一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法，属于有机钙领域。本发明专利技术通过将杜仲叶与三七叶混合提取并收集提取物，其中杜仲叶提取物有效提高成骨细胞的活性，促进骨细胞的分化和增殖，三七提取物有效促进毛细血管再生，改善局部微循环，两者协同作用，改善成骨细胞增殖环境后，与牛骨中煅烧制备的羟基磷酸钙和胶原蛋白复合，经酶解形成多肽，为成骨细胞分化增殖提供钙源和胶原多肽。本发明专利技术螯合钙利用度高，在提高吸收效率的同时，有效促进骨骼细胞的生长发育，值得推广与使用。

Preparation method for promoting skeletal cell development type chelated calcium

The invention relates to a preparation method for promoting skeletal cell development type chelated calcium, belonging to the field of organic calcium. The eucommia leaf and the 37 leaf mixed extraction and collecting the extract, the Eucommia ulmoides extracts effectively improve the activity of osteoblasts, promote the differentiation and proliferation of bone cells, 37 extracts effectively promote the regeneration of capillary, improve local microcirculation, both for improved osteoblast proliferation and bone in the environment after calcination the preparation of hydroxy calcium phosphate and collagen composite, the formation of peptide hydrolysis, providing a source of calcium and collagen polypeptide for proliferation and differentiation of osteoblasts. The present invention has high utilization of chelating calcium, and can effectively promote the growth and development of bone cells while improving the absorption efficiency, and is worthy of popularization and use.

【技术实现步骤摘要】
一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法
本专利技术涉及一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法，属于有机钙领域。
技术介绍
钙是人体的重要组成物质，是人体中所含各种有机和无机元素排行第五大元素，钙在人体内几乎参与了所有的生命活动。最新的科学研究表明，人体之所以衰老或者发生疾病，与钙的代谢发生紊乱，使细胞内外的钙浓度发生变化密切相关。近年来，越来越多人注意补钙的问题。理想的钙剂应具备钙含量高、吸收效率高、无副作用、服用方便、口感好等特点，若含有人体所需要的多种氨基酸、维生素及微量元素等物质则更为理想。近年来，国内外对补钙制剂的研究集中在有机钙方面，但有机钙盐也存在不同的毒副作用，如乳酸钙长期服用容易产生疲劳；葡萄糖酸钙能引起糖尿病患者血糖升高；醋酸钙能引起腹泻等。虽然作为第三代补钙产品的氨基酸鳌合钙吸收率高，对人体无害，但是其吸收的钙质并不能有效的促进骨骼细胞的生长和发育，仅仅吸收钙质已不能达到现有人体补钙的需求，所以制备一种促进骨骼发育，使骨骼迅速生长的螯合钙很有必要。