一种去除TAQ DNA聚合酶中核酸污染的方法技术

本发明专利技术公开了一种去除TAQ DNA聚合酶中核酸污染的方法，本发明专利技术的方法通过Binuclease水解TAQ DNA聚合酶中污染的核酸，并用不同的方法完全除去Binuclease，在达到完全消除TAQ DNA聚合酶样本污染的核酸的同时，解决了微量残存Binuclease降低PCR敏感性或造成假阴性结果的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种去除TAQDNA聚合酶中核酸污染的方法
本专利技术涉及生物化学
，尤其涉及一种去除TAQDNA聚合酶中核酸污染的方法。
技术介绍
基于PCR的非常的敏感性，微量的核酸污染可能会导致不希望的假阳性结果。一些基于原核生物持家基因，如16S，的检测方法，微量的核酸污染会造成非常大的问题，造成大量的假阳性结果，无法正确地检测病原体。这种核酸污染可能来自PCR所用的水，dNTPs，引物，PCR缓冲液，PCR反应管和TAQDNA聚合酶，前5种核酸污染可以用工程控制(engineeringcontrols)避免或消除，TAQDNA聚合酶中的核酸污染是主要的问题。通常需要除去或基本上消除来自TAQDNA聚合酶中的DNA或RNA。这些诊断所用试剂蛋白酶绝大部分是用原核细胞表达纯化的，有些产品没有采取消除核酸污染方法，或没有有效的完全消除污染的DNA的方法。目前市场上常用的多种公司DNA聚合酶，都或多或少含有细菌DNA污染。从RNA样品除去DNA的常用方法是用I型脱氧核糖核酸酶(DNase)处理RNA样品，然后通过加热失活或结合树脂的步骤除去DNaseI，但该方法不能很好地消除TAQDNA聚合本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种去除TAQ DNA聚合酶中核酸污染的方法，其特征在于，包括如下步骤：TAQ DNA聚合酶与广谱核酸酶Binuclease直接孵育处理，用镍树脂结合TAQ DNA聚合酶，洗涤镍树脂，去除广谱核酸酶Binuclease及其水解产物。

【技术特征摘要】
1.一种去除TAQDNA聚合酶中核酸污染的方法，其特征在于，包括如下步骤：TAQDNA聚合酶与广谱核酸酶Binuclease直接孵育处理，用镍树脂结合TAQDNA聚合酶，洗涤镍树脂，去除广谱核酸酶Binuclease及其水解产物。2.一种去除TAQDNA聚合酶中核酸污染的方法，其特征在于，包括如下步骤：TAQDNA聚合酶先结合到镍树脂，再用适量的广谱核酸酶Binuclease注入镍树脂，孵育处理，洗涤镍树脂，去除广谱核酸酶Binuclease及其水解产物。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述镍树脂使用其他的二价金属琼脂糖树脂或磁珠替代。4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，还包括固定初步生产的TAQDNA聚合酶量，用不同梯度单位的广谱核酸酶Binuclease直接孵育处理...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋建林，
申请(专利权)人：苏州斯奈普生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32