ACSL4基因和表达产物在胃癌诊断与治疗中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种ACSL4基因及其表达产物的应用，用于制备胃癌诊断及治疗的产品。本发明专利技术的ACSL4基因及其表达产物，可作为诊断胃癌的特异性标志基因；本发明专利技术的ACSL4基因及其表达产物，还可作为制备治疗胃癌药物的靶基因，提供新的胃癌治疗途径。

【技术实现步骤摘要】
ACSL4基因和表达产物在胃癌诊断与治疗中的应用
本专利技术涉及肿瘤学领域。更具体地，本专利技术涉及ACSL4基因和表达产物在胃癌检测方面的应用，尤其是在胃癌的检测的应用。本专利技术还涉及ACSL4基因、蛋白及其激动剂在胃癌治疗中的应用。
技术介绍
胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一，由于胃癌的发病率高、恶性程度高，已转移以及治愈率低等特征，是目前临床面对的主要健康问题之一。我国是胃癌高发国家，其发病率和死亡率分别高居全部恶性肿瘤的第3位和第2位。胃癌已成为严重威胁人民群众身体健康、阻碍社会经济发展的重大疾病。目前胃癌的治疗主要是手术切除，早期胃癌患者术后5年生存率可达90％以上,但绝大多数胃癌在确诊时已属进展期，失去手术根治机会，5年生存率仅为11％-40％。胃癌晚期主要采取以化疗为主的综合治疗，但化疗药物的严重不良反应限制了疗效，而且胃癌是受多种因素影响、发病机制也极其复杂的癌症。因此,提高胃癌早期诊断率、寻找新的分子靶向治疗药物及转移、复发预警指标等已成为当今胃癌研究中亟待解决的重大问题。因此，本领域迫切需要开发可用于胃癌诊断的相关蛋白，为了有效地抑制胃癌细胞的生长，本领域迫切需要开发可用于抑制胃癌细胞生长的药物，以提高治疗的特异性和有效性。
技术实现思路
本专利技术公开了一种人ACSL4基因及其表达产物的应用，用于制备胃癌的诊断及治疗产品。本专利技术的第一方面提供了一种ACSL4基因或ACSL4蛋白的用途，用于制备检测胃癌和/或判断胃癌易感性的试剂或试剂盒；在另一优选例中，所述的试剂盒包括：对ACSL4蛋白或mRNA进行定量检测的试剂以及相应的标签或说明书。在另一优选例中，所述的试剂包括ACSL4特异性引物、特异性抗体、探针和/或芯片。在另一优选例中，所述的试剂包括检测用芯片，包括核酸芯片和蛋白质芯片。在另一优选例中，所述的核酸芯片包括基片和点样在基片上的胃癌相关基因的特异性寡核苷酸探针，所述的胃癌相关基因的特异性寡核苷酸探针包括与ACSL4基因或mRNA特异性结合的探针。在另一优选例中，所述的蛋白质芯片包括基片和点样在基片上的胃癌相关蛋白的特异性抗体，所述的胃癌相关蛋白的特异性抗体包括抗ACSL4蛋白的特异性抗体。在另一优选例中，所述的ACSL4蛋白包括融合蛋白和非融合蛋白。本专利技术的第二方面，提供了一种用于检测胃癌的诊断试剂盒，所述的试剂盒含有一容器，所述容器中含有检测ACSL4蛋白或mRNA的检测试剂；以及标签或说明书，所述标签或说明书注明所述试剂盒用于检测胃癌。在另一优选例中，所述的标签或说明书中注明以下内容：当检测对象的ACSL4相对β-肌动蛋白的mRNA表达量与癌旁组织的ACSL4相对β-肌动蛋白的mRNA表达量之比≤1，则提示该检测对象患胃癌的几率高于普通人群。在另一优选例中，所述的检测试剂包括：特异性引物、特异性抗体、探针和/或芯片；在另一优选例中，所述的试剂盒用于检测人肿瘤组织样品或血液样品；在另一优选例中，所述的肿瘤组织样品为胃癌样品。本专利技术的第三方面，提供了一种ACSL4蛋白、ACSL4基因或其激动剂的用途，被用于制备抑制胃癌细胞生长、增殖和/或迁移的药物，或用于制备治疗胃癌和/或胃癌转移的药物。本专利技术的第四方面，提供了一种体外非治疗性的抑制胃癌细胞生长、增殖和/或迁移的方法，包括步骤：在ACSL4蛋白或其激动剂存在下，培养胃癌细胞，从而抑制胃癌细胞生长或增殖。在另一优选例中，所述的方法包括向胃癌细胞的培养体系中添加ACSL4激动剂，从而抑制癌细胞生长或增殖。在另一优选例中，所述的激动剂包括ACSL4基因或其蛋白或其片段的激动剂。本专利技术的第五方面，提供了一种筛选治疗胃癌的候选化合物的方法，包括步骤：(a)测试组中，在细胞的培养体系中添加测试化合物，并观察所述测试组的细胞中ACSL4的表达量和/或活性；在对照组中，在相同细胞的培养体系中不添加测试化合物，并观察对照组的所述细胞中ACSL4的表达量和/或活性；其中，如果测试组中细胞的ACSL4的表达量和/或活性大于对照组，就表明该测试化合物是对ACSL4的表达和/或活性有促进作用的治疗胃癌的候选化合物。在另一优选例中，所述的细胞包括：胃癌细胞或正常细胞；在另一优选例中，所述方法还包括步骤：(b)对于步骤(a)中获得的候选化合物，进一步测试其对胃癌细胞生长或增殖的抑制作用。在另一优选例中，所述步骤(b)中包括步骤：测试组中，胃癌细胞的培养体系中添加测试化合物，并观察胃癌细胞的数量和/或生长情况；在对照组中，在胃癌细胞的培养体系中不添加测试化合物，并观察胃癌细胞的数量和/或生长情况；其中，如果测试组中胃癌细胞的数量或生长速度小于对照组，就表明该测试化合物是对胃癌细胞的生长或增殖有抑制作用的治疗胃癌的候选化合物。本专利技术的第六方面，还提供了一种抑制或治疗胃癌的方法，包括步骤：给需要治疗的对象(哺乳动物)施用安全有效量的ACSL4激动剂的用途。在另一优选例中，所述的胃癌包括胃癌。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1A为实施例1中实时定量PCR检测ACSL4mRNA在胃癌病人癌组织和癌旁组织中的表达情况示意图，其中，“N”指癌旁组织，“C”指胃癌组织。图片显示39例结果。病人的癌组织中ACSL4基因表达量低于相应的癌旁组织。图1B显示了免疫组织化学手段检测ACSL4蛋白在人胃癌临床样本中的表达。图2A显示了ACSL4基因的cDNA序列。图2B显示了ACSL4基因所编码蛋白的氨基酸序列。图3A显示了过表达ACSL4抑制了胃癌细胞HGC27和SGC7901的细胞生长。Western图示显示ACSL4过表达情况。图3B显示了过表达ACSL4抑制了胃癌细胞HGC27的平板形成克隆的能力。图3C显示了过表达ACSL4抑制了胃癌细胞HGC27和SGC7901的体外迁移能力。图4A显示了用RNA干扰技术敲低ACSL4在胃癌细胞株MGC-803和AGS中的表达后，细胞生长速度明显增快。Western图示显示ACSL4表达下调情况。图4B显示了在胃癌细胞MGC-803中下调ACSL4蛋白表达促进了该胃癌细胞株的平板克隆形成能力。图5A，B显示了下调ACSL4促进了胃癌细胞HGC27和SGC7901的体外迁移能力。图6A显示了下调ACSL4的胃癌细胞MGC-803在裸鼠皮下具有更强的成瘤能力。无论在肿瘤重量上ACSL4下调组比对照组重，同时两组具有统计学意义。具体实施方式本专利技术人经过广泛而深入的研究，首次意外地发现，ACSL4在癌组织中低表达，而在癌旁组织及正常组织中高表达，因此ACSL4可作为胃癌检测的标志物用于检测或辅助性检测胃癌。此外，ACSL4本身及其激动剂可抑制胃癌细胞的生长、增殖和迁移，可以用于作为治疗胃癌的靶点以及药物。在此基础上完成了本专利技术。ACSL4蛋白和多核苷酸在本专利技术中，“本专利技术蛋白”、“本专利技术多肽”、“ACSL4蛋白”可互换使用，指简称为ACSL4)。应理解，所述术语还包括ACSL4的活性片段和衍生物。在本专利技术中，“本专利技术基因”、“本专利技术多核苷酸”指编码ACSL4蛋白或其活性片段和衍生物的核苷酸序列，包括正本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ACSL4基因或ACSL4蛋白或其检测试剂的用途，其特征在于，用于制备检测胃癌和/或判断胃癌易感性的试剂或试剂盒。

