活动性结核病的治疗性接种制造技术

本发明专利技术提供了治疗患有活动性结核病(TB)的患者的方法，所述方法包括：给患者施用重组腺病毒载体，其包含编码结核分枝杆菌(Mycobactium?tuberculosis，Mtb)的Ag85A、Ag85B和TB10.4抗原的核酸。有利地，所述方法可用于缩短治疗活动性TB的常规药物治疗时间。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】活动性结核病的治疗性接种本专利技术涉及卫生保健领域。更特别地，本专利技术涉及用于患有活动性肺结核病的对象的治疗性接种的新方法。
技术介绍
结核病(TB)是一种由缓慢生长的细菌结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis, Mtb)感染导致的疾病。TB可以是潜伏的或活动性的,后者是指细菌处于生长中并且引起症状。所述细菌最常见于肺部，称作肺TB，其是传染性的。大约1/3的世界人口感染Mtb，其中5-10%的个体在其一生中将发展为活动性TB。TB导致每年死亡数超过2百万,90%以上的病例发生在发展中国家。药物易感性TB的目前治疗典型包括由世界卫生组织(WHO)建议的对于抗生素抗性菌株给予抗生素药物组合(cocktail)，持续6个月至一年或更长时间。尽管在治疗的第一个月内大部分活跃复制的细菌被杀灭，但是在剩下的治疗期间需要杀灭缓慢生长的持续存在的主要位于细胞内部的Mtb菌，以防止疾病复发。早于WHO建议的6个月中断治疗将导致疾病复发，这是由于剩余的细菌繁殖所致，而严格坚持6个月的治疗在最佳情况下可获得仅超过90%的治愈率。然而，这种长期治疗方案有一些缺点。事实上，在许多发展中国家的实际治愈率低于WHO设定的85%的目标治愈率，有时低于50%。低治疗成功率是由于不良的患者顺从性，导致多药物和极端药物抗性TB (MDR-TB/XDR-TB)形式的复发。因此，遵循抗生素的全部剂量是非常重要的，每日由健康专业人员观察药物的摄取以保证患者顺从性。已知这是直接观察治疗(D0T)，这种治疗产生高成本及物流负担。尽管TB药物治疗自首次引进以来在挽救许多生命方面取得成功，但是MDR和XDR-TB的出现凸显了使用抗生素对抗细菌中的固有限制。因此，仍急迫需要 改良的活动性TB治疗方案以控制目前全球性TB的流行。WO 2004/062607描述了一种缩短TB治疗持续时间的方式，包括使用弱酸或其前体治疗TB。对抗TB的另一种独立的途径是通过接种。然而，这种方法通常针对于预防TB，通过在未患有活动性TB (优选当接种时甚至未感染Mtb)的人体中诱导免疫应答，因此这种方法中的疫苗是预防性疫苗。卡介苗(BCG)，一种活的减毒牛分枝杆菌(Mycobacteriumbovis)菌株，是目前唯一可利用的TB疫苗，在几十年间已经用于新生儿接种。然而，这种疫苗有其限制，近年来使用一些候选疫苗在产生更有效的TB疫苗中取得进展。已经处于临床试验中的一种候选物基于表达Mtb的Ag85A、Ag85B和TB10.4抗原的腺病毒血清型35 (Havenga et al, 2006 ；Radosevic et al, 2007 ；W0 2006/053871)。已经证实这种疫苗在未感染的人体内是安全的，能诱导针对疫苗Mtb抗原的高T细胞应答，使其成为预防性TB疫苗有希望的候选物。然而，在患有活动性TB的患者中进行目的为治疗这些患者的接种则需要治疗性TB疫苗。原则上，这种治疗性TB疫苗可具有改善活动性TB治疗的潜力。治疗肺结核的治疗性TB疫苗的设想首先由Robert Koch在1890年创立，当时他宣布通过结核菌素治疗治愈了结核(见Burke，1993)。结核菌素由Mtb的提取物组成。然而，尽管所述治疗在一些患者中治愈该疾病取得成功，但是一些患者呈现出症状恶化，这种现象被称作Koch’s现象。