一种GO/nHA/胶原复合骨修复材料及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石/胶原复合骨修复材料及其制备方法，其是以氧化石墨烯、纳米羟基磷灰石和胶原为原料，经混溶、搅拌、冻干、交联等步骤制备而成；其中，氧化石墨烯、纳米羟基磷灰石和胶原的质量比为2.5~5:20~25:100。本发明专利技术所制备的复合材料呈疏松多孔的三维结构，其孔隙率达90%以上，且孔隙内部相互贯通，具有良好的体外生物活性和生物相容性，经检测表明，在一定范围内随GO含量的增加，该复合材料的亲水性、机械性能、热稳定性均有显著提高，是一种适用于骨组织缺损修复的较好医用材料。

GO/nHA/ collagen composite bone repairing material and preparation method thereof

The invention discloses a graphene oxide / nano hydroxyapatite / collagen composite bone repair material and preparation method thereof, which is based on graphene oxide, nano hydroxyapatite and collagen as raw materials, by mixing solution, mixing, freeze-drying and cross-linking step was prepared; the quality of graphene oxide, and nano hydroxyapatite the collagen ratio is 2.5~5:20~25:100. The composite material is a three-dimensional porous structure prepared, its porosity was above 90%, and the inner pore coalescence, with biocompatibility in vitro biological activity and good, the results show that, with the increase of GO content in a certain range, both the thermal stability and mechanical properties, hydrophilicity of the composite material the increase, which is suitable for the repair of bone defect with good medical materials.

