本发明专利技术公开了菊苣酸的新用途——在制备抗呼吸道合胞病毒的药物中的应用。本发明专利技术的发明专利技术人应用中药化学方法对植物紫锥菊中的抗病毒成分进行筛选，并通过体外抗病毒药效实验发现了最佳抗病毒活性成分——菊苣酸，并发现菊苣酸对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抗病毒活性最强，优于对照药利巴韦林，因此，可以以菊苣酸为活性成分用于制备抗呼吸道合胞病毒的药物，具体应用时，可适量添加药剂学上可接受的基质或辅料，也可以与适当的药物联合应用。
Use of chicory acid in the preparation of anti respiratory syncytial virus drugs
The present invention discloses the new use of chicory acid in the preparation of medicine for resisting respiratory syncytial virus. The inventor of the application of traditional Chinese medicine chemical method of the invention of antiviral components of plants in Echinacea and in vitro antiviral effect through screening, we found the best antiviral active ingredient, cichoric acid, and found that cichoric acid on respiratory syncytial virus (RSV) in vitro antiviral activity than the control Po Leigh Ba Velin, therefore, can be in chicory acid as an active ingredient for the preparation of medicaments against respiratory syncytial virus, the specific application, may be appropriate to add a pharmaceutically acceptable matrix or excipients, can also be used in combination with appropriate drugs.
【技术实现步骤摘要】
菊苣酸在制备抗呼吸道合胞病毒的药物中的应用
本专利技术涉及菊苣酸在制备抗呼吸道合胞病毒的药物中的应用。
技术介绍
紫锥菊又名紫锥花、紫松果菊，为多年生草本植物，菊科松果菊属。上个世纪70年代，紫锥菊引入我国，作为观赏性植物栽培；90年代，肖培根院士首先将紫锥菊作为免疫调节剂介绍到国内，国内各地开始将其作为药用植物引种，并逐渐投入GAP标准化生产，从而保证研究与开发的原料安全问题。近年来国内已有数种紫锥菊制剂得到开发并应用于临床，如“金屏风胶囊”(浙江正大青春宝药业有限公司)、“紫黄精”(成都地奥制药集团有限公司)等，均为紫锥菊与补气中药黄芪的复方制剂。紫锥菊的应用非常广泛，主要用途有提高机体免疫水平、抗炎、清除氧自由基以抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等。国外对紫锥菊抗病毒作用的研究中，Wacker采用小鼠L-929细胞培养的方法证实紫锥菊提取物能间接的抑制流感病毒、疱疹病毒与水泡性口炎病毒的活性；May发现松果菊的水提取物可明显抑制流感病毒、疱疹病毒与脊髓灰质炎病毒活性。目前，国内对紫锥菊抗病毒作用的研究还处在起步阶段，文献报道多集中在畜牧业。冯善祥考察了紫锥菊复合物对感染鸡新城疫病毒雏鸡、人工感染传染性法氏囊病毒雏鸡的保护作用，并指出紫锥菊复合物可用于鸡新城疫、鸡传染性法氏囊的预防以及治疗。在细胞水平上，紫锥菊复方制剂对NDV有明显的抑制作用，效果优于紫锥菊。在紫锥菊的抗病毒研究中，已证实其提取物对流感病毒、柯萨奇B族病毒、疱疹病毒、HSV-Ⅱ引起的细胞病变具有不同程度的抑制作用，对Ard3、Ard7、副流感病毒、ECHO11及HSV-Ⅰ等的体外实验则无明显效果。目前我国对引种紫锥菊药理活性的研究还局限在刺激免疫水平方面，人用抗病毒制剂尚未全面开发。在实现将紫锥菊用于人类病毒性疾病的治疗过程中，仍然有药材标准缺失、抗病毒活性成分不详、抗病毒作用机理及靶点不清等问题横亘眼前。因此对紫锥菊进行全面质量评价研究及药理活性研究是其在我国得到全面开发应用的前提。紫锥菊作为一种良好的免疫促进草药，其化学成分及成分活性已有较多报道。目前在紫锥菊属植物及其制剂的化学成分及结构研究中，已分离出咖啡酸类衍生物、烷基酰胺类、多糖类、挥发油类、生物碱、黄酮、多炔类及其它类化学成分等。菊苣酸是紫锥菊中极为重要的免疫活性成分之一，近年来的药理研究表明，菊苣酸具有增强免疫功能和抗炎作用，并能抑制透明质酸酶，保护胶原蛋白免受可导致降解的自由基的影响。现有技术中尚未见到关于菊苣酸在抗呼吸道合胞病毒方面的相关报道。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术经研究，发现了菊苣酸的新用途——在制备抗呼吸道合胞病毒的药物中的应用。