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题：针对现有补钙用螯合钙吸收效率虽高，但其利用率较低，无法促进骨骼细胞生长发育的问题，提供了一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下所述的技术方案是：（1）按质量比1:5，将三七叶片与杜仲叶片混合并研磨过150目，得混合球磨颗粒，按质量比1:10，将混合球磨颗粒与去离子水混合，水浴加热并离心分离，收集上层清液并旋转蒸发得浓缩液，按体积比1:8，将浓缩液与无水乙醇混合，搅拌并静置陈化，过滤得滤液，旋转蒸发至干得干燥提取物，取1～2g干燥提取物、0.1～0.2mL吐温-80、85～100mLDMEM细胞培养液搅拌混合并灭菌处理，得改性混合液；（2）取新鲜牛骨并研磨过20目筛，得牛骨颗粒并洗涤干燥，煅烧后碾磨并过200目筛，得煅烧牛骨粉末，按质量比1:10，将煅烧牛骨粉末与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，超声分散后静置，过滤得滤饼，得活化煅烧颗粒；（3）按质量比1:5，将胶原蛋白与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，搅拌得胶原蛋白混合液，按质量比1:25，将胰蛋白酶添加至胶原蛋白混合液中，搅拌混合并调节pH至8.0，水浴加热制备得酶解混合液；（4）按重量份数计，分别称量45～50份酶解混合液、25～30份活化煅烧颗粒和15～20份改性混合液置于烧杯中，搅拌混合并加热至沸腾，保温加热后，旋转蒸发至干，碾磨并过80目筛，即可制备得一种促骨骼细胞发育型螯合钙。步骤（2）所述的牛骨颗粒煅烧温度为550～600℃。步骤（3）所述的调节pH采用的是质量分数5％碳酸氢钠溶液。步骤（4）所述的旋转蒸发温度为75～80℃。本专利技术与其他方法相比，有益技术效果是：本专利技术将杜仲叶与三七叶混合提取并收集提取物，由于提取物中的杜仲叶提取物具有抑制骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化的作用，同时补充骨骼发育所需要的微量元素，有效提高成骨细胞的活性，促进骨细胞的分化和增殖，三七提取物有效促进毛细血管再生，改善局部微循环，两者协同作用，改善成骨细胞增殖环境后，与牛骨中煅烧制备的羟基磷酸钙和胶原蛋白复合，经酶解形成多肽，为成骨细胞分化增殖提供钙源和胶原多肽，从原料和根本上为成骨细胞的发育进行改良，使成骨细胞生长发育时对钙质的吸收率大幅提高，有效促进成骨细胞的增殖和生长。具体实施方式首先选取新鲜杜仲叶片和三七叶片，洗净后自然晾干，按质量比1:5，将三七叶片与杜仲叶片混合并研磨，过150目筛得混合球磨颗粒，按质量比1:10，将混合球磨颗粒与去离子水混合，在55～60℃下水浴加热2～3h；待水浴加热完成后，在2500～3000r/min下离心分离10～15min，收集上层清液并置于45～50℃下旋转蒸发至原体积的1/5，得浓缩液，按体积比1:8，将浓缩液与无水乙醇混合，在室温下搅拌混合1～2h后，静置陈化6～8h，过滤得滤液，将滤液置于45～50℃下旋转蒸发至干，得干燥提取物；选取1～2g干燥提取物、0.1～0.2mL吐温-80、85～100mLDMEM细胞培养液置于烧杯中，在室温下搅拌混合25～30min，待搅拌混合完成后，将烧杯置于紫外灭菌装置下灭菌处理10～15min，制备得改性混合液；选取新鲜牛骨并研磨过20目筛，得牛骨颗粒并用无水乙醇冲洗3～5次，待冲洗完成后，真空冷冻干燥并置于马弗炉中，在550～600℃下煅烧6～8h后，自然冷却至室温，碾磨并过200目筛，得煅烧牛骨粉末；按质量比1:10，将煅烧牛骨粉末与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，在200～300W下超声分散10～15min，随后在室温下静置6～8h后，过滤得滤饼，制备得活化煅烧颗粒；按质量比1:5，将胶原蛋白与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，在室温下搅拌25～30min后，制备得胶原蛋白混合液，随后按质量比1:25，将胰蛋白酶添加至胶原蛋白混合液中，搅拌混合并滴加质量分数5％碳酸氢钠溶液调节pH至8.0，在35～38℃下水浴加热10～15min后，制备得酶解混合液；按重量份数计，分别称量45～50份酶解混合液、25～30份活化煅烧颗粒和15～20份改性混合液置于烧杯中，搅拌混合并加热至沸腾，保温加热10～15min后，再在75～80℃下旋转蒸发至干，碾磨并过80目筛，即可制备得一种促骨骼细胞发育型螯合钙。