一种降低植物直链淀粉含量的方法及应用技术

本发明专利技术涉及生物技术和植物转基因技术领域，具体涉及一种降低植物直链淀粉含量的方法及应用，步骤一：利用多元sgRNA的CRISPR/Cas9系统编辑薯类植物GBSSI基因序列；步骤二：步骤一中所述的CRISPR/Cas9多元系统包括：系统中含有两个及两个以上的sgRNA序列的CRISPR/Cas9系统；步骤三：步骤二中的CRISPR/Cas9多元系统的sgRNA核苷酸序列选自下组；(a)如SEQ ID NO:1核苷酸序列中的核酸序列；(b)将SEQ ID NO:1核苷酸序序列经过一个或多个核苷酸的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a)核苷酸功能的由(a)衍生的核酸序列；它可以显著调节薯类植物的储藏根的发育性状，可以显著调节薯类植物的直链淀粉含量，在植物淀粉品质的遗传改良上具有良好的应用前景。

Method and application for reducing amylose content in plants

The present invention relates to the field of biotechnology and transgenic technology, particularly relates to a method and application, reduce plant amylose content in potato plant editing step one: GBSSI gene sequence CRISPR/Cas9 system using multi sgRNA; step two: including CRISPR /Cas9 multiple steps of the system in a CRISPR/Cas9 system containing two sgRNA sequences and more than two in the system; step three: the nucleotide sequence of sgRNA from CRISPR/Cas9 system under the multi step 2 group; (a) such as SEQ ID NO:1 nucleic acid sequence nucleotide sequence; (b) SEQ ID NO:1 nucleotide sequence through one or more nucleotide substitution, deletion or addition form, and (a) function by nucleotide (a) nucleic acid sequence is derived; it can significantly regulate the potato plant storage root growth traits, can significantly regulate The amylose content of potato plants has a good prospect in the genetic improvement of plant starch quality.

【技术实现步骤摘要】
一种降低植物直链淀粉含量的方法及应用
本专利技术涉及生物技术和植物转基因
，具体涉及一种降低植物直链淀粉含量的方法及应用。
技术介绍
薯类植物主要指具有可供食用块根或地下茎的一类陆生作物。有块根、块茎类，如番薯(红薯、甘薯)、木薯、马铃薯、薯蓣(山药)、脚板薯等，多行无性繁殖，只留薯块作种，并可以用藤本进行繁殖。这类植物一般耐寒力较弱，多在无霜季节栽培，低温会抑制薯类作物的生长，造成块根或块茎的减产，因此种植薯类作物尽量避免长时间的低温期；此外，疏松、肥沃、深厚的土壤和多量钾肥有利于提高薯类作物产量及品质。淀粉作为重要的粮食和工业原材料在国民生产中具有重要的意义。淀粉的组成包含直链淀粉和支链淀粉两大部分。直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键连接的多糖链，分子中有200个左右葡萄糖基，分子量1～2×105，聚合度990，空间构象卷曲成螺旋形，每一回转为6个葡萄糖基。支链淀粉分子中除有α-(1，4)糖苷键的糖链外，还有α-(1，6)糖苷键连接的分支，分子中含300～400个葡萄糖基，分子量>2×107，聚合度7200，各分支也都是卷曲成螺旋形。不同直链淀粉含量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种降低植物直链淀粉含量的方法及应用，其特征在于：它采用如下的方法步骤:步骤一：利用多元sgRNA的CRISPR/Cas9系统编辑薯类植物GBSSI基因序列；步骤二：步骤一中所述的CRISPR/Cas9多元系统包括：系统中含有两个及两个以上的sgRNA序列的CRISPR/Cas9系统；步骤三：步骤二中的CRISPR/Cas9多元系统的sgRNA核苷酸序列选自下组：(a)如SEQ ID NO:1核苷酸序列中的核酸序列；(b)将SEQ ID NO:1核苷酸序序列经过一个或多个核苷酸的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a)核苷酸功能的由(a)衍生的核酸序列；(c)与(a)限定的核酸序列有70％以上同...

【技术特征摘要】
1.一种降低植物直链淀粉含量的方法及应用，其特征在于：它采用如下的方法步骤:步骤一：利用多元sgRNA的CRISPR/Cas9系统编辑薯类植物GBSSI基因序列；步骤二：步骤一中所述的CRISPR/Cas9多元系统包括：系统中含有两个及两个以上的sgRNA序列的CRISPR/Cas9系统；步骤三：步骤二中的CRISPR/Cas9多元系统的sgRNA核苷酸序列选自下组：(a)如SEQIDNO:1核苷酸序列中的核酸序列；(b)将SEQIDNO:1核苷酸序序列经过一个或多个核苷酸的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a)核苷酸功能的由(a)衍生的核酸序列；(c)与(a)限定的核酸序列有70％以上同源性且具有(a)核酸功能的由(a)衍生的多核酸序列；步骤四：上述步骤一中的，对GBSSI基因的编辑包括如下方面：(a)对GBSSI基因所在基因组区域的编辑或对包含GBSSI基因所在基因组区域的编辑；(b)对(a)中编辑包括：单个或多个核酸位点的取代、缺失或添加；步骤五：终止植物中GBSSI多肽的表达或终止有生物功能的GBSSI多肽的形成，从而能提高薯类植物淀粉中直链淀粉含量，降低薯类植物淀粉中支链淀粉以及调节薯类植物储藏根重量、直径或数目；步骤六：上述步骤五中的终止植物中GBSSI多肽的表达或终止有生物功能的GBSSI多肽的形成包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：张鹏，吴银亮，周文智，
申请(专利权)人：江苏三黍生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32