一种以百部为主要原料制备发酵杀虫剂的方法技术

本发明专利技术提供了一种发酵百部制备杀虫剂的方法，其工艺特点是以百部为主要原料，辅以生活垃圾、淀粉类物质及水，以市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47为发酵菌株，按照百部：生活垃圾：淀粉类物质:纯净水＝2～5:1～2:0.01:3～7的比例和体系2～5％的菌株接种量，发酵温度为25～35℃，转速为100～200rpm，保持pH＝5～8，发酵时间6～9d。本发明专利技术完全发酵，使其中的多种酶、维生素、氨基酸和微量元素充分释放出来，使产品提高杀虫剂的药效及其功能。而且又不影响植物性杀虫剂的生理活性物质。

Method for preparing fermented insecticide with hundred parts as main raw material

The invention provides a fermentation method for preparing insecticide 100, the characteristics of the technology is to 100 as the main raw material, supplemented by garbage, starch and water, using commercially available short small bacillus, Bacillus thuringiensis and Bacillus amyloliquefaciens H47 strains, according to 100: garbage starch. Material: pure water = 2 ~ 5:1 ~ 2:0.01:3 ~ 7 and 2 ~ 5% of the proportion of system strain inoculation, fermentation temperature is 25 to 35 DEG C, the speed is 100 ~ 200rpm, pH = 5 ~ 8, fermentation time 6 ~ 9d. The invention is fully fermented so that a plurality of enzymes, vitamins, amino acids and trace elements are fully released so as to improve the efficacy and the function of the pesticide. And it does not affect the physiological active substances of botanical insecticides.

【技术实现步骤摘要】
一种以百部为主要原料制备发酵杀虫剂的方法
一种微生物发酵制备杀虫剂的方法，涉及到用市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47冻干粉，以百部为原料发酵制备杀虫剂的方法，属于生物工程及发酵

