一种干酪乳杆菌来源的L‑乳酸脱氢酶及其应用制造技术
L lactate dehydrogenase a Lactobacillus casei source and its application
The invention discloses a L lactate dehydrogenase from Lactobacillus casei and its application, and belongs to the technical field of biological engineering. The present invention provides a new lactate dehydrogenase and realizes heterologous expression of the gene. Through the construction of recombinant plasmid containing the gene of pET 22b (+) Lcldh1, transformed into Escherichia coli, the expression plasmid containing pET 22b (+) recombinant Escherichia coli E.coli/Lcldh1 Lcldh1. 10mmol/L phenyl pyruvate as substrate, recombinant LcLDH1 engineering bacteria whole cell catalysis, 1H reaction, L PLA concentration was 8.59mmol/L, the yield is 85.9%, eep> 99%. After purification, the specific activity of LcLDH1 reached 294.2U/mg, showed higher catalytic activity and enantioselectivity, and had obvious application potential and economic value.
【技术实现步骤摘要】
一种干酪乳杆菌来源的L-乳酸脱氢酶及其应用
本专利技术涉及一种干酪乳杆菌来源的L-乳酸脱氢酶及其应用，属于生物工程
技术介绍
苯乳酸(Phenyllactateacid，PLA)，系统名为2-羟基-3-苯基丙酸，是一种高值有机酸，其具有两种对映异构体：L-PLA和D-PLA。PLA的分子式为C9H10O3，相对分子质量为166.17，其性质稳定，熔点为121～125℃；PLA在水中溶解度较好，并且其在水溶液中有较好的热稳定性。L-PLA和D-PLA都具有广谱抑菌效果，可作为天然抑菌剂，替代化学合成的防腐剂，而且可经聚合反应合成聚苯乳酸新型高分子材料，替代聚乳酸高分子材料。因此，苯乳酸在化工、制药、生物、材料和食品等领域有广阔的应用前景。PLA可由多种微生物代谢产生，是菌体在代谢途径中一个副产物，如大多数的乳酸菌如植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)，乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)等，也有一些真菌如白地霉(Geotrichumcandidum)，荧光维克酵母(Wickerhamiafluorescens)...
【技术保护点】
一种L‑乳酸脱氢酶，其特征在于，其氨基酸序列如(a)或(b)所示：(a)氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有苯丙酮酸还原活性的由(a)衍生的蛋白质。
【技术特征摘要】
1.一种L-乳酸脱氢酶，其特征在于，其氨基酸序列如(a)或(b)所示：(a)氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有苯丙酮酸还原活性的由(a)衍生的蛋白质。2.编码权利要求1所述L-乳酸脱氢酶的基因。3.一种基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌为宿主，表达权利要求1所述的L-乳酸脱氢酶。4.根据权利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，以pET-22b(+)为载体。5.根据权利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，所述宿主为E.coliBL21、E.coliJM109、E.coliDH5α、或E.coliTOP10。6.一种构建权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：邬敏辰，李雪晴，袁风娇，刘艳，李剑芳，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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