因子VIII的分离制造技术

本发明专利技术公开了利用含有分离膜的基于膜的分离系统以在至少两个限制膜之间建立第一个和第二个隙间体积来分离功能活性因子Ⅷ的方法。将一种或者多种稳定剂加入到样品和／或隙间体积中。第一个隙间体积中的溶剂保持ＦⅧ在需要的电荷状态。在第一个和第二个隙间体积之间施加电压使得在分离膜的一侧的ＦⅧ与在分离膜另一侧的不需要的分子分隔开。这些方法也可用作传统分离天然或者重组ＦⅧ纯化方案中一个或多个步骤的替代。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及用于从血液或者重组来源分离凝血因子的方法和装置，尤其是从血浆中分离因子VIII的方法和装置。
技术介绍
人因子VIII(FVIII)是一种结合了von Willebrand因子(vWF)在血浆(0.1μg/mL)中循环的265kDa糖蛋白。糖蛋白对引起其激活和破坏的蛋白酶解加工高度敏感，从而调节其在凝固级联(血液凝固)中作为辅因子的作用。激活的FVIII(FVllla)是激活凝血因子X到因子Xa的辅因子。FVIII的缺乏可能导致出血紊乱的血友病A。来自血浆的FVIII平均工业产量为每升血浆140到270国际单位(IU)(1IU是在1mL混合血浆中发现的FVIII活性的平均量＝0.2μg)。FVIII传统纯化的第一步通常是冷冻沉淀(传统科恩级分分离法)产率40-50％的FVIII。含有FVIII的冷沉淀物利用色谱法，通常是免疫亲和以及离子交换进行处理。在每个加工步骤将FVIII减至损失最少目的是提高产量，因为目前合适FVIII的供应是不足的。HemasureDenmark A/S已经发展了以求克服目前血浆传统科恩级分分离法存在问题的技术。Hemasure使用大容量凝胶过本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从样品获得因子Ⅷ（ＦⅧ）的方法，所述方法包括：　　　　（ａ）将含有ＦⅧ的样品放置在包括分离膜，第一个限制膜和第二个限制膜的电泳装置的隙间体积中，所述分离膜具有确定的孔径，其截留分子量不同于所述ＦⅧ分子量，第一个限制膜位于第一个电极区域和分离膜之间以便形成它们之间的第一个隙间体积，第二个限制膜位于第二个电极区域和分离膜之间以便形成它们之间的第二个隙间体积；　　　　（ｂ）向一种或者多种样品，第一个隙间体积，或者第二个隙间体积提供一种或者多种稳定剂；　　　　（ｃ）选择一种具有限定ｐＨ的溶剂使得ＦⅧ具有需要的电荷状态；　　　　（ｄ）在第一个和第二个隙间体积之间施加电压，其中含有ＦⅧ的终产物位于分离...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：伊丽莎白西布鲁克，托马斯诺曼特顿，布伦顿康兰，
申请(专利权)人：格拉迪普有限公司，
类型：发明
国别省市：AU[澳大利亚]