一种高效纯和基因编辑的方法技术

本发明专利技术公开了一种高效纯和基因编辑的方法。运用CRISPR‑Cas9系统高效敲除木薯目的基因，实现目的基因敲除一致，采用遗传标记法鉴别单倍体种子，利用秋水仙素和二甲基亚砜进行加倍处理，实现高效木薯单倍体育种，靶基因一致率95％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于育种，涉及一种高效纯和基因编辑的方法。

技术介绍

1、木薯(学名：manihot esculenta crantz)，是大戟科木薯属植物，耐旱抗贫瘠，广泛种植于非洲、美洲和亚洲等100余个国家或地区，是三大薯类作物之一，热区第三大粮食作物，全球第六大粮食作物，被称为“淀粉之王”，是世界近六亿人的口粮。木薯一般需要在无霜期8个月左右、年平均温度18℃及以上的地区种植，气温低于10℃木薯停止生长，气温低于5℃木薯茎段开始坏死。

2、木薯雌雄异花，雌雄同序，雄花着生在顶部，雌花在花梗下部。雌蕊近椭圆灯笼状，长而尖；雄蕊近圆形灯笼状，无花冠。在中国木薯通常于2-4月种植，9-11月开花，授粉后一般需要60-90天左右正常成熟，基于crispr-cas9基因编辑体系培育材料靶基因通常为杂带，很难获得纯和株系。

3、单倍体的产生有自然发生和人工诱导两种，但自然发生单倍体的频率极低，一般为十万分之一。目前，通常采用人工诱导的方法获得单倍体，主要方法有花药培养、物理或化学药剂诱导和孤雌生殖诱导等，如cn114957422a公开针对水稻本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，步骤(1)所述母本木薯中靶基因包括GBSS和/或SBEII。

3.根据权利要求1或2所述的高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，步骤(1)所述父本木薯中诱导靶基因包括BBM1和母本选择靶基因GBSS或SBE II。

4.根据权利要求1-3任一项所述的高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，步骤(2)所述诱导杂交包括：

5.根据权利要求1-4任一项所述的高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，步骤(2)所述筛选单倍体杂交种子包...

【技术特征摘要】

1.一种高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，步骤(1)所述母本木薯中靶基因包括gbss和/或sbeii。

3.根据权利要求1或2所述的高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，步骤(1)所述父本木薯中诱导靶基因包括bbm1和母本选择靶基因gbss或sbe ii。

4.根据权利要求1-3任一项所述的高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，步骤(2)所述诱导杂交包括：

5.根据权利要求1-4任一项所述的高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，步骤(2)所述筛选单倍体杂交种子包括：

6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：施富超，周文智，唐雨薇，张国敬，
申请(专利权)人：江苏三黍生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：