一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法技术

技术编号:15629463 阅读:225 留言:0更新日期:2017-06-14 13:35
本发明专利技术涉及一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法。所述的试剂盒包括多重PCR引物组、2×PCR核心试剂预混物(Premix Taq反应液)、阳性对照(禽结核参考菌株DNA)、阴性对照(ddH

【技术实现步骤摘要】
一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法,属于兽医微生物学诊断领域。
技术介绍
禽结核病(Aviantuberculosis)由禽分枝杆菌感染引起禽的一种慢性传染病。该病呈世界性分布,多呈散发性。该病主要通过消化道和呼吸道感染,呈慢性经过,渐进性消瘦、贫血、鸡冠萎缩、跛行以及产蛋减少或停止。潜伏期约2个月至1年,病禽因衰竭或肝破裂而突然死亡,无明显的季节性和地区性。该病主要特征是禽类肝、脾和肠道等组织器官形成肉芽肿和干酪样结节。一旦传入养禽场,则长期存在,很难根除。世界动物卫生组织将其列为非法定报告动物疫病,我国定为三类动物疫病(关冬梅主编,畜禽结核病及其防制,金盾出版社,2009.6)。禽结核病的诊断一般通过临床症状、剖检变化和涂片出现抗酸染色可作出初步确诊;但抗酸染色敏感性差,检出率约30%,因此具有一定局限性(Gargetal.,2003)。现最常用的办法是通过选择培养基分离分枝杆菌,再通过生化试验确定,本法结果可靠,但周期较长,生化试验涉及的反应程序较多(陆承平,2001)。常规单基因PCR方法是本文档来自技高网...
一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法

【技术保护点】
一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒,其特征在于该试剂盒含有多重PCR引物组、2×PCR核心试剂预混物Premix Taq反应液、阳性对照、阴性对照和DL1000分子量标准溶液。

【技术特征摘要】
1.一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒,其特征在于该试剂盒含有多重PCR引物组、2×PCR核心试剂预混物PremixTaq反应液、阳性对照、阴性对照和DL1000分子量标准溶液。2.根据权利要求1所述一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒,其特征在于试剂盒中的多重PCR引物组为:扩增序列3的DnaJ基因片段的引物对序列1和序列2,引物工作浓度为20pmol/μl;扩增序列6的IS1245基因片段的引物对序列4和序列5,引物工作浓度为10pmol/μl;扩增序列9的IS901基因片段的引物对序列7和序列8,引物工作浓度为;10pmol/μl。3.权利要求2所述的一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒的检测方法,其特征在于该方法包括如下步骤:(1)提供临床疑似家禽样品DNA,并同时设立阴性对照ddH2O及阳性对照禽结核参考菌株CVCC68201的DNA;(2)配制20μL多重PCR反应体系:1)模板:样品DNA/阳性...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱良全张阁丁家波刘国权彭永蒋卉杨劲松毛开荣
申请(专利权)人:中国兽医药品监察所
类型:发明
国别省市:北京,11

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