The present invention relates to a kit and method capable of distinguishing more HPV subtypes with fewer detected reaction tubes by combining a series of combinations with a gold gold probing method. A specific sequence of combinations was used to identify 15 subtypes of HPV subtypes with 5 detection tubes. In the invention, the mathematical combination algorithm and molecular diagnosis technology, without increasing the detection reaction flux under the condition of implementation with minimal reaction tube diferented more human papillomavirus subtypes, in order to reduce the operation difficulty and the cost of detection detection.
【技术实现步骤摘要】
一种新型的15种人乳头瘤病毒亚型分型试剂盒和方法
本专利技术属于分子生物技术和基因检测领域,具体是一种新型的用于15种人乳头瘤病毒亚型分型的试剂盒和方法。
技术介绍
人乳头瘤病毒(HumanPapillomavirus,HPV)属于乳头瘤病毒科,是一种小分子的、无被膜包被的环状双链DNA病毒,基因组长约8000碱基对(bp),分为3个功能区,即早期转录区(E区)、晚期转录区(L区)和非转录区(长控制区,LCR)。人乳头瘤病毒通过直接或间接接触污染物品或性传播感染人类。该病毒不但具有宿主特异性,而且具有组织特异性,只能感染人的皮肤和粘膜上皮细胞,引起人类皮肤的多种乳头状瘤或疣及生殖道上皮增生性损伤。对于感染生殖道和肛门的人乳头瘤病毒,根据各基因型别致病力大小或致癌危险性大小可分为低危型和高危型两大类。在有性生活史的女性中生殖道人乳头瘤病毒感染具有普遍性,据统计70%~80%的女性在其一生中会有至少一次的人乳头瘤病毒感染,但大多数感染为自限性,超过90%的感染的女性会出现一种有效的免疫应答,在没有任何长期的健康干预时在6到24个月之间可以清除感染。而持续性的高危型人乳 ...
【技术保护点】
一种15种HPV亚型的分型试剂盒,其特征在于,包括以下至少5个检测管,其中,第一管包含有对应的检测引物和针对5种型号的探针;第二管包含有对应检测引物和针对4种型号的检测探针,第二管中所针对的探针的型号只有一种与第一管中的型号相同;第三管包含有对应的检测引物和针对5种型号的探针,第三管中所针对的检测探针的型号只有一种与第一管中的型号相同,且只有一种与第二管中的型号相同;第四管包含有对应的检测引物和针对5种型号的检测探针,第四管中所针对的检测引物和探针的型号只有一种与第一管中的型号相同,且只有一种与第二管中的型号相同,且只有一种与第三管中的型号相同;第五管包含有对应的检测引物和 ...
【技术特征摘要】
1.一种15种HPV亚型的分型试剂盒,其特征在于,包括以下至少5个检测管,其中,第一管包含有对应的检测引物和针对5种型号的探针;第二管包含有对应检测引物和针对4种型号的检测探针,第二管中所针对的探针的型号只有一种与第一管中的型号相同;第三管包含有对应的检测引物和针对5种型号的探针,第三管中所针对的检测探针的型号只有一种与第一管中的型号相同,且只有一种与第二管中的型号相同;第四管包含有对应的检测引物和针对5种型号的检测探针,第四管中所针对的检测引物和探针的型号只有一种与第一管中的型号相同,且只有一种与第二管中的型号相同,且只有一种与第三管中的型号相同;第五管包含有对应的检测引物和针对5种型号的检测探针,第五管中所针对的检测探针的型号只有一种与第一管中的型号相同,只有一种与第三管中的型号相同,且只有一种与第四管中的型号相同。2.根据权利要求1所述的15种HPV亚型的分型试剂盒,其特征在于,,还包括有第六管,所述第六管包含对应的检测引物和针对阳性对照的检测探针。3.根据权利要求1所述的15种HPV亚型的分型试剂盒,其特在在于,所述15种HPV亚型为6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、45、52、53、56、和58。4.根据权利要求3所述的15种HPV亚型的分型试剂盒,其特征在于,,所述第一管包含11、16、31、35、43的检测探针;第二管包含6、16、52、53的检测探针;第三管包含31、33、45、52、58的检测针;第四管包含35、39、42、53、58的检测探针;第五管包含18、39、43、45、56的检测探针;第六管包含阳性对照,为β-actin的检测引物和探针;或者所述第一管包含6、33、35、42、52的检测探针;第二管包含11、35、43、53的检测探针;第三管包含18、33、53、56、58的检测针;第四管包含31、39、43、52、58的检测探针;第五管包含16、31、42、45、56的检测探针;第六管包含阳性对照,为β-actin的检测引物和探针。5.根据权利要求3所述的15种HPV亚型的分型试剂盒,其特征在于,,针对HPV亚型的检测探针为:针对6型的检测探针为SEQIDNO.13;针对11型的检测探针为SEQIDNO.14;针对16型的检测探针为SEQIDNO.15;针对18型的检测探针为SEQIDNO.16;针对31型的检测探针为SEQIDNO.17;针对33型的检测探针为SEQIDNO.18;针对35型的检测探针为SEQIDNO.19;针对39型的检测探针为SEQIDNO.20;针对42型的检测探针为SEQIDNO.21;针对43型的检测探针为SEQIDNO.22;针对45型的检测探针为SEQIDNO.23;针对52型的检测探针为SEQIDNO.24;针对53型的检测探针为SEQIDNO.25;针对56型的检测探针为SEQIDNO.26;针对58型的检测探针为SEQIDNO.27。6.根据权利要求3-5任一项所述的15种HPV亚型的分型试剂盒,其特征在于,所述第一管的检测引物为SEQIDNO.1和SEQIDNO.2;所述第二管的检测引物为SEQIDNO.3和SEQIDNO.4;所述第三管的检测引物为SEQIDNO.5和SEQIDNO.6;所述第四管的检测引物为SEQIDNO.7和SEQIDNO.8;所述第五管的检测引物为SEQIDNO.9和SEQIDNO.1...
【专利技术属性】
技术研发人员:王建平,
申请(专利权)人:广州市宝创生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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