胸腺素α1肽/聚合物结合物制造技术

一种药物组合物，包括一有生理活性的结合物，该结合物含有与一材料结合的胸腺素α１（ＴＡ１）肽，当将所述结合物给药于患者时，该材料增加ＴＡ１肽在患者血浆中的半衰期。该材料可以是一基本上非抗原的聚合物。在本发明专利技术的方法中，将基本上非抗原的聚合物与一ＴＡ１肽连接。将本发明专利技术的组合物给药于需要免疫刺激的患者。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
1、专利
本专利技术涉及胸腺素α1肽。2、
技术介绍
描述胸腺素α1(有时被称之为TA1)是一个具有免疫调节功能的28个氨基酸的胸腺肽，与最初从小牛胸腺的胸腺素分部5分离的天然产物类似。其生物学功效包括增进T淋巴细胞功能并包括调控白细胞介素-2(IL-2)、刺激干扰素呷产生、诱导T淋巴细胞和NK细胞活性，以及刺激胸腺生成作用。胸腺素α1还显示出上调MHC族I表达的作用。在本领域中一直需要改进含有TA1和相关肽的组合物。专利技术概述按照本专利技术的药物组合物包括一有生理活性的结合物，该结合物含有与一物质结合的胸腺素α1(TA1)肽，当将所述结合物给药于患者时，该物质可增加TA1肽在患者血浆中的半衰期。该物质可以是一基本上非抗原的聚合物。根据本专利技术的方法，将一基本上非抗原的聚合物与一TA1肽连接。将按照本专利技术的组合物给药于需要免疫刺激的患者。专利技术详述本专利技术使用的TA1肽包括天然产生的TA1和合成TA1以及具有天然产生的TA1的氨基酸序列、与其实质上相同的氨基酸序列、或其简并的序列类型的重组TA1，以及具有取代的、缺失的、延长的、置换的、或甚至修饰的序列的类似物，这些类似物具有与TA1实质上相同的生物活性，例如具有与TA1足够的氨基酸同源性的TA肽，以至于其以与TA1具有实质上相同活性的实质上相同的方式发挥作用。按照本专利技术的药物组合物包括含有与一物质结合的TA1肽的有生理活性的结合物，当将所述结合物给药于患者时，所述的物质可增加TA1肽在患者血浆中的半衰期。该物质可以是一基本上非抗原的聚合物。合适的聚合物具有范围约为200～300,000的分子量，优选为约在1,000～100,000范围内，更优选为约在5,000～35,000范围内，而最优选为约10,000～30,000范围内，分子量约为20,000是特别好的。其中包括的聚合的物质也最好是室温下水溶性的。这种聚合物的一个非限制的实例包括例如聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇的聚烷撑氧均聚物、聚氧乙烯基多元醇、其共聚物或其嵌段共聚物(维持该嵌段共聚物的水溶性的条件下)。在基本上非抗原的聚合物中，单一有活性的烷基封端的聚烷撑氧(PAO)，例如单甲基封端的聚乙二醇(mPEG)是预期可选用的。除了mPEG外，也可以使用C1-4烷基封端的聚合物。作为基于PAO的聚合物的另一种选择，也可以使用例如右旋糖酐、聚乙烯基砒络烷酮、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、碳水化合物基的聚合物等等有效的非抗原材料。本领域技术人员应当认识到前述的列举仅仅为了说明，具有这里描述的性质的所有聚合物材料都是预期可选用的。用于本专利技术的目的，“有效的非抗原”意为在本领域中所理解的所有被认为无毒性的并且不会在哺乳动物中引起明显的致免疫反应的材料。该聚合物可以是直链的或分支的。聚乙二醇(PEG)是特别优选的聚合物。可以通过任何适当的方式将聚合物与TA1肽连接。用于连接聚合物与肽的典型的方法在美国专利No.4,179,337、4,766,106、4,917,888、5,122,614和6,177,074，以及PCT国际公开WO95/13090中公开，这里通过引用结合进来。胸腺素α1具有5个用于聚合物的氨基结合的独立的位点，并且聚合物(多个聚合物)可以在一个或多个位点结合。按照一个实施方案，将20,000分子量的PEG与TA1的N末端结合形成PEG-TA1。如本领域技术人员所知，用适当的侧链保护基团，可以通过在不溶的聚合体支持珠(polymeric support beads)的TA1的固相肽合成形成PEG-TA1。