ITGA4基因甲基化检测试剂、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术涉及基因检测技术领域，尤其涉及ITGA4基因甲基化检测试剂盒及检测方法。本发明专利技术提供的引物和探针配合，能够以粪便样品为对象进行检测，从而使检测更加简便、快速。本发明专利技术还可以对组织标本进行检测。而在对样品进行检测的过程中，检测的特异性和敏感性也得到了提高。实验表明，对粪便标本而言，在特异性为95.2％时，甲基化的ITGA4对肠癌和腺瘤的敏感性分别为83.8％和41.6％。对肠癌组织而言，当特异性为97.6％(40/41)时，结直肠癌和腺瘤的检出率分别是96.2％(101/105)和71.6％(78/109)。该效果优于其他引物或探针检测的效果。

ITGA4 gene methylation detection reagent, reagent kit and detection method

The invention relates to the technical field of gene detection, in particular to a ITGA4 gene methylation detection kit and a detection method thereof. The primer and the probe provided by the invention can be used for detecting excrement samples so as to make the detection more convenient and quick. The invention can also detect the tissue samples. In the process of detecting samples, the specificity and sensitivity of detection have been improved. The results showed that the sensitivity of methylated ITGA4 to colorectal cancer and adenoma was 83.8% and 41.6% for fecal specimens, respectively, at a specificity of 95.2%. For colorectal cancer, the detection rates of CRC and adenoma were 96.2% (101/105) and 71.6% (78/109) when the specificity was 97.6% (40/41). This effect is superior to other primers or probes in detecting the effect.

【技术实现步骤摘要】
ITGA4基因甲基化检测试剂、试剂盒及检测方法
本专利技术涉及基因检测
，尤其涉及ITGA4基因甲基化检测试剂、试剂盒及检测方法。
技术介绍
粪便DNA实验(FIT-DNA)在2016年被美国预防服务工作组(USPSTF)列入了结直肠癌的筛查方法之中。该实验的原理之一就是检测粪便中脱落细胞特定基因的甲基化水平。选择针对肠癌灵敏度和特异度都非常高的DNA甲基化标志物是该实验的基础。目前研究表明检测ITGA4基因甲基化在组织和粪便标本中对肠癌有很高的检测灵敏度和特异度。研究显示，甲基化的ITGA4在粪便标本中对腺瘤的检测灵敏度是69％(9/13)，特异度是79％(22/28)。另有一项研究显示，在粪便标本中检测甲基化的ITGA4，当特异度为100％(31/31)时，对结直肠癌和结直肠腺瘤的检出率分别为36.7％(11/30)、16％(4/25)。这些研究结果提示该基因在粪便标本中对肠癌和腺瘤的检测灵敏度、特异度还有很大的提升空间。影响标志物检测灵敏性、特异性的关键因素在于引物的序列，因此，进一步涉及具有高灵敏性、特异性的ITGA4基因甲基化的检测引物具有十分重要的意义。
技术实现思路
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【技术保护点】
一种ITGA4基因甲基化定性检测试剂盒，其特征在于，以粪便、组织或细胞为待测样品，包括ITGA4基因捕获试剂和ITGA4基因甲基化定性检测试剂。

【技术特征摘要】
1.一种ITGA4基因甲基化定性检测试剂盒，其特征在于，以粪便、组织或细胞为待测样品，包括ITGA4基因捕获试剂和ITGA4基因甲基化定性检测试剂。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述ITGA4基因甲基化定性检测试剂包括检测引物；所述检测引物的核苷酸序列如SEQIDNO:2～3所示。3.一种ITGA4基因甲基化定量检测试剂盒，其特征在于，以粪便、组织或细胞为待测样品，包括ITGA4基因捕获试剂和ITGA4基因甲基化定量检测试剂。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述ITGA4基因甲基化定量检测试剂包括检测引物和检测探针；所述检测引物的核苷酸序列如SEQIDNO:4～5所示，所述检测探针的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示。5.根据权利要求1～4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述ITGA4基因捕获试剂包括磁珠探针复合物。6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述磁珠探针复合物中，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。7.一种ITGA4基因甲基化检测试剂盒，其特征在于，以粪便、组织或细胞为待测样品，包括ITGA4基因捕获试剂、ITGA4基因甲基化定性检测试剂、ITGA4基因甲基化定量检测试剂。8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述ITGA4基因捕获试剂包括磁珠探针复合物；所述磁珠探针复合物中，探针的核苷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹鸿志，吴珊，
申请(专利权)人：广州市康立明生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：广东,44