一种铁皮石斛叶的提取方法及其提取物和应用技术

本发明专利技术涉及铁皮石斛技术领域，具体涉及一种铁皮石斛叶的提取方法及其提取物和应用，该提取方法通过反复冻融破壁和酶解技术的联合使用，可以让本发明专利技术铁皮石斛叶的提取收率在60%以上，蛋白质、多糖、总黄酮等功效成分的纯度达到90%，得到的铁皮石斛叶提取物还含有丰富的花色素、柚皮素、木酚素、二氢异黄酮等抗氧化成分，可见本发明专利技术的铁皮石斛叶提取物在护肤品领域中有巨大的应用前景。

Method for extracting Dendrobium officinale leaf and its extract and Application

The present invention relates to the technical field of Dendrobium, in particular to an extract of Dendrobium leaf and its extract and application method, the extraction method by repeated freeze thawing combined with lysis and enzyme technology, the invention can make the extraction yield of Dendrobium leaf was more than 60%, the purity of protein, polysaccharide and flavone etc. effect of ingredients to reach 90%, the Dendrobium leaf extract obtained also contain anthocyanins, naringin rich element, guaiacol antioxidant element, two hydrogen isoflavone, visible Dendrobium leaf extract of the invention has great prospects in the field of skin care products.

【技术实现步骤摘要】
一种铁皮石斛叶的提取方法及其提取物和应用
本专利技术涉及铁皮石斛
，具体涉及一种铁皮石斛叶的提取方法及其提取物和应用。
技术介绍
铁皮石斛（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo），为兰科多年生附生草本植物。味甘，微寒，归胄、肾经。历代中药典籍《神农本草经》、《本草纲目拾遗》等都有记载，以新鲜或干燥茎入药，具有滋阴清热、养胃生津、补肾益精之功效。然而现有技术中，只有茎才是作为名贵的药材，至于铁皮石斛其它部分，例如铁皮石斛叶和铁皮石斛花应用都非常少。而实际检测，铁皮石斛叶中含有18%以上的多糖，基本与茎接近，而且铁皮石斛叶中还含有丰富的生物总黄酮，如花色素、柚皮素、木酚素、二氢异黄酮等抗氧化、抗衰老、类雌激素作用的功效成分，其生物总黄酮的含量经检测甚至比铁皮石斛茎条的含量还高1倍以上。另外铁皮石斛叶的粗蛋白质含量在10%以上，具有很好的营养价值，铁皮石斛多糖和生物总黄酮无论是药用还是养生保健、美容美体方面都具有确切的疗效和机理机制。但是未经提取的铁皮石斛叶人体难以吸收，因此铁皮石斛叶难以广泛应用，大部分人对于铁皮石斛叶的功效认知是十分有限的，事实上，目前铁皮石斛茎被采集后，铁皮石斛叶往往是被丢弃或者作为饲料，利用效率极低。为此，亟待一种铁皮石斛叶的提取方法，但是现有的铁皮石斛叶的提取方法基本只是简单醇沉方法，如专利申请号为201610155974.6的专利技术专利，并不能提高铁皮石斛叶的利用效率，提取收率和功效成分纯度均有一定的限制。
技术实现思路
为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本专利技术的目的在于提供一种提取收率和功效成分纯度比较高、可以提高铁皮石斛叶的利用效率的铁皮石斛叶提取方法。本专利技术的另一目的在于提供一种利用该提取方法得到的提取物，该铁皮石斛叶提取物含有丰富的蛋白质、多糖、总黄酮等功效成分，在医药品、护肤品、化妆品等领域中有巨大的应用前景。本专利技术的另一目的在于提供一种利用该提取方法得到的提取物在护肤品的应用，将铁皮石斛叶提取物应用到护肤品中，可以提高护肤品祛痘改善色斑和抗衰老抗氧化的作用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种铁皮石斛叶的提取方法，包括如下步骤：（1）调浆：取铁皮石斛叶浆液，所述铁皮石斛叶浆液由铁皮石斛叶粉和水组成；（2）反复冻融：将所述铁皮石斛叶浆液冷却至-20～0℃，保温12～36h，然后加热至80～100℃，保温1-3h，再冷却至-20～0℃，保温12～36h，然后升温至浆液状；（3）酶解：往所述步骤（2）反复冻融处理后的铁皮石斛叶浆液中加入蛋白酶进行酶解反应；（4）灭活：将所述步骤（3）酶解处理后的铁皮石斛叶浆液加热至80～100℃，保温1～3h；（5）成品：将所述步骤（4）处理后的铁皮石斛叶浆液进行浓缩、干燥，得到铁皮石斛叶提取物，所述铁皮石斛叶提取物为浸膏剂或固体粉剂。本专利技术的核心创新点之一在于反复冻融技术和酶解技术的联合使用。