The invention discloses a stable HRP enzyme catalyzed chemiluminescence substrate liquid, including specific proportion of Lumino or Lumino or Lumino derivatives sodium salt, reinforcing agent for iodine phenol, synergistic agent for phenolphthalein, and buffer compounded by specific luminescence agent solution and urea peroxide cases, two sodium EDTA, Twain 20, and buffer prepared oxidant solution before use will luminescence agent mixed solution and oxidant solution after use. The HRP enzymatic chemiluminescence substrate solution, simple configuration, the use of iodine phenol as reinforcing agent, phenolphthalein as synergistic agent, Twain 20 as stabilizer, to further improve the stability of luminous liquid, to obtain a stable, high SNR, high sensitivity, long period, the platform of purple HRP enzyme catalyzed chemiluminescence substrate liquid.
【技术实现步骤摘要】
一种稳定的HRP酶促化学发光底物液
本专利技术涉及免疫分析领域,具体而言,涉及一种以HRP为酶促反应的检测体系的化学发光底物液。
技术介绍
化学分析免疫法(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)是将发光分析和免疫反应相结合,而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术,它既具有免疫反应的特异性,又具有化学发光反应的高灵敏性。它克服了放射性免疫(RIA)因使用放射性同位素而引起的放射性危害及污染问题;克服了荧光免疫分析(FIA)中所需仪器复杂,背景干扰大的缺点。以其高的灵敏度、低的仪器价格、使用简便、安全、无放射性污染等独特的优势,倍受人们的青睐,成为标记免疫的一个重要方向。其中以吖啶酯(AE),碱性磷酸酶(ALP)和辣根过氧化物酶(HRP)为标记物的化学发光免疫分析为主要发展趋势。鲁米诺(Luminol)、异鲁米诺(Isoluminol)及其衍生物是最早在化学发光法中使用的化学发光物质。鲁米诺化学名3-氨基邻苯二甲酰胼,最早由Albrecht报道其发光特性。这类物质通过氧化产生α-羟基过氧化物的中间体,该中间体的分解可释放出光能,所发光的性质与反应系统的pH值有关。鲁米诺类化合物的氧化步骤与溶剂组分有关,在质子溶剂中,需要酶来催化各种氧的衍生物氧化鲁米诺;在非质子溶剂中,化学发光只需要氧气和一种强碱;而强的碱性对酶的活性会产生一定的抑制作用,因此利用鲁米诺-过氧化氢-辣根过氧化物酶直接测定生物大分子灵敏度低。现在市场上普遍用的发光底物稳定性差、本底偏高;发光剂溶液和氧化剂溶液混合后极其不稳定;发光液无色,不利于 ...
【技术保护点】
一种稳定的HRP酶促化学发光底物液,包括发光剂溶液和氧化剂溶液,其中,所述发光剂溶液为含有终浓度为0.5~10mmol/L的鲁米诺或鲁米诺衍生物或鲁米诺钠盐,0.5~10mmol/L的对碘苯酚,0.01~5mmol/L的酚酞,以及pH为8.5~10.5的缓冲液;所述氧化剂溶液为含有终浓度为0.5~10mmol/L的过氧化脲,质量浓度为0.01~0.1%的乙二胺四乙酸二钠,体积比为0.05~0.5%的吐温‑20,其pH为4.5~6.5的柠檬酸缓冲液。
【技术特征摘要】
1.一种稳定的HRP酶促化学发光底物液,包括发光剂溶液和氧化剂溶液,其中,所述发光剂溶液为含有终浓度为0.5~10mmol/L的鲁米诺或鲁米诺衍生物或鲁米诺钠盐,0.5~10mmol/L的对碘苯酚,0.01~5mmol/L的酚酞,以及pH为8.5~10.5的缓冲液;所述氧化剂溶液为含有终浓度为0.5~10mmol/L的过氧化脲,质量浓度为0.01~0.1%的乙二胺四乙酸二钠,体积比为0.05~0.5%的吐温-20,其pH为4.5~6.5的柠檬酸缓冲液。2.如权利要求1所述的HRP酶促化学发光底物液,其特征在于,所述发光剂溶液的缓冲液为0.1mol/L~0.3mol/L硼酸-硼砂缓冲液,所述氧化剂溶液中的柠檬酸缓冲液终浓度为0.1mol/L~0.3mol/L。3.如权利要求2所述的HRP酶促化学发光底物液,其特征在于,所述发光剂溶液为含有终浓度为1mmol/L的鲁米诺,1~2mmol/L的对碘苯酚,0.1~0.2mmol/L的...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄俊,路春桃,赵平锋,
申请(专利权)人:武汉海吉力生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:湖北,42
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