本发明专利技术公开了一种枝孢霉SCSIO 43503及其应用。枝孢霉(Gladaxporism sp.)SCSIO 43503于2016年11月03日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国，武汉，武汉大学，其保藏编号为CCTCC NO：M 2016613。该菌具有产纤维素酶活性，可用于生产纤维素酶，因此对纤维酶的生产和利用具有重要的价值。进一步可以用于制作生物有机质降解菌肥。
Cladosporium SCSIO 43503 and uses thereof
The invention discloses a Cladosporium SCSIO 43503 and its application. Cladosporium (Gladaxporism sp. SCSIO) 43503 on 03 November 2016 is preserved in Chinese type culture collection (CCTCC), address: China, Wuhan, Wuhan University, the preservation number is CCTCC NO:M 2016613. The fungus has cellulase activity and can be used in the production of cellulase, so it is of great value for the production and utilization of cellulase. Can be used for making the biological degradation of organic matter fertilizer.
【技术实现步骤摘要】
一种枝孢霉SCSIO43503及其应用
：本专利技术属于生物
，具体涉及一种枝孢霉SCSIO43503及其应用。
技术介绍
：红树林是热带和亚热带海湾河口泥滩盐渍化沼泽上的盐生森林植物群落，由于红树林生长在海岸潮汐到达且干湿交迭的潮间带，故有人也称它为海岸盐生沼泽植被(王文卿等，2007；王友绍，2013)。红树林处于咸淡水交接地带，红树林湿地滞留了大量的陆源污染物，从而对河口和海洋的水体起了重要的净化作用。特殊的生境造就了红树植物抗污和降污的功能，因此国外早有研究认为，红树林湿地系统与其他类型的湿地一样具有净化污水的潜力(NedwellD.B.，1974；DwivediS.Netal.，1983)。红树林位于干湿交替的潮间带，其多盐的环境使得生态系统中的氧化还原电位在-200到+150mV之间(ClarkMW，1998)。这导致该地区微生物资源极其丰富，它们在物质循环、能量流动、生态平衡及环境净化等方面担当着重要的角色，微生物的多样性及其活性是红树林生态系统修复与重建的基础(FernandoDiniAndreoteetal.，2012)。红树林生态系统中，植物凋落物、有机碎屑含量非常丰富，且蕴涵着大量的可以降解纤维素、木质素和几丁质等大分子有机物的微生物(潘虎等，2012)。目前，人们对红树林生态系统中微生物类群的认知还十分有限。可培养分离研究结果表明：红树林生态系统中微生物的主要类群为细菌和真菌，放线菌和微微型浮游生物数量较少(蒋云霞等，2006；GinaHetal.，2001)。其中已分离鉴定出的红树林真菌超过百种，成为海洋真菌第二大类群。在热带红树林中，微生物的组成大致为：细菌和真菌占微生物资源总量的91％,藻类和原生动物分别占7％和2％(AlongiDM,1988；ZhuangTetal.，1998)。纤维素是地球上含量最丰富的可再生资源(数千亿吨/年)，也是光合作用的初级产物。纤维素是葡萄糖单体以β-1,4-糖苷键相连形成的线性多糖。纤维素酶水解纤维素成葡萄糖，广泛运用于食品、饲料、纺织工业等，具有巨大的运用潜力(B.C.Behera1etal,2014；B.C.Beheraetal,2016)。真菌纤维素酶一般分泌到细胞外，在某些厌氧真菌中是附着在细胞膜上以纤维素体的形式存在，其中木霉属是研究最广泛的纤维素酶产生菌，世界纤维素酶市场中20％的纤维素酶来自木霉属和曲霉属(Hanifetal.2004；Kangetal.,2004；Aroetal.,2005；AhamedandVermette,2008)。
技术实现思路
：本专利技术的第一个目的是提供一种从中国海南省三亚市热带红树林的根际土壤中筛选出的，具有较高纤维素降解活性的红树植物根际真菌新种：枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503，该菌于2016年11月03日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国，武汉，武汉大学，保藏编号：CCTCCNO：M2016613。本专利技术的高效纤维素降解真菌新种：枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503从海南省三亚市的热带红树林的根际土壤中筛选出来的。枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503的形态学和生理生化特征：菌种描述：如图1所示，菌落平展，偶呈实点状，灰色，绒状，背面绿黑色，具无色晕圈。分生孢子梗为枝孢型，产孢细胞合轴式延伸，及分生孢子梗生长到一定长度，顶端膨大，形成链生孢子，在膨大顶端的侧面，孢子再生长，在新的顶端又产生孢子，孢子梗继续延伸，这样重复多次，孢子梗呈屈膝状膨大，孢子脱落后膨大处留下明显孢痕。