a-Y1b-Y1c-Y1d(式XXVIII)；Y1a-X1a-X1b-X1c-X1d-Y2a-Y2b-Y2c-Y2d-X2a(式XXIX)；X1a-X1b-X1c-X1d-X1e-Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-Y1e(式XXX)；Y1a-Y1b-X1a-X1b-X1c-Y2a-Y2b-Y2c-X2a-X2b(式XXXI)；X1a-Y1a-X2a-Y2a-X3a-X3b-X3c-Y3a-Y3b-Y3c(式XXXII)；Y1a-Y1b-Y1c-X1a-X1b-X1c(式XXXIII)；Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-X1a-X1b-X1c-X1d(式XXXIV)；X1a-Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-X2a-X2b-X2c-X2d-Y2a(式XXXV)；Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-Y1e-X1a-X1b-X1c-X1d-X1e(式XXXVI)；X1a-X1b-Y1a-Y1b-Y1c-X2a-X2b-X2c-Y2a-Y2b(式XXXVII)；Y1a-Y1b-Y1c-X1a-X1a-X1c-Y2a-X2a-Y3a-X3a(式XXXVIII)；Y1a-X1a-X1b-X1c-X1d-X1e-Y2a(式XXXIX)；Y1a-X1a-X1b-X1c-X1d-X1e-Y2a-Y2b-Y2c-Y2d(式XL)；Y1a-Y1b-X1a-X1b-X1c-X1d-X1e-Y2a-Y2b-Y2c(式XLI)；Y1a-Y1b-Y1c-X1a-X1b-X1c-X1d-X1e-Y2a-Y2b(式XLII)；Y1a-Y1b-Y1c-Y1e-X1a-X1b-X1c-X1d-X1e-Y2a(式XLIII)；X1a-Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-Y1e-X2a(式XLIV)；X1a-Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-Y1e-X2a-X2b-X2c-X2d(式XLV)；X1a-X1b-Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-Y1e-X2a-X2b-X2c(式XLVI)；X1a-X1b-X1c-Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-Y1e-X2a-X2b(式XLVII)；X1a-X1b-X1c-X1d-Y1a-Y1b-Y1c-Y1d-Y1e-X2a(式XLVIII)；及Y1a-Y1b-X1a-Y2a-Y2b-X2a-Y3a-Y3b-X3a-Y4a(式L)。9.如权利要求8所述的抗炎性组合物，其中Y1a、Y1b、Y1c、Y2a、Y2b、Y2c、Y3a、Y3b以及Y3c各自单独地选自由Phe(F)、Trp(W)、Tyr(Y)、Leu(L)、Cys(C)、Met(M)、Val(V)、Ile(I)以及Ala(A)组成的组并且X1a、X1b、X1c、X2a、X2b、X2c、X3a以及X3b各自单独地选自由Arg(R)、Lys(K)、His(H)、Asn(N)、Gln(Q)、Asp(D)以及Glu(E)组成的组。10.如权利要求1至9中任一项所述的抗炎性组合物，其中所述条带性亲疏区域包含由式VII定义的序列：Y1a-X1a-X1b-Y2a-Y2b-X2a-X2b-Y3a(式VII)。11.如权利要求10所述的抗炎性组合物，其中所述条...

【专利技术属性】
技术研发人员：杰西M·杰尼斯，亨利W·洛佩兹，乔治R·马丁，克莱顿·耶茨，查尔斯E·加文，
申请(专利权)人：激流生物科学有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US