在珠(beads)上完全合成TA1肽后，将被保护的TA1从珠上劈离留下具有自由氨基的N末端，再与20,000分子量的PEG反应。然后除去侧链保护基团，形成按照本专利技术实施方案的结合物。按照本专利技术的组合物可以用于需要免疫刺激的患者的治疗。这类患者可以包括癌症病人、包括乙型肝炎或丙型肝炎病毒感染的肝炎病人、HIV病人等。方法涉及给药于患者免疫刺激有效量的有生理活性的本专利技术结合物。TA1肽的分离、特性和用途已在例如美国专利No.4,079,127、美国专利No.4,353,821、美国专利No.4,148,788和美国专利No.4,116,951中描述。免疫刺激有效量的TA1肽可以通过常规剂量滴定实验来确定。已发现当以高至16mg/kg体重/天的剂量给药时，TA1对于人类是安全的。TA1肽的优选剂量是在0.001mg/kg体重/天至10mg/kg体重/天的范围内，典型的剂量是大约0.02mg/kg体重/天。按照一个实施方案，免疫刺激有效量是包括TA1肽总计在大约0.1-10mg范围内的剂量。优选的剂量包括TA1肽总计在大约1-5mg范围内。上述剂量仅反映存在于组合物中的TA1肽，不反映与其结合的聚合物的重量。在优选的实施方案中，TA1肽存在于药学上可接受的液体载体中，例如注射用水、生理浓度的盐水或类似的液体中。皮下注射的TA1的血浆半衰期仅约2小时。然而，本专利技术聚合物与TA1肽的结合物实质上增加了该肽的血浆半衰期。通过以下的实施例进一步说明但并无意限制本专利技术。实施例1用5-氟尿嘧啶(5-FU)注射大鼠引起免疫抑制，然后用胸腺素α1(200μg/kg)或PEG基结合的(pegylated)胸腺素α1(20,000 MW PEG-胸腺素α1)(等量于摩尔基的200μg/kg的胸腺素分子)注射处理大鼠以确定在免疫参数上的效力。发现(1)与用胸腺素α1相比，用PEG-胸腺素α1注射在动物中NK活性的恢复(被5-FU降低后)更多；(2)与用胸腺素α1相比，用PEG-胸腺素α1注射在动物中有活性T细胞、CD25+的恢复(被5-FU降低后)更多。在下面的实施例中，并不打算限制，在一个具有使用外科手术灌输的渗透微型真空泵的癌症治疗模型中评价了TA1的连续注入，该模型以一恒定的流速输送液体5天。给药于大鼠5-氟尿嘧啶(5-FU)以引起免疫抑制，然后8天后(使用5-FU后白细胞计数的最低点)用注射的或注入的TA1治疗。每组8只大鼠，治疗分组是对照(微型真空泵使用盐水)；低剂量TA1(0.2mg/kgsc注射；空微型真空泵)；高剂量TA1(3.5mg/kg sc注射；空微型真空泵)；以及高剂量注入的TA1(3.5mg/kg用微型真空泵注入)。在基线和5-FU处理8天后(TA1治疗的1天)，以及TA1治疗的5天、12天、20天和27天后测定免疫参数。实施例210周龄大鼠，重250-300g，给予100mg/kg 5-氟尿嘧啶(5-FU)进行免疫抑制。5-FU处理8天后，将大鼠随机分入下面的组(n＝8)对照(微型真空泵使用盐水)低剂量TA1，0.2mg/kg s.c.注射；(用空微型真空泵)高剂量TA1，3.5mg/kg s.c.注射；(用空微型真空泵)连续注入TA1，通过微型真空泵以3.5mg/k妙5天提供在基线和5-FU处理8天后(TA1治疗的1天)，以及TA1治疗的5天、12天、20天和27天后测定免疫参数。评价包括NK活性(暴露于PBMC4小时后从YAC-1细胞中释放的LDH)、总白细胞数(在通过单克隆抗体进行特异性检查后，通过身体的流式细胞计数参数来判断)、总淋巴细胞数(流式细胞术测定CD3+)、以及有活性的淋巴细胞(流式本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，包括一有生理活性的结合物，该结合物含有与一物质结合的胸腺素α１（ＴＡ１）肽，所述物质在将所述结合物给药于患者时可增加ＴＡ１肽在患者血浆中的半衰期。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：阿尔佛雷德R鲁道夫，辛西娅W塔特希尔，
申请(专利权)人：赛克隆制药公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]