一株高产海藻糖合酶的假单胞菌及其发酵产酶方法技术

本发明专利技术公开了一株高产海藻糖合酶的假单胞菌及其发酵产酶方法，属于微生物或酶领域，所述菌株具体为假单胞菌菌株(Pseudomonas sp.)CSY‑67，保藏编号为CGMCC No.13154。该菌株通过液体50L罐深层发酵，经补料，发酵培养80h，产酶平均水平为39575U/mL。本发明专利技术建立的液态发酵海藻糖合酶的方法，生产的海藻糖合酶最适pH范围为7.5‑8.5，最适作用温度范围为35℃‑45℃，在60℃保温1h后剩余酶活为88％，80℃保温2h后剩余酶活为59.5％，具有良好的耐热性，可广泛应用海藻糖的工业化生产中。

【技术实现步骤摘要】
一株高产海藻糖合酶的假单胞菌及其发酵产酶方法
本专利技术属于微生物或酶领域，具体涉及一株高产海藻糖合酶的假单胞菌及其发酵产酶方法。
技术介绍
海藻糖是由两分子葡萄糖以1，1-糖苷键连接而成的非还原性双糖，广泛存在于细菌、酵母、丝状真菌、植物、昆虫、无脊椎动物等生物体体内。海藻糖对生物体具有非常重要的生物学意义，它是能源和碳源的储备物，是蛋白质和生物膜分子在脱水、高温、氧自由基、低温等恶劣环境中的稳定剂和保护剂，是信号传感复合物和生长调控因子，还是某些细菌细胞壁的组分之一。由于海藻糖具有甜度适中、性质稳定、不易分解、无还原性等特殊性质，以及其保护生物大分子(生物膜、蛋白质、DNA)免受干燥、高温、低温、过氧等环境压力破坏的独特功能，因此该双糖的应用价值十分巨大，已经被广泛应用于食品加工业、医药业、农业、生化制品业和化妆品产业中。海藻糖合酶(trehalosesynthase)是由日本生化研究所在1995年首次发现的，其能直接将麦芽糖转化为海藻糖，此后，在脂肪杆菌(Pimelobactersp.R48)、恶臭假单胞菌(PseudomonasputidaH262)和一些嗜热菌中都发现了海藻本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株高产海藻糖合酶的假单胞菌，其特征在于：所述菌株为假单胞菌(Pseudomonas sp.)CSY‑67，菌株保藏号为CGMCC No.13154。

【技术特征摘要】
1.一株高产海藻糖合酶的假单胞菌，其特征在于：所述菌株为假单胞菌(Pseudomonassp.)CSY-67，菌株保藏号为CGMCCNo.13154。2.如权利要求1所述一株高产海藻糖合酶的假单胞菌，其特征在于：所述假单胞菌CSY-67发酵所产的海藻糖合酶最适作用pH范围为7.5-8.5，最适作用温度范围为35℃-45℃。3.如权利要求1-2任一所述的高产海藻糖合酶的假单胞菌的发酵产酶方法，主要包括以下步骤：斜面培养：挑取一环假单胞菌CSY-67接种于固体斜面培养基，37℃下恒温培养48h，得一级种子；摇瓶培养：将一级种子取一环接入种子培养基中，恒温37℃，摇床转速200r/min条件下培养48h，得二级种子液；种子罐培养：将二级种子液按照接种量5％(v/v)的比例接入种子罐培养基中，恒温37℃，转速200-800r/min条件下培养14-18h；发酵罐培养：将种子罐中的种子液按照接种量5％(v/v)的比例接入发酵罐培养基，恒温37℃，转速200-800r/min，设置通风量：0h至5h为0.25vvm、5h至20h为0.5vvm、20h至发酵结束为1.0vvm，发酵全程利用补料培养基控制发酵液pH值为6.5，发酵至酶活增长缓慢，菌体自溶严重时结束发酵，发酵周期为75-85h，得到最终发酵液；将最终发酵液通过提取与精制方法，获得海藻糖合酶成品液体酶制剂。4.如权利要求3所述的高产海藻糖合酶的假单胞菌的发酵产酶方法，其特征在于：所述固体斜面培养基(g/L)：蛋白胨12，酵母膏6，琼脂15，氯化钠1，余量为水，pH7.0，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王兴吉，刘文龙，曹世源，张杰，
申请(专利权)人：山东隆科特酶制剂有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37