【技术特征摘要】
1.一种ACSL4基因或ACSL4蛋白或其检测试剂的用途，其特征在于，用于制备检测胃癌和/或判断胃癌易感性的试剂或试剂盒。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的试剂盒包括：对ACSL4蛋白或mRNA进行定量检测的试剂以及相应的标签或说明书。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的试剂包括ACSL4特异性引物、特异性抗体、探针和/或芯片。4.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的标签或说明书中注明以下内容：当检测对象的ACSL4相对β-肌动蛋白的mRNA表达量与癌旁组织的ACSL4相对β-肌动蛋白的mRNA表达量之比≤1，则提示该检测对象患胃癌的几率和/或胃癌易感性高于普通人群。5.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有ACSL4基因或其蛋白作为活性成分，和药学上可接受的载体。6.一种ACSL4蛋白、ACSL4基因或其激动剂的用途，其特征在于，被用于制备抑制胃癌细胞生长、增殖和/或迁移的药物，或用于制备治疗胃癌和/或胃癌转移的药物。7.一种体外非治疗性的抑制胃癌细胞生长、增殖和/或迁移的方法，其特征在于，包括步骤：在ACSL4蛋白或其激动剂存在...

【专利技术属性】
技术研发人员：高勇，李砚东，叶小娟，张义，
申请(专利权)人：上海市东方医院，
类型：发明
国别省市：上海,31