实例1首先选取新鲜杜仲叶片和三七叶片，洗净后自然晾干，按质量比1:5，将三七叶片与杜仲叶片混合并研磨，过150目筛得混合球磨颗粒，按质量比1:10，将混合球磨颗粒与去离子水混合，在55℃下水浴加热2h；待水浴加热完成后，在2500r/min下离心分离10min，收集上层清液并置于45℃下旋转蒸发至原体积的1/5，得浓缩液，按体积比1:8，将浓缩液与无水乙醇混合，在室温下搅拌混合1h后，静置陈化6h，过滤得滤液，将滤液置于45℃下旋转蒸发至干，得干燥提取物；选取1g干燥提取物、0.1mL吐温-80、85mLDMEM细胞培养液置于烧杯中，在室温下搅拌混合25min，待搅拌混合完成后，将烧杯置于紫外灭菌装置下灭菌处理10min，制备得改性混合液；选取新鲜牛骨并研磨过20目筛，得牛骨颗粒并用无水乙醇冲洗3次，待冲洗完成后，真空冷冻干燥并置于马弗炉中，在550℃下煅烧6h后，自然冷却至室温，碾磨并过200目筛，得煅烧牛骨粉末；按质量比1:10，将煅烧牛骨粉末与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，在200W下超声分散10min，随后在室温下静置6h后，过滤得滤饼，制备得活化煅烧颗粒；按质量比1:5，将胶原蛋白与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，在室温下搅拌25min后，制备得胶原蛋白混合液，随后按质量比1:25，将胰蛋白酶添加至胶原蛋白混合液中，搅拌混合并滴加质量分数5％碳酸氢钠溶液调节pH至8.0，在35℃下水浴加热10min后，制备得酶解混合液；按重量份数计，分别称量45份酶解混合液、25份活化煅烧颗粒和15份改性混合液置于烧杯中，搅拌混合并加热至沸腾，保温加热10min后，再在75℃下旋转蒸发至干，碾磨并过80目筛，即可制备得一种促骨骼细胞发育型螯合钙。选取30mg本专利技术制备的促骨骼细胞发育型螯合钙、180mg米粉、130mg大豆粉和8mg麦芽糖糊精搅拌混合并压制成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）按质量比1:5，将三七叶片与杜仲叶片混合并研磨过150目，得混合球磨颗粒，按质量比1:10，将混合球磨颗粒与去离子水混合，水浴加热并离心分离，收集上层清液并旋转蒸发得浓缩液，按体积比1:8，将浓缩液与无水乙醇混合，搅拌并静置陈化，过滤得滤液，旋转蒸发至干得干燥提取物，取1～2g干燥提取物、0.1～0.2mL吐温‑80、85～100mLDMEM细胞培养液搅拌混合并灭菌处理，得改性混合液；（2）取新鲜牛骨并研磨过20目筛，得牛骨颗粒并洗涤干燥，煅烧后碾磨并过200目筛，得煅烧牛骨粉末，按质量比1:10，将煅烧牛骨粉末与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，超声分散后静置，过滤得滤饼，得活化煅烧颗粒；（3）按质量比1:5，将胶原蛋白与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，搅拌得胶原蛋白混合液，按质量比1:25，将胰蛋白酶添加至胶原蛋白混合液中，搅拌混合并调节pH至8.0，水浴加热制备得酶解混合液；（4）按重量份数计，分别称量45～50份酶解混合液、25～30份活化煅烧颗粒和15～20份改性混合液置于烧杯中，搅拌混合并加热至沸腾，保温加热后，旋转蒸发至干，碾磨并过80目筛，即可制备得一种促骨骼细胞发育型螯合钙。...

【技术特征摘要】
1.一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）按质量比1:5，将三七叶片与杜仲叶片混合并研磨过150目，得混合球磨颗粒，按质量比1:10，将混合球磨颗粒与去离子水混合，水浴加热并离心分离，收集上层清液并旋转蒸发得浓缩液，按体积比1:8，将浓缩液与无水乙醇混合，搅拌并静置陈化，过滤得滤液，旋转蒸发至干得干燥提取物，取1～2g干燥提取物、0.1～0.2mL吐温-80、85～100mLDMEM细胞培养液搅拌混合并灭菌处理，得改性混合液；（2）取新鲜牛骨并研磨过20目筛，得牛骨颗粒并洗涤干燥，煅烧后碾磨并过200目筛，得煅烧牛骨粉末，按质量比1:10，将煅烧牛骨粉末与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，超声分散后静置，过滤得滤饼，得活化煅烧颗粒；（3）按质量比1:5，将胶原蛋白与质量分数1％磷酸氢二铵溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷国庆，王艳芹，
申请(专利权)人：常州豪坦商贸有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32