The invention relates to a rice green pyrenomycetes, in particular to a production of five rice smut toxin super green rice and preparation method thereof. Obtained by isolation and purification of the collected sources. Super green rice obtained by using the above method can produce five kinds of toxin, the ustilaginoideavirens (super green rice ZZY 2 (Ustilaginoidea) virens ZZY 2) in April 26, 2016 to the Hubei city of Wuhan province Wuhan University in Chinese typical culture preservation Center (CCTCC) preservation, the preservation number is CCTCC NO:M2016230.
【技术实现步骤摘要】
产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌及其获取方法
本专利技术涉及一种稻绿核菌,尤其是一种产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌及其获取方法。
技术介绍
稻曲病是一种水稻真菌病害,由绿核菌属绿核菌Ustilaginodeavirens(Cooke)Takahashi侵染水稻穗部引起。稻曲病发生较为普遍,在中国、日本、美国、印度、菲律宾等多个国家均有出现,属于世界性水稻病害(Fuetal,2015;Ashizawaetal,2010;Hamedetal,2014)。20世纪80年代前,稻曲病仅零星分布于中晚稻田,为水稻次要病害;但随着水稻品种、耕作方式、施肥用量及气候环境等因素改变,近年来,稻曲病已由过去的零星分布转变成为水稻生产中的主要病害之一(王文斌等,2014)。稻曲病不但在水稻穗部形成稻曲球,严重影响谷粒的生长,降低水稻的产量与品质,而且其病原真菌一一稻绿核菌Ustilaginodeavirens(Cooke)Takahashi所产生的稻曲病菌毒素对人畜具有毒害作用(杨丽敏等,2012;范允卿等,2012)。目前,已逐渐引起了专家学者对稻曲病产生菌以及所产稻曲病菌毒素的广泛关注(王伟刚等,2009)。稻曲病菌属于一种寄生性较强腐生性较弱的真菌,稻曲球营养丰富,而且又暴露于自然环境中,常伴生大量的腐生细菌和真菌及其它病原菌,再加上稻绿核菌生长非常缓慢,故在培养的过程中极易受到其他病原菌的污染,因此,相对其他真菌来说,稻绿核菌的分离成功率很低。然而在实际的分离过程中,研究人员普遍发现采用稻曲球内层组织分离法可以成功分离到稻曲病菌,但其培养时间较长,分离速度较慢,比较耗时。但 ...
【技术保护点】
一种产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌,保藏号为CCTCC NO:M2016230,通过如下方法获得:将采集的稻曲球病粒先用75%酒精浸泡10秒钟,然后放于酒精灯上自燃5秒钟,用无菌滤纸吸干表面的水分,将表层的组织在无菌操作状态下清理干净,然后用无菌手术刀将稻曲球切开,夹取中间层,接种到含终浓度为0.05g/L氯霉素的无菌PSA平板培养基上,每皿接种3个点,每一样品设3个重复,接种后的培养皿于28℃恒温培养箱培养,待菌落长出后(3‑5d),用尖头挑针挑取黄色或白色小菌落或者挑取边缘的菌丝移至新鲜配制且已灭菌的PSA平板培养基中,进行反复纯化;将纯化后的菌株接种到新鲜配制的无菌PSA平板上进行活化,活化后的菌株接种于50mL PS的250mL三角瓶种,置于150r/min、28℃恒温摇床中培养7‑10天,即得到菌丝孢子混合液;将此混合液经四层纱布过滤后所得滤液,即为薄壁分生孢子液;采用250mL锥形瓶装有50mL马铃薯蔗糖培养基,将培养的孢子接入其中,调节孢子数量为1×10
【技术特征摘要】
2016.06.24 CN 20161050840361.一种产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌,保藏号为CCTCCNO:M2016230,通过如下方法获得:将采集的稻曲球病粒先用75%酒精浸泡10秒钟,然后放于酒精灯上自燃5秒钟,用无菌滤纸吸干表面的水分,将表层的组织在无菌操作状态下清理干净,然后用无菌手术刀将稻曲球切开,夹取中间层,接种到含终浓度为0.05g/L氯霉素的无菌PSA平板培养基上,每皿接种3个点,每一样品设3个重复,接种后的培养皿于28℃恒温培养箱培养,待菌落长出后(3-5d),用尖头挑针挑取黄色或白色小菌落或者挑取边缘的菌丝移至新鲜配制且已灭菌的PSA平板培养基中,进行反复纯化;将纯化后的菌株接种到新鲜配制的无菌PSA平板上进行活化,活...
【专利技术属性】
技术研发人员:林晓燕,陈铭学,牟仁祥,曹兆云,朱智伟,吴俐,曹珍珍,
申请(专利权)人:中国水稻研究所,
类型:发明
国别省市:浙江,33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。