一种共载化学抗肿瘤药物和anti‑Fas抗体的纳米载药体系的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种基质金属蛋白酶响应的共载化学抗肿瘤药物和anti‑Fas抗体智能型纳米载药体系的制备方法，首先利用EDC/NHS偶联试剂将官能化的聚己内酯分别与甲氧基聚乙二醇肽链、羧化氨基聚乙二醇反应生成mPEG‑Pep‑PCL及PEG‑PCL‑COOH，然后将纳米沉淀法合成的负载小分子抗肿瘤药物纳米粒子与mPEG‑Pep‑PCL及PEG‑PCL‑COOH溶解在二氯甲烷中，搅拌后逐滴加入40℃纯水中，超声后室温下搅拌除去二氯甲烷制得基质金属蛋白酶响应的负载小分子抗肿瘤药物智能型纳米颗粒。通过EDC/MES和NHS/MES溶液活化纳米粒子表面NH2‑PEG‑COOH羧基后加入anti‑Fas抗体反应，分离纯化后即制成基质金属蛋白酶响应的共载小分子抗肿瘤药物和anti‑Fas抗体智能型纳米载药体系。

A drug loaded nanoparticle carrier chemical anticancer drugs and anti Fas antibody preparation system

The invention relates to a preparation method of matrix metalloproteinases in response to the total load of chemical anticancer drugs and anti Fas antibody intelligent nano drug delivery system, using EDC/NHS coupling reagents of functional polycaprolactone with methoxy polyethylene glycol chains, carboxylated amino polyethylene glycol reaction mPEG Pep PCL PEG and PCL COOH, then nano precipitation synthesis load of small molecule drugs Pep nanoparticles and mPEG PCL and PEG PCL COOH dissolved in dichloromethane, stirring after dropwise adding 40 DEG C in pure water, stirring to remove dichloromethane prepared matrix metalloproteinase load small molecule anti-tumor response intelligent drug nanoparticles after ultrasound at room temperature. Through EDC/MES and NHS/MES nanoparticles NH2 PEG activation solution COOH carboxyl anti after Fas antibody reaction, separation and purification is made of matrix metalloproteinase response carrying small molecule drugs and anti Fas antibody intelligent nano drug delivery system.

【技术实现步骤摘要】
一种共载化学抗肿瘤药物和anti-Fas抗体的纳米载药体系的制备方法
本专利技术属于制药领域，尤其涉及一种基质金属蛋白酶响应的共载化学抗肿瘤药物和anti-Fas抗体智能型纳米载药体系的制备方法，实现免疫治疗-化学药物治疗联合的智能型纳米载药体系的制备工艺。
技术介绍
恶性肿瘤是严重威胁人类的重大疾病，目前的治疗方法主要包括手术治疗、药物治疗、放射治疗，其中药物治疗包括常规化学药物治疗、靶向药物治疗、以及新兴的免疫治疗。作为肿瘤治疗重要的组成部分，常规化学药物治疗在延长生命、改善健康方面发挥了重要的作用。但常规化学药物如阿霉素，在杀伤肿瘤细胞的同时，对人体正常细胞造成可逆或不可逆性损伤，表现为一系列的毒副反应，包括消化道反应、骨髓抑制、器官毒性、神经毒性等，严重阻碍了化疗药物在临床上的应用。纳米技术可以与抗肿瘤药物相结合，包载化疗药物的纳米颗粒肿瘤渗透滞留效应强，可增加常规化疗药物在肿瘤组织中的聚集，即化疗药物“被动靶向性”增强；同时通过在纳米颗粒上连接抗体、肽链等配体介导胞吞作用达到化疗药物“主动靶向性”，进一步减少对正常组织的毒副作用。基质金属蛋白酶(MMPs)是一大类和细胞外基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基质金属酶响应的anti‑Fas抗体智能型纳米载药体系的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：a.通过开环聚合法制备官能化的聚己内酯PCL‑COOH和PCL‑NH

【技术特征摘要】
1.一种基质金属酶响应的anti-Fas抗体智能型纳米载药体系的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：a.通过开环聚合法制备官能化的聚己内酯PCL-COOH和PCL-NH2；b.制备甲氧基聚乙二醇肽链mPEG–Pep，然后将步骤a中制得的PCL-NH2和mPEG-Pep、DMAP、EDC、NHS混合反应，透析后将透析袋中截留液体冻干,制得mPEG–Pep-PCL；c.将步骤a中制得的PCL-COOH和NHS、EDC混合溶于DMF溶液中反应，随后纯水中透析，透析袋中液体冻干，制得PCL-NHS粉末；将PCL-NHS、氨基-聚乙二醇-羧基溶于DMF溶液反应，随后混合液在透析袋中透析，透析袋中液体冻干，制得PCL-PEG-COOH粉末；d.采用纳米沉淀法制备包载小分子抗肿瘤药物的纳米粒,将步骤b制得mPEG–Pep-PCL、步骤c制得PCL-PEG-COOH和小分子抗肿瘤药物溶解在溶剂中,然后将混合溶液逐滴加到纯水中，随后将混合溶液超声、搅拌4-8分钟形成乳液；通过蒸发除去溶剂，制得包载小分子抗肿瘤药物的mPEG–Pep-PCL@PCL-PEG-COOH的智能型纳米粒子(小分子抗肿瘤药物-loadedNPs)；e.将步骤d制得小分子抗肿瘤药物-loadedNPs粉末在pH4.5～5.5的N-吗啉乙磺酸溶液中，加入含0.1mol/LEDC的MES溶液和含0.1mol/LNHS的MES溶液，活化智能型纳米粒子表面PCL-PEG-COOH的羧基；搅拌后将活化的纳米粒子悬浮液离心，收集纳米粒子；随后将纳米粒子在0.1mol/L磷酸盐缓冲液中重悬；洗去未参与反应的EDC和NHS，最终将纳米粒子在1mlPBS溶液中重悬，加入anti-Fas抗体反应40-50小时；离心除去未连接抗体，制得基质金属蛋白酶响应的共载小分子抗肿瘤药物和anti-Fas抗体的智能型纳米载药体。2.根据权利要求1所述的基质金属酶响应的anti-Fas抗体智能型纳米载药体系的制备方法，其特征在于：所述小分子抗肿瘤药物为蒽环类、生物碱类抗肿瘤药物。3.根据权利要求1所述的基质金属酶响应的anti-Fas抗体智能型纳米载药体系的制备方法，其特征在于：所述小分子抗肿瘤药物为阿霉素、柔红霉素、长春新碱、喜树碱、紫杉醇。4.根据权利要求1所述的基质金属酶响应的anti-Fas抗体智能型纳米载药体系的制备方法，其特征在于：所述步骤a中,用亮氨酸为引发剂，将ε-己内酯单体、亮氨酸以摩尔比为100-120:1-1.2的比例加入聚合管中，通过开环聚合法制备PCL-COOH；将PCL-COOH溶解在二甲基甲酰胺中，加入乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：许佩佩，胡勇，陈兵，汪帆，左华芹，
申请(专利权)人：南京鼓楼医院，
类型：发明
国别省市：江苏,32