【技术实现步骤摘要】
海藻酸钠接枝天然环糊精固定化细胞及其应用
:本专利技术属于生物催化
,具体涉及海藻酸钠接枝天然环糊精固定化细胞及其应用。
技术介绍
:甾体化合物作为仅次于抗生素的第二大类药物,其在生命体内具有调控各种物质代谢及生理作用的功能。甾体药物的工业化生产主要是改造天然甾体化合物的结构,与传统化学方法合成相比,微生物转化的方法可以形成多种甾体药物活性中间体且产物纯度高。环糊精作为增溶剂能增加疏水性甾体的溶解度,其特殊空腔结构可以包结甾体底物,从而提高甾体化合物的生物利用度和产率。然而环糊精的价格较高制约了其在生物催化领域中的大范围应用,采用合适的方法扩大环糊精在生物转化反应中的应用是亟待解决的重要问题。通过接枝技术将环糊精固载到壳聚糖、海藻酸钠等高分子载体上,可以把β-环糊精从溶于水的粉体材料制备成不溶于水的高分子材料,克服环糊精难回收的缺陷,使其能够循环利用,降低工业使用的成本。接枝后的环糊精仍保留独特的空腔结构及其它优良性质,同时还拥有了高分子载体良好的机械性能、稳定性等特征,这大大拓宽了环糊精的应用空间,提升了它的应用价值。海藻酸钠是一种天然聚阴离子多糖高分子化 ...
【技术保护点】
一种甾体生物催化反应中天然环糊精介质及催化细胞循环利用的方法,其特征在于,具体如下:在甾体生物催化反应中,以天然环糊精‑海藻酸钠固定化细胞胶珠作催化剂,反应结束后,进行过滤,滤液用于收集反应产物,过滤物即环糊精‑海藻酸钠固定化细胞胶珠,重新投入甾体生物催化反应,进行循环利用;所述天然环糊精‑海藻酸钠固定化细胞胶珠的制备方法如下:(1)海藻酸钠接枝环糊精按海藻酸钠和天然环糊精按摩尔比1:0.2‑1:1.5称取海藻酸钠和环糊精,加入三角瓶中,并加入海藻酸钠45‑55倍的蒸馏水,30‑70℃水浴中搅拌使之完全溶解;按环氧氯丙烷与蒸馏水体积比0.05‑1:50加入环氧氯丙烷,同时按 ...
【技术特征摘要】
1.一种甾体生物催化反应中天然环糊精介质及催化细胞循环利用的方法,其特征在于,具体如下:在甾体生物催化反应中,以天然环糊精-海藻酸钠固定化细胞胶珠作催化剂,反应结束后,进行过滤,滤液用于收集反应产物,过滤物即环糊精-海藻酸钠固定化细胞胶珠,重新投入甾体生物催化反应,进行循环利用;所述天然环糊精-海藻酸钠固定化细胞胶珠的制备方法如下:(1)海藻酸钠接枝环糊精按海藻酸钠和天然环糊精按摩尔比1:0.2-1:1.5称取海藻酸钠和环糊精,加入三角瓶中,并加入海藻酸钠45-55倍的蒸馏水,30-70℃水浴中搅拌使之完全溶解;按环氧氯丙烷与蒸馏水体积比0.05-1:50加入环氧氯丙烷,同时按环氧氯丙烷与NaOH溶液体积比0.05-1:10滴加0.5mol/L的NaOH溶液,之后反应1.5-6.5h;(2)固定化细胞胶珠的制备待步骤(1)的反应液冷却后,加入终浓度为1-30g/L的菌体静息细胞,搅拌均匀,在磁力搅拌下用注射器滴加到0.1-0.5mol/L的CaCl2溶液中,将胶珠在CaCl2溶液中继续浸泡1-6h,过滤,用反应溶液洗涤1-8次,即得环糊精-海藻酸钠固定化细胞胶珠;所述反应溶液为Tris-HCl缓冲溶液、生理盐水或纯水,pH7.0-pH7.6。2.如权利要求1所述的一种甾体生物催化反应中天然环糊精介质及催化细胞循环利用的方法,其特征在于,天然环糊精-海藻酸钠固定化细胞胶珠循环利用的次数为8次以上。3.如权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员:王敏,申雁冰,于子棋,谢晓林,骆健美,
申请(专利权)人:天津科技大学,
类型:发明
国别省市:天津,12
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