技术介绍
百部为百部科多年生草本，高60-90cm。块根纺锤形，肉质，几个或几十个簇生。茎下部直立，上部成蔓生状。单叶2-4片轮生，卵形或卵状极针形，先端锐尖或渐尖，基部圆形或近截形，全线，叶脉5-9条，小脉细密横行。总花梗直立，基部贴生在叶片中脉上，顶端着生一。两朵浅绿色的花；花被4，开放后向外卷；雄蕊4，有附属物，紫色；子房小，卵形。蒴果表面平滑，暗褐色，成熟裂开，有种子数粒。花期5月，果期7月)。百部含百部碱、百部定碱、异百部定碱、原百部碱、百部宁碱、华百部碱对叶百部碱、霍多林碱、直立百部碱等多种次生代谢产物，对蚊蝇幼虫、头虱、阴虱、衣虱及臭虫等均有杀灭作用，高浓度百部在体外有杀死鼠蛲虫的作用。但植物性杀虫剂多用有机溶剂或煎煮提取，1)不利于节能也有较大的环境风险；2)影响活性物质的稳定性和遗失活性物质；3)增加成本使得开发应用困难较大，作用效果缓慢，因此给植物源杀虫剂的研发和生产带来了巨大的经济困难。利用合适的植物促生菌发酵百部，不仅有利于生理活性物质的提取，还不易造成活性物质的失活，促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用。有利于改善植物生长和增强杀虫效果。有利于环境保护和百部植物本身的有效利用。
技术实现思路
本专利技术利用百部的丰富资源，通过微生物进行发酵产生不同的生理活性物质及植物促生菌产生酶类、醇类及芳香物质等多类有义代谢产物从而提高杀虫剂的药效及其功能，本专利技术拥有着发酵时间短，有害微生物滋生少甚至没有，避免由于过长时间发酵而产生的病毒，以及能产生脂肽等生理活性物质等优点，从而提高杀虫防病的功效和植物生长的促生作用。本专利技术配方及用法：(1)挑选材料：选择新鲜、质量好的百部为发酵主原料。(2)材料的处理：先用自来水冲洗，再使用无锡百年尚水饮品有限公司提供的百年尚水清水洗两遍，最后再用0.9％的NaCl溶液侵泡120秒，沥干备用。(3)菌种培养：使用无锡百年尚水饮品有限公司提供的百年尚水配制LB培养基，将原保存菌株活化，培养约48小时得到的菌液备用；(4)接种发酵：均按照接种比例2～5％，将市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47按等比例接入发酵原液，各菌浓度为106CFU/ml，发酵3～9d，pH值5.0～8.0，温度25℃～35℃。(5)后期处理制作：粗过滤，初步筛掉大颗粒残渣，避免百部久放容易造成酸败，过滤条件：过滤筛数目为20～32目。细过滤：进一步滤掉小型颗粒残渣，使液态呈现较清澈的状态，过滤条件：过滤筛数目为80～100目，既得以百部发酵原料的杀虫剂。步骤(1)原料的制备方法包括如下步骤：(11)所使用的工具、器具均要灭菌，无油腻。(12)把百部用纯净水洗净，再用纯净水或0.9％的盐水浸泡沥干。(13)再将百部置于已灭菌的容器中，后加入生活垃圾及淀粉类物质和纯净水，其中发酵原液中体积比百部：生活垃圾：淀粉类物质:纯净水＝2～5:1～2:0.01:3～7，即得百部发酵原液。专利技术的有益效果：本利用合适的植物促生菌发酵百部，不仅有利于生理活性物质的提取，保持活性物质的稳定性，促生菌本身可通过优势菌株抑制了其他杂菌滋生从而有较好的杀虫防病和促生作用。有利于改善植物生长和增强杀虫效果。有利于环境保护和百部植物本身的有效利用。提高杀虫剂的经济价值。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完善地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一种以百部为原料发酵制备杀虫剂的方法，包括以下步骤：(1)选择新鲜、质量好的百部做为发酵主要原料。(2)纯净水清水洗两遍，最后再用0.9％的NaCl溶液浸泡，低温杀菌，然后沥干，装入纯净水清洗好的容器中，大概占体积的20％，加入占总液体体积5％的生活垃圾及1％的淀粉类物质为发酵原液备用。(3)配制LB培养基，将原保存菌株活化，80r/min振荡培养约48小时得到的发酵菌液备用；(4)均按照接种比例2％，将市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47按等比分别取接入发酵原液，100r/min振荡培养发酵6d，pH值7.0，温度25℃。(5)先进行粗过滤，过滤筛数目为20～32目。然后细过滤，过滤筛数目为为80～100目，即得百部为发酵原料的杀虫剂。实施例2一种以百部为原料发酵制备杀虫剂的方法，包括以下步骤：(1)选择新鲜、质量好的百部做为发酵主要原料。(2)纯净水清水洗两遍，最后再用0.9％的NaCl溶液浸泡，低温杀菌，然后沥干，装入纯净水清洗好的容器中，大概占体积的30％，加入占总液体体积10％的生活垃圾及1％的淀粉类物质为发酵原液备用。(3)配制LB培养基，将原保存菌株活化，100r/min振荡培养约48小时得到的发酵菌液备用；(4)均按照接种比例3％，将市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47按等比分别取接入发酵原液，100r/min振荡培养发酵6d，pH值7.0，温度25℃。(5)先进行粗过滤，过滤筛数目为20～32目。然后细过滤，过滤筛数目为为80～100目，即得百部为发酵原料的杀虫剂。实施例3一种以百部为原料发酵制备杀虫剂的方法，包括以下步骤：(4)选择新鲜、质量好的百部做为发酵主要原料。(5)纯净水清水洗两遍，最后再用0.9％的NaCl溶液浸泡，低温杀菌，然后沥干，装入纯净水清洗好的容器中，大概占体积的30％，加入占总液体体积15％的生活垃圾及1％的淀粉类物质为发酵原液备用。(6)配制LB培养基，将原保存菌株活化，100r/min振荡培养约48小时得到的发酵菌液备用；(4)均按照接种比例4％，将市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47按等比分别取接入发酵原液，100r/min振荡培养发酵6d，pH值7.0，温度25℃。(5)先进行粗过滤，过滤筛数目为20～32目。然后细过滤，过滤筛数目为为80～100目，即得百部为发酵原料的杀虫剂。实施例4一种以百部为原料发酵制备杀虫剂的方法，包括以下步骤：(1)选择新鲜、质量好的百部做为发酵主要原料。(2)纯净水清水洗两遍，最后再用0.9％的NaCl溶液浸泡，低温杀菌，然后沥干，装入纯净水清洗好的容器中，大概占体积的50％，加入占总液体体积20％的生活垃圾及1％的淀粉类物质为发酵原液备用。(3)配制LB培养基，将原保存菌株活化，150r/min振荡培养约48小时得到的发酵菌液备用；(4)均按照接种比例5％，将市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47按等比分别取接入发酵原液，100r/min振荡培养发酵6d，pH值7.0，温度25℃。(5)先进行粗过滤，过滤筛数目为20～32目。然后细过滤，过滤筛数目为为80～100目，即得百部为发酵原料的杀虫剂。本专利技术中的百部含有丰富的次级代谢物质以及百部碱提物及醇提物等对植物具有促生作用且药效明显，但是不仅仅限于此，可以根据实际情况，确定百部的鲜重或是干重的添加量或者本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以百部为原料发酵制备杀虫剂的技术，其特点是以质量好的百部为主要发酵原料，加入淀粉及生活垃圾，采用市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47，生产制备杀虫剂，其工艺为：1)选用新鲜无病变的百部用自来水洗净表面污物，再使用无锡百年尚水饮品有限公司提供的百年尚水清水洗两遍，最后再用0.9％的NaCl溶液侵泡120秒，沥干，放入罐中，按体积比为百部：生活垃圾：淀粉类物质:纯净水＝2～5:1～2:0.01:3～7配制成发酵原液。2)配制LB培养基，将原保存菌株活化，培养约48小时得到的菌液备用；再将市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47按一定的比例接入发酵原液3)发酵体系中，加入体系2％～5％的菌种，发酵温度为25～35℃，转速100～200rpm，保持pH＝5～8，发酵时间6～9d。4))发酵完成后的发酵液先经粗过滤，过滤筛数目为20～32目；再细过滤，过滤筛数目为80～100目，即可制备得到以百部为原料的杀虫剂。