Koch’s现象的发生是由于Thl-相关细胞因子全身释放，导致TB损害坏死所致(Churchyard et al, 2009),其可导致毁灭性的临床症状,甚至导致死亡。因此，对于任何新的治疗性TB疫苗候选物均需要证实的重要安全性考虑是在广泛给予TB患者疫苗之后不存在Koch’s现象。这仅可在流行区域由精心设计的受控临床试验解决。近来，对重新恢复治疗性TB接种的兴趣再次得到关注，特别是用作TB化疗的辅助剂，以期缩短治疗。动物研究表明编码TB抗原如热休克蛋白65(HSP-65) (Lowrie etal, 1999)、Ag85A(Ha et al, 2005)及 Ag85B (Zhu etal, 2005)的 DNA 疫苗在 Mtb 感染的动物中可降低细菌负荷(Ha et al, 2005 ；Zhu et al, 2005)，当与化疗联合(Ha et al, 2005)或在化疗完成之后(Lowrie et al, 1999)使用时预防疾病复发。当在化疗早期细菌负荷较低时给予治疗性TB疫苗应能使免疫系统靶向持留菌(persisters),使得可以预防疾病复发。在临床研究中，如在中国进行的试验所表明，热灭活的母牛分枝杆菌(Mycobacterium vaccae)制备物已经示出在MDR-TB中作为辅助治疗是有效的(Fan et al, 2007) 0这种治疗依赖于母牛分枝杆菌免疫调节的非特异性性质。处于临床开发阶段的另一疫苗是RU TI，其是含有Mtb细胞壁的脂质体制备物，目的是用作TB化疗的辅助剂(Churchyard et al, 2009)。尽管有所进展，但是对于这些疫苗仍需要证实的重要安全性考虑是在广泛给TB感染的患者施用疫苗之后不存在Koch’ s现象，这是仅可在流行区域由精心设计的受控临床试验解决的重要方面。实际上，几年前在这个领域的一家公司的会议上报告了治疗性疫苗候选物的研发由于安全性原因而不得不终止。此外，尽管在小鼠中使用编码hsp60或Ag85抗原的DNA疫苗治疗TB的一些报道是成功的，但也有在免疫治疗性小鼠模型中出现经典Koch反应的其它报道(Taylor et al，2003)。这突出了通过免疫治疗性接种引起Koch’s现象的危险，因此特别需要对每个疫苗候选物进行临床研究以评定潜在的安全性问题。US 2004/0057963涉及抗潜伏TB的治疗性疫苗，其通过输送多肽或编码其的核酸实现，所述多肽在分枝杆菌感染潜伏期期间被上调或表达。US2004/0057963教导一些抗原(如ESAT6)尽管作为预防性疫苗强效，但是作为治疗性疫苗无效，但是相反其它抗原(如Rv2031c)可以是有效的治疗性疫苗，但是作为预防性疫苗无效或仅具有可忽略的作用(见该文中实施例2)。因此，技术人员通过US2004/0057963被教导针对治疗性TB疫苗和预防性TB疫苗要使用不同抗原。对患有活动性TB患者进行治疗性接种的另一复杂因素是患有活动性TB的个体实际上具有对来自Mtb抗原的刺激不应答的T淋巴细胞，这一点通过四聚体结合测定而观测到(Weichold et al, 2007)。事实上,本专利技术中描述的临床试验证实在这些试验中患有活动性TB的患者对于至少一些主要Mtb抗原是“免疫抑制的”或者“耐受的”:尽管熟知例如Ag85A和Ag85B是Mtb最强的免疫原性蛋白质，所述对象对这些蛋白质不应答。因此，治疗性疫苗候选物应能打破这种Mtb-诱导的对细胞介导免疫的耐受。因此，本专利技术的目的是提供对患有活动性TB的患者的治疗性治疗，所述治疗在符合严格安全性标准的条件下应是有效的，且优选也应能用于与药物治疗联合应用，并且优选通过缩短药物治疗时间而改善药物治疗。专利技术概述本专利技术因此基于新的想法，即在治疗和未治疗个体中TB临床存在的原因是Mtb杆菌能诱导对通常是免疫显性Mtb抗原的耐受性。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·萨多夫，A·阿尔亚哈，
申请(专利权)人：克鲁塞尔荷兰公司，
类型：
国别省市：