【技术实现步骤摘要】
一种GO/nHA/胶原复合骨修复材料及其制备方法
本专利技术属于生物医学复合材料领域，具体涉及一种氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石/胶原复合骨修复材料及其制备方法。
技术介绍
人体骨组织小面积缺损可以通过自我修复能力得到再生，但该自愈能力受到年龄、疾病及其它因素限制，因此人工合成的骨修复、骨替代材料从上世纪60年代开始就成为人们关注的焦点。目前，通过组织工程在体外构建骨修复材料填补到缺损部位来治疗骨组织的缺损，正成为一种修复骨组织缺损的理想治疗方法。胶原是哺乳动物体内含量最丰富的蛋白质，是细胞外基质（ECM）的主要成分，是皮肤、血管、骨骼、肌腱、牙齿和软骨的主要成分，属结构蛋白，具有维持皮肤和各组织器官的形态结构的功能。胶原的三螺旋结构决定了其具有良好的生物特性，如低毒性、弱抗原性、生物相容性、促进细胞生长、可降解吸收等，因而在人工骨修复材料中具有广阔的前景。碳元素是构成整个自然界的基本元素之一，也是人们认识最早的一种元素，其独特的物理化学性质和形态随着科技的不断进步和发展而逐渐被人们发现。氧化石墨烯（GO）由石墨经氧化处理并超声剥离后得到，原始石墨是疏水的，经过氧化以后表面会形成大量的含氧基团如羧基、羟基、羰基、环氧基等，从而使氧化石墨烯具有了良好的水溶性和生物相容性。以氧化石墨烯为基础制备的复合材料其弹性模数、拉伸强度、热稳定性和电导率等方面均具有良好的性能。但是，氧化石墨烯具有一定的生物毒性，与细胞作用会对细胞膜造成损害。而胶原作为细胞外基质组份，能紧密吸附于氧化石墨烯表面。此外，氧化石墨烯表面缺陷也能成为蛋白质的吸附点，且氧化石墨烯的生物毒性在吸附蛋白质之后大幅度降低。纳米羟基磷灰石（nHA）属于生物活性陶瓷，其组成中含有能够通过人体正常新陈代谢途径进行置换的钙、磷等元素，还含有能与人体组织发生键合的羟基（-OH）基团。nHA具有与骨相似的化学成分、晶体结构、摩擦系数、比重、导热系数及绝对强度。天然骨由低结晶度的羟基磷灰石和胶原组成，因此，模仿天然骨的成分、结构和特性而制备的纳米羟基磷灰石/胶原复合骨修复材料可以具有天然骨组织类似功能，从而应用于骨组织缺损修复。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石/胶原复合骨修复材料及其制备方法，该复合材料将具有良好生物相容性和骨组织缺损修复性能，是一种可用于骨组织缺损修复的新型医用材料。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种GO/nHA/胶原复合骨修复材料，其是由氧化石墨烯、纳米羟基磷灰石和胶原复合交联而成；其中氧化石墨烯、纳米羟基磷灰石和胶原的质量比为2.5~5:20~25:100。所述胶原来源于鱼皮、猪皮、牛皮或牛腱。所述GO/nHA/胶原复合骨修复材料的制备方法包括以下步骤：（1）将氧化石墨烯粉末加水后超声分散2h，得2mg/mL的氧化石墨烯分散液；（2）将冻干的胶原溶于体积浓度为0.3%的丙二酸溶液中，得到质量浓度为0.4%的胶原溶液；其中胶原与所用丙二酸的质量比为0.4:100；（3）将所得氧化石墨烯分散液与胶原溶液混合搅拌4h，得均匀的氧化石墨烯-胶原混合液；（4）将纳米羟基磷灰石粉末逐渐加入到所得氧化石墨烯-胶原混合液中，搅拌混匀，冻干并交联；交联所用交联液是将30.026gD-核糖、100mL丙酮、20mL氨水混合后，加纯水定容至1000mL。（5）将交联后所得复合材料用去离子水反复冲洗，再次冷冻干燥后，得到氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石/胶原复合膜。其中，所述氧化石墨烯是采用改进的Hummers法制备而成，其具体操作如下：1）将108mLH2SO4、12mLH3PO4冰浴搅拌混合10min后，缓慢加入5g石墨粉、2.5gNaNO3；2）称取15gKMnO4，在保证反应温度低于5℃的条件下，将其分3-5次逐渐加入步骤1）所得溶液中，冰浴搅拌反应3h，然后在40℃水浴条件下搅拌60min；3）将水浴升温至98℃持续搅拌60min，期间缓慢持续加入去离子水至混合液体积为400mL，然后停止加热，待混合液温度降至室温，再加入15mLH2O2；4）反应结束后，将混合液离心取沉淀，并将沉淀用体积浓度5%盐酸和纯水反复清洗，至洗液pH接近中性；5）将洗涤后的沉淀冷冻干燥，得到氧化石墨烯粉末。本专利技术的有益效果在于：（1）本专利技术采用了具有良好生物相容性的胶原、优异机械性能的氧化石墨烯以及与骨具有相似结构成份的纳米羟基磷灰石为原料制备复合骨修复材料，使所得材料在保证良好生物活性的同时兼顾了机械强度，且该方法原料易得，操作简单，便于规模化生产。（2）D-核糖无细胞毒性，本专利技术中以D-核糖替代传统使用的甲醛为原料制备交联剂，利用其可与胶原反生美拉德反应，使所形成的胶原纤维排列更加致密有序，从而获得优异的交联效果。附图说明图1为氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石/胶原复合骨修复材料的扫描电镜图。图2为成骨细胞在不同GO含量的氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石/胶原复合骨修复材料上的MTT试验柱状统计图。图3为不同GO含量的氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石/胶原复合骨修复材料的机械性能检测图，其中（A）拉伸强度、（B）杨氏模量、（C）断裂伸长率。具体实施方式为了使本专利技术所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本专利技术所述的技术方案做进一步的说明，但是本专利技术不仅限于此。氧化石墨烯的合成：1）将108mL浓H2SO4和12ml浓H3PO4于反应瓶中混合，冰浴搅拌十分钟后，缓慢加入5g石墨粉和2.5gNaNO3；2）称取15gKMnO4，在保证反应温度低于5℃的情况下，将其分3-5次逐渐加入步骤1）所得溶液中，冰浴搅拌反应3h，然后移至40℃水浴条件下搅拌60min；3）将水浴升温至98℃持续搅拌60min，期间缓慢持续加入去离子水至混合液体积为400mL，然后停止加热，待混合液温度降至室温，再加入15mLH2O2；4）反应结束后，将混合液离心取沉淀，并将沉淀用体积浓度5%盐酸和纯水反复清洗，至洗液pH接近中性；5）将洗涤后的沉淀冷冻干燥，得到氧化石墨烯粉末。所用交联液的配方为：将30.026gD-核糖、100mL丙酮、20mL氨水混合后，加纯水定容至1000mL。实施例1（1）称取冻干的牛腱胶原0.4g，将其溶于99.6mL体积浓度为0.3%的丙二酸中，得到质量浓度为0.4%的胶原溶液，并继续搅拌4h；（2）将0.08g纳米羟基磷灰石粉末逐渐加入到所得胶原溶液中，磁力搅拌8h，冻干48h后，在1000mL交联液中交联；（3）将交联后所得复合膜用去离子水反复冲洗，再次冷冻干燥后，得到GO含量为0wt%的纳米羟基磷灰石/胶原复合膜。实施例2（1）将0.005g氧化石墨烯粉末加水后超声分散2h，得2mg/mL的氧化石墨烯分散液；（2）称取冻干的牛腱胶原0.4g，将其溶于99.6mL体积浓度为0.3%的丙二酸中，得到质量浓度为0.4%的胶原溶液；（3）将所得氧化石墨烯分散液与胶原溶液混合搅拌4h，得均匀的氧化石墨烯-胶原混合液；（4）将0.095g纳米羟基磷灰石粉末逐渐加入到所得氧化石墨烯-胶原混合液中，磁力搅拌8h，冻干48h后，在1000mL交联液中交联；（5）将交联后所得复合膜用去离子水反复冲洗，再次冷冻干燥后，得到GO含量为1wt%的氧化石墨烯/纳米羟基磷灰本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种GO/nHA/胶原复合骨修复材料，其特征在于：所述骨修复材料是由氧化石墨烯、纳米羟基磷灰石和胶原复合交联而成；其中氧化石墨烯、纳米羟基磷灰石和胶原的质量比为2.5~5:20~25:100。

【技术特征摘要】
1.一种GO/nHA/胶原复合骨修复材料，其特征在于：所述骨修复材料是由氧化石墨烯、纳米羟基磷灰石和胶原复合交联而成；其中氧化石墨烯、纳米羟基磷灰石和胶原的质量比为2.5~5:20~25:100。2.根据权利要求1所述GO/nHA/胶原复合骨修复材料，其特征在于：所述胶原来源于鱼皮、猪皮、牛皮或牛腱。3.一种如权利要求1所述GO/nHA/胶原复合骨修复材料的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将氧化石墨烯粉末加水后超声分散2h，得2mg/mL的氧化石墨烯分散液；（2）将冻干的胶原溶于体积浓度为0.3%的丙二酸溶液中，得到质量浓度为0.4%的胶原溶液；（3）将所得氧化石墨烯分散液与胶原溶液混合搅拌4h，得均匀的氧化石墨烯-胶原混合液；（4）将纳米羟基磷灰石粉末逐渐加入到所得氧化石墨烯-胶原混合液中，搅拌混匀，冻干并交联；（5）将交联后所得复合材料用去离子水反复冲洗，再次冷冻干燥后，得到氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石/胶原复合膜。4.根据权利要求3所述GO/nH...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建华，张其清，孙晓敏，杨秋，张志华，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建,35