由于皮石斛液的细胞壁相对比较厚，未木化，纤维束外韧性，内含碳酸钙针晶束，多细胞组成外表层。因此普通加热、粉碎等方式难以使细胞内的物质析出，本专利技术通过采用反复冻融技术，在水的热涨冷缩和渗透的作用下，破坏铁皮石斛叶的细胞壁，破壁率可以达到90%-100%，该技术操作简单，成本低廉，特别适合大规模工业化生产。优选地，将所述铁皮石斛叶浆液冷却至-10℃，保温24然后加热至100℃，保温2h，再冷却至-10℃，保温24后，温至浆液状，破壁率可以达到100%。此外，虽然铁皮石斛多糖和生物总黄酮可以溶于水，但是含量丰富的蛋白质却不容易水，也不容易被人体利用吸收，因此本专利技术利用蛋白酶将破壁之后从细胞裸露出来的蛋白质进行切割，从而大分子蛋白被切割成可以溶于水的小分子蛋白、多肽甚至氨基酸，并且小分子蛋白、多肽或氨基酸更易被人体吸收。综上，本专利技术反复冻融破壁和酶解技术的联合使用，可以让本专利技术铁皮石斛叶的提取收率在60%以上，蛋白质、多糖、总黄酮等功效成分的纯度达到90%。其中，所述步骤（1）调浆中的铁皮石斛叶浆液的制备方法为如下两种中的一种：A、将铁皮石斛叶与水混合后进行湿法粉碎；B、将铁皮石斛叶进行干法粉碎至1～20目，然后加入水中。两种方法因地制宜，A方法更适合含有一定水分的鲜铁皮石斛叶，B方法更适合干的铁皮石斛叶。另，所述步骤（1）中铁皮石斛叶粉与水的重量比重对反复冻融的效果有很大的影响，水相对太多，则冷冻耗费的资源就越高，维持浆液的冷冻也就更难，不稳定；水相对太少，则冻融不充分，破壁率低，因此所述步骤（1）中铁皮石斛叶浆液的铁皮石斛叶粉与水的重量份数分别优选为1～40份和50～98份。其中，所述步骤（3）中蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶中的至少一种，所述蛋白酶的用量为0.1～5重量份。木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶均为植物酶，对于铁皮石斛的蛋白质具有较高的酶解效率，更为优选地，所述蛋白酶为木瓜蛋白酶，作为另一优选方式，所述蛋白酶由木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶按重量比1:1的比例组成。更进一步地，为了提高木瓜蛋白酶和/或菠萝蛋白酶的酶解效果，所述步骤（3）酶解的温度为35～55℃，酶解的时间为3～5h。其中，所述步骤（4）的加热的方法为蒸气加热。蒸气加热的好处在于蒸气的温度远远高于铁皮石斛叶浆液的温度，并且可以提供一定的压力，使蛋白酶失活更快，从而减少铁皮石斛叶浆液中热敏性营养的损失。其中，所述步骤（5）中所述浓缩的方法为：将步骤（4）灭活处理后的铁皮石斛叶浆液以15000～20000r/s的转速进行离心，离心后取下层浓缩液。离心浓缩可在常温进行，对铁皮石斛的功效成分损害极低。其中，所述步骤（5）的干燥的方法为喷雾干燥或真空干燥。喷雾干燥和真空干燥可因地制宜，喷雾干燥能耗较低，但容易损失提取物的功效成分，真空干燥成本高、时间长，但是提取物的提取收率更高。本专利技术的另一目的通过下述技术方案实现：一种铁皮石斛叶提取物的应用，将如上所述方法提取到的铁皮石斛提取物应用到护肤品上，可以有效提高护肤品祛痘改善色斑和抗衰老抗氧化的作用。具体地，可应用在一种祛痘抗衰老面膜中，所述祛痘抗衰老面膜包括A相组分和B相组分；所述A相组分包括如下重量份数的原料：保湿剂18.5-27份防腐剂0.20.5份增稠剂0.60.8份透明质酸钠0.2-4份以及适量水所述B相组分包括如下重量份数的原料：铁皮石斛叶提取物5-10份黄芩提取物0.1-5份番红花提取物0.1-1份血竭提取液0.1-1份助溶剂12-17份以及适量水；所述A相组分和B相组分的水合计为10-60重量份。具体保湿剂、防腐剂、增稠剂等原料的选择以及相应的制备方法可以参考申请人日前申请的专利号为201611259762.9的专利技术专利，关于该些用剂的效果也已经在该专利中充分阐述，此处不再累述。本专利技术与日前申请的专利最大的不同之一在于B相组分中采用了利用前述方法提取的铁皮石斛叶提取物。虽然该专利中B相组分采用的铁皮石斛提取液并未限定提取的是铁皮石斛的什么部位，但是由于关于铁皮石斛叶的提取方法、功效成分分析以及在护肤品上的效果相关研究均比较少，在护肤品中所采用的铁皮石斛提取液一般仅仅代指铁皮石斛茎的提取液（铁皮石斛花有季节限制），即使采用现有技术提取得到的铁皮石斛叶提取液，用在该面膜中，由于对于铁皮石斛功效成分保留程度的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种铁皮石斛叶的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）调浆：取铁皮石斛叶浆液，所述铁皮石斛叶浆液由铁皮石斛叶粉和水组成；（2）反复冻融：将所述铁皮石斛叶浆液冷却至‑20～0℃，保温12～36h，然后加热至80～100℃，保温1‑3h，再冷却至‑20～0℃，保温12～36h，然后升温至浆液状；（3）酶解：往所述步骤（2）反复冻融处理后的铁皮石斛叶浆液中加入蛋白酶进行酶解反应；（4）灭活：将所述步骤（3）酶解处理后的铁皮石斛叶浆液加热至80～100℃，保温1～3h；（5）成品：将所述步骤（4）处理后的铁皮石斛叶浆液进行浓缩、干燥，得到铁皮石斛叶提取物，所述铁皮石斛叶提取物为浸膏剂或固体粉剂。

