分子量均一的聚合血红蛋白的制备方法技术

本发明专利技术涉及的分子量均一的聚合血红蛋白的制备方法，其步骤包括：（１）用固相吸附法将血红蛋白吸附在固定相上，并加入同型双功能试剂进行聚合反应，得到聚合产物；（２）用不含氨基基团的高盐缓冲液将步骤（１）生成的聚合产物洗脱下来并收集，再用层析法对该收集物进行分离纯化，得到聚合血红蛋白；所用的血红蛋白为人血红蛋白、牛血红蛋白和猪血红蛋白；该方法制备的聚合血红蛋白为分子量均一的两个分子聚合的聚合血红蛋白（分子量约为１３５千道尔顿），克服传统的戊二醛制备方法中聚合产物不均一的缺陷；该聚合血红蛋白很容易与未聚合的单体血红蛋白分离，并且由于减少了蛋白胶体的数量而使胶体渗透压降低，粘度却无显著变化。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学领域，特别涉及一种。
技术介绍
血红蛋白由四个亚基(α1α2β1β2)组成，是红细胞内一种负责氧气传递的蛋白。由于其独特的氧结合特性、正常的生理代谢途径等原因，以血红蛋白为基础的血液代用品非常符合人体的生理需要。与红细胞不同，用巴斯德消毒、超滤和化学法等方式可以对血液代用品灭菌，从而除去了引起爱滋病、乙型肝炎等的病原微生物。因为没有红细胞群抗原，无需进行交叉验血，省时，也减少了对设备的要求。这使得输血可以像输盐溶液一样即刻进行。然而，未经修饰的血红蛋白不能作为血液代用品，这主要是因为(1)未经修饰的血红蛋白失去红细胞内2，3-二磷酸甘油酸调节，使血红蛋白氧亲和力升高，影响氧的释放，不能向组织有效地供氧；(2)未经修饰的血红蛋白在血浆中胶体渗透压高；(3)未经修饰的血红蛋白由于无细胞膜的包被，四聚体在体内的循环半寿期仅为2～4小时，迅速分解成二聚体和单体并从肾脏滤过，形成血红蛋白尿，造成肾中毒。同时由于游离的血红蛋白四聚体分子及其分解产物能渗透血管内皮进入器官及组织间质，引起严重的副作用。以血红蛋白为基础的血液代用品的研究都集中于降低氧亲和力、稳定四聚体结构本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分子量均一的聚合血红蛋白的制备方法，其步骤包括： （１）用固相吸附法将血红蛋白吸附在固定相上，并加入同型双功能试剂进行聚合反应，得到聚合产物；反应温度为４－３０℃，反应时间为０．５－２小时；血红蛋白在固定相上的密度为０．５－－４ｍｇ血红蛋白／ｍｌ，血红蛋白与同型双功能试剂的摩尔比为１∶５０－－５００； （２）用不含氨基基团的高盐缓冲液将步骤（１）生成的聚合产物洗脱下来并收集，再用层析法对该收集物进行分离纯化，得到聚合血红蛋白。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：苏志国，胡涛，
申请(专利权)人：中国科学院过程工程研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]