本专利技术是通过以下技术方案实现的：本专利技术的专利技术人应用中药化学方法对植物紫锥菊中的抗病毒成分进行筛选，并通过体外抗病毒药效实验发现了最佳抗病毒活性成分——菊苣酸，并发现菊苣酸对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抗病毒活性最强，优于对照药利巴韦林，因此，可以以菊苣酸为活性成分用于制备抗呼吸道合胞病毒的药物，具体应用时，可适量添加药剂学上可接受的基质或辅料，也可以与适当的药物联合应用。紫锥菊中药物活性成分复杂，有咖啡酸类衍生物、烷基酰胺类、多糖类、挥发油类、生物碱、黄酮、多炔类及其它类化学成分等，本专利技术不但发现了紫锥菊提取物对呼吸道合胞病毒有抑制作用，还明确了菊苣酸为体外抗呼吸道合胞病毒的有效成分，对紫锥菊的抗病毒研究、紫锥菊成方制剂的进一步研究等具有重要意义。附图说明图1：：正常细胞及病毒病变细胞，其中，A：正常VERO细胞(4×40)；B：HSV-Ⅰ病毒病变(4×10)；C：正常VERO细胞(4×10)；D：RSV病毒病变(4×10)；E：正常RD细胞(4×10)；F：EV71病毒病变(4×10)。图2：紫锥菊体外抗病毒谱的筛选结果柱状图。图3：紫锥菊提取方法优化结果柱状图。图4：紫锥菊水提物D101型大孔树脂洗脱物抗病毒结果柱状图。图5：D101大孔树脂柱分离样品PAD监测图。图6：D101大孔树脂柱分离有效部位液相色谱图。图7：快速制备化合物高效液相检测色谱图。图8：菊苣酸对照品裂解碎片信息。图9：制备纯品化合物裂解碎片信息。图10：紫锥菊制备纯品抗病毒实验结果柱状图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等，可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法，检测方法等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法，检测方法等。实验一紫锥菊体外抗病毒谱的筛选1.实验仪器与材料1.1药品紫锥菊干燥地上部分药材购自安徽省桐城市维庆药用植物有限公司，粉碎机粉碎，备用；利巴韦林注射液(齐鲁制药有限公司，规格为50mg/mL，批号：1501166141)。1.2细胞非洲绿猴肾细胞(VERO，为HSV-Ⅰ、RSV的敏感细胞株，由山东省医学科学院微生物实验室保存)；横纹肌瘤细胞(RD，为EV71的敏感细胞株，由山东省医学科学院微生物实验室保存)。1.3病毒毒种HSV-Ⅰ：F株，1996年引自山东医科大学微生物学教研室，由山东省医学科学院微生物实验室保存；RSV：long株，2000年10月引自中国预防医学科学院病毒所毒种室，本科室保存；EV71，分离自济南市儿童医院ICU病房病死患儿(Genbank登记号：HQ825317)。1.4试剂正丁醇、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、二甲基亚砜(天津富宇精细化工有限公司产品，均为分析纯)；细胞培养液(1640细胞培养液，GIBCO产品，含11％新生牛血清及100U/mL青霉素和链霉素，置4℃备用)；细胞维持液(1640细胞培养液，GIBCO产品，含2％新生牛血清及100U/mL青霉素和链霉素)；PBS(pH7.2，含NaCl8g、KCl0.2g、KH2PO40.2g、Na2HPO42.9g，加双蒸水至1000mL，过滤除菌，分装置4℃备用)；细胞消化液(0.25％胰酶，Macgene公司产品，分装至青霉素瓶，置-20℃冰箱备用)。1.5仪器CO2恒温培养箱(日本三洋公司产品)；生物安全柜(济南鑫贝西公司产品)；超净工作台(济南隆宏净化设备有限公司)；高压灭菌锅(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)；双人双面净化工作台(苏州净化仪器厂)；倒置显微镜(Olympus公司产品)；台式自动平衡离心机(长沙湘智离心机有限公司)；离心机(贺立氏台式低温离心机)；超低温冰箱(－80℃，725型，ThermoForma公司)；低温冰箱(－40℃，日本三洋公司；–20℃，中科美菱公司产品；4℃，海尔兄弟公司产品)；液氮罐(四川液氮罐厂产品)；96孔细胞培养板(美国GIBCO公司产品)；除菌针头滤器(美国颇尔公司PallCorporation，孔径：0.22μm，直径13mm)；移液器(德国Eppendorf产品，型号：20-200μl；100-1000μl)；移液器吸头(德国Eppendorf产品，与移液器配套)；超声振荡清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)；高速万能粉碎机(北京市永光明医疗仪器有限公司，FW-100)；水浴锅(上海树立仪器仪表有限公司)电热鼓风干燥箱(天津市莱玻特瑞仪器设备有限公司，GFL-23本文档来自技高网...
【技术保护点】
菊苣酸在制备抗呼吸道合胞病毒的药物中的应用。
【技术特征摘要】
2016.11.24 C...
【专利技术属性】
技术研发人员：李峰，李健，李娜，
申请(专利权)人：山东中医药大学，
类型：发明
国别省市：山东,37
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