【技术特征摘要】
1.一种铁皮石斛叶的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）调浆：取铁皮石斛叶浆液，所述铁皮石斛叶浆液由铁皮石斛叶粉和水组成；（2）反复冻融：将所述铁皮石斛叶浆液冷却至-20～0℃，保温12～36h，然后加热至80～100℃，保温1-3h，再冷却至-20～0℃，保温12～36h，然后升温至浆液状；（3）酶解：往所述步骤（2）反复冻融处理后的铁皮石斛叶浆液中加入蛋白酶进行酶解反应；（4）灭活：将所述步骤（3）酶解处理后的铁皮石斛叶浆液加热至80～100℃，保温1～3h；（5）成品：将所述步骤（4）处理后的铁皮石斛叶浆液进行浓缩、干燥，得到铁皮石斛叶提取物，所述铁皮石斛叶提取物为浸膏剂或固体粉剂。2.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛叶的提取方法，其特征在于：所述步骤（1）中，的铁皮石斛叶浆液的制备方法为如下两种中的一种：A、将铁皮石斛叶与水混合后进行湿法粉碎，制得铁皮石斛叶浆液；B、将铁皮石斛叶进行干法粉碎至1～20目，然后加入水中混合均匀，制得铁皮石斛叶浆液。3.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛叶的提取方法，其特征在于：所述步骤（1）中，铁皮石斛叶浆液中铁皮石斛叶粉与水的重量份数分别为1～40份和50～98份。4.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：张春艳，何伟彬，范钰屏，
申请(专利权)人：广东国方医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44