菌株营养菌丝纤细，具分隔，分枝，宽5.0～10μm。无特化分生孢子梗，产孢细胞直接生于菌丝上，长8～35μm，基部宽1.5～3.5μm，顶部不足1.0μm；分生孢子椭圆形，少见近柱状，1.5-3.5×1.0-2.0μm。麦芽汁琼脂培养基上菌落生长较慢，28℃黑暗条件下7天菌落直径30mm左右，无水溶性色素，对多种抗生素有明显抗性。将该菌株接种到以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为主要碳源的平板上，在30℃培养5天后，可形成直径25mm的水解透明圈(图1B)，表明该菌株具有较高的纤维素等生物质降解活性。枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503的分子分类学地位：从枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503的纯培养物中提取基因组DNA，运用rDNA内转录间隔区(ITS)序列特定的引物ITS1/ITS4，通过PCR扩增和测序分析得到ITS序列，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。运用β微管蛋白(β-tubulin)序列特定的引物Bt2a/Bt2b，通过PCR扩增和测序分析得到β-tubulin序列，其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。运用钙调节蛋白(calmodulin)序列特定的引物cmd5/cmd6，通过PCR扩增和测序分析得到calmodulin序列，其核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。通过GenBank中的BLAST软件将ITS序列、β-tubulin序列和calmodulin序列与GenBank数据库中的序列进行比对，在数据库中没有找到完全相似的序列，表明这3条基因序列为首次发现的新基因序列。在GenBank数据库中选取了部分与测定序列相似性较高的代表性基因序列，通过Mega软件以Neibor-joining方法构建系统进化树(见图2、3、4)，进行系统发育分析。从系统发育树可以看出枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503与已知的真菌具有较大的差异性。通过对其rDNA内转录间隔区(ITS)序列测序分析表明，与其亲缘关系最近枝孢属菌株是FJ755255.1与LN714576.1，它与枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503只有96％的相似性。其β微管蛋白(β-tubulin)序列的BLAST分析显示：枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503与所有已知菌种的β微管蛋白区只有约83％～86％的相似性。另外其钙调节蛋白(calmodulin)序列比对覆盖率约只有52％，与其亲缘关系最近的ParamyrotheciumviridisporumCBS873.85(KU846278.1)序列相似性只有89％。综合上述形态学、生理生化特征和分子分类学结果，我们确定它是一株真菌新种，将其归入枝孢属(Gladaxporismsp.)，命名为枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503，于2016年11月03日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国，武汉，武汉大学，保藏编号：CCTCCNO：M2016613。对枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503的纤维素酶活(CMC酶活)研究表明：菌株在30℃、pH7.0条件下，液体发酵纤维素酶活在3天左右达到23.46U(图5)，说明枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503具有较好的纤维素等生物质降解活性。因此，本专利技术的第二个目的是提供枝孢霉(Gladaxporismsp.)SCSIO43503在产纤维素酶中的应用。本专利技术的第本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种枝孢霉(Cladosporium sp.)SCSIO 43503，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2016613。
【技术特征摘要】
1.一种枝孢霉(Cladosporiumsp.)SCSIO43503，其保藏编号为：CCTCCNO：M2016613。2.权利要求1所述的枝孢霉(Cladosporiumsp.)SCSIO43503在产纤维素酶中的应用。3.权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：董俊德，曾思泉，凌娟，张燕英，周卫国，马卓尔，林丽云，王聪，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44
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