【技术特征摘要】
1.一种以百部为原料发酵制备杀虫剂的技术，其特点是以质量好的百部为主要发酵原料，加入淀粉及生活垃圾，采用市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47，生产制备杀虫剂，其工艺为：1)选用新鲜无病变的百部用自来水洗净表面污物，再使用无锡百年尚水饮品有限公司提供的百年尚水清水洗两遍，最后再用0.9％的NaCl溶液侵泡120秒，沥干，放入罐中，按体积比为百部：生活垃圾：淀粉类物质:纯净水＝2～5:1～2:0.01:3～7配制成发酵原液。2)配制LB培养基，将原保存菌株活化，培养约48小时得到的菌液备用；再将市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47按一定的比例接入发酵原液3)发酵体系中，加入体系2％～5％的菌种，发酵温度为25～35℃，转速100～200rpm，保持pH＝5～8，发酵时间6～9d。4))发酵完成后的发酵液先经粗过滤，过滤筛数目为20～32目；再细过滤，过滤筛数目为80～100目，即可制备得到以百部为原料的杀虫剂。2.根据权利要求1所述的一种发酵百部制备杀虫剂的方法，其特征是：均按照接种比例2～5％，将市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47等比发酵原液，各菌浓度为106CFU/ml，发酵3～9d，pH值5...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖祥儒，吴秋兰，岑仕宇，蔡宇杰，管政兵，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32