稳定的反应混合物制造技术
A stable reaction mixture
The present invention provides a stable, dry reaction mixture, a process for their preparation, a method for their use, and a kit containing them. The stable, dry reaction mixture is useful in many recombinant DNA technologies, especially in nucleic acid amplification by polymerase chain reaction (PCR).
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】稳定的反应混合物
本专利技术提供了稳定的反应混合物、它们的制备方法、它们的使用方法和包含它们的试剂盒。所述稳定的反应混合物在许多重组DNA技术、特别是通过聚合酶链式反应(PCR)进行的核酸扩增中是有用的。
技术介绍
为了解决生产稳定的多肽组合物的挑战，通常以固体形式制备蛋白质来提供可接受的贮存期限。一种用于制备固体形式蛋白质组合物的标准方法是冷冻干燥(冻干)，但是该方法会产生应激，所述应激可以使蛋白质在不同程度上变性(Wang,W.(2000)InternationalJournalofPharmaceutics203;1-60)。很少有生物反应化合物会以溶解形式稳定任何时间长度，且这对于室温贮存而言是特别真实的。结果，已经执行众多研究来评价增强处于干燥形式的生物反应化合物的贮存能力的可能性。普遍接受的是，为了确保例如聚合酶在再溶解以后的生物活性，必须使用至少一种稳定性添加剂。WO2008/36544描述了为了提供干燥的组合物的所谓的填充材料的应用，所述填充材料是例如碳水化合物诸如聚蔗糖、蔗糖、葡萄糖、海藻糖、松三糖、葡聚糖或甘露醇，蛋白质诸如BSA、明胶或胶原，...
【技术保护点】
一种干燥的反应混合物组合物，其包含至少一种核酸扩增相关酶、核苷酸三磷酸和糖，其中所述组合物是非冷冻干燥的。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.19 US 62/0942841.一种干燥的反应混合物组合物，其包含至少一种核酸扩增相关酶、核苷酸三磷酸和糖，其中所述组合物是非冷冻干燥的。2.根据权利要求1的组合物，所述组合物与(i)冷冻干燥的和/或(ii)缺少糖的反应混合物相比具有改善的稳定性。3.根据权利要求1或2中的任一项的组合物，其中所述糖选自蔗糖、海藻糖、右旋糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、环糊精、麦芽糊精和葡聚糖。4.根据权利要求1-3中的任一项的组合物，所述组合物还包含醋酸锰(Mn(OAc)2)。5.根据权利要求1-4中的任一项的组合物，其中所述组合物在或等同于在45℃保持3个月的条件下贮存后保留活性。6.根据权利要求1-5中的任一项的组合物，所述组合物还包含至少一种选自适体、去污剂、缓冲剂、盐和寡核苷酸的组分。7.根据权利要求1-6中的任一项的组合物，其中所述至少一种核酸扩增相关酶是选自以下的热稳定的聚合酶：水生栖热菌（Thermusaquaticus）TaqDNA聚合酶、栖热菌属（Thermussp.）Z05聚合酶、黄栖热菌（Thermusflavus）聚合酶、海栖热袍菌（Thermotogamaritima）聚合酶、那不勒斯栖热袍菌（Thermotoganeapolitana）聚合酶、TMA-25聚合酶、TMA-30聚合酶、TthDNA聚合酶、以及经修饰的热稳定的聚合酶或它们的任意组合。8.根据权利要求1-7中的任一项的组合物，其中所述糖以一定量存在，所述量使得如果在水溶液中重构所...
【专利技术属性】
技术研发人员：T马蒂内斯，E史密斯，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH
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