The invention relates to a method for preparing and preserving an anaerobic ammonium oxidizing bacteria dry powder bacterial inoculum, belonging to the technical field of biological treatment of nitrogen containing wastewater. Anammox bacteria will be preserved by mixed culture removed, centrifugation, the supernatant was discarded; then add 0.01M phosphate buffer solution, the swirler, vortexmixing, centrifuged to remove supernatant and precipitate by anaerobic ammonia oxidation bacteria; anaerobic ammonia oxidation bacteria will precipitate with mass fraction of 1 ~ 3% of the mixed solution of sodium alginate, for nitrogen blowing Saul; vacuum pressure to below 25KPa, the temperature is 50 to 70 DEG C, drying, get anammox bacteria powder; drying agent will after anaerobic ammonia oxidation bacteria dry vacuum sealed, placed in 4 degrees under the environment of the save backup. Sodium alginate as drying protective agent to reduce the anammox bacteria in 50 ~ 70 DEG C under the environment of cell damage, reduce the mortality rate, flow cytometry test results showed that the survival rate in the preservation of more than 95% in the early stage.
【技术实现步骤摘要】
一种厌氧氨氧化菌干粉菌剂制备与保藏的方法
本专利技术公开了一种厌氧氨氧化菌干粉菌剂制备与保藏的方法,属于含氮废水生物处理
,特别涉及到一种在高温烘干环境下为菌种提供保护机制的保护剂。
技术介绍
厌氧氨氧化是以NH4+-N为电子供体、NO2--N为电子受体生成N2的微生物反应。该技术与传统的硝化反硝化脱氮技术相比,不需有机碳源,节省碳源100%、节省63%曝气量、剩余污泥产量减少80%,不需额外投加碱度,,被国内外公认为是一种可持续的污水生物脱氮技术。但因其倍增时间长(约10.5天),增长缓慢,纯种培养难以进行,导致应用于实际废水处理启动周期过长,世界第一个工业化厌氧氨氧化工艺处理氨氮废水装置用时3.5年之久,因此培养保藏厌氧氨氧化菌,建立菌种储库,为污水处理应用提供足够量的菌种成为工业化规模应用的关键[1]。[1]褚美红,姬玉欣,叶小青等.厌氧氨氧化菌种的低温保藏条件.杭州师范大学学报(自然科学版).2014(02):164-167.菌种保藏的方法很多,常见的有液体石蜡法、沙土保藏法、液氮法、冷藏法、冷冻法、冻干法及凝胶包埋法等。其原理主要是根据微生物的生理生化特点,人为创造低温、干燥或缺氧条件,抑制微生物的代谢作用,使其生命活动降至最低程度或处于休眠状态,使菌株很少发生突变,以达到保持纯种的目的[2]。[2]付美红,王耀耀,朱妍妍等.微生物菌种的保藏方法.河北化工.2010(4):33-34.当前,厌氧氨氧化菌种保藏的方法集中于冷藏法、冷冻法及冻干法,同时添加低温保护剂(如二甲亚砜、海藻糖、甘油、葡萄糖、聚乙烯醇、海藻酸钠等)、保藏基质(NH4+- ...
【技术保护点】
一种厌氧氨氧化菌干粉菌剂制备与保藏的方法,其特征在于,步骤如下:(1)将待保藏的厌氧氨氧化菌混培物取出,离心,弃去上清液;再加入0.01M磷酸盐缓冲溶液、涡旋器涡旋混匀,离心去除上清液,重复三次,得到厌氧氨氧化菌沉淀物;(2)将步骤(1)得到的厌氧氨氧化菌沉淀物与质量分数为1~3%的海藻酸钠溶液按照质量体积比5:8混合,混合过程进行氮气吹扫;(3)将步骤(2)得到的混合物置于真空干燥箱中,抽真空至压力至25KPa以下,温度为50~70℃,烘干,得到含水率为15~30%的厌氧氨氧化菌干粉菌剂;(4)干燥结束后,将厌氧氨氧化菌干粉菌剂进行真空封口,置于4℃环境下避光保存备用。
【技术特征摘要】
1.一种厌氧氨氧化菌干粉菌剂制备与保藏的方法,其特征在于,步骤如下:(1)将待保藏的厌氧氨氧化菌混培物取出,离心,弃去上清液;再加入0.01M磷酸盐缓冲溶液、涡旋器涡旋混匀,离心去除上清液,重复三次,得到厌氧氨氧化菌沉淀物;(2)将步骤(1)得到的厌氧氨氧化菌沉淀物与质量分数为1~3%的海藻酸钠溶液按照质量体积比5:8混合,...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨凤林,张千,徐晓晨,
申请(专利权)人:大连理工大学,
类型:发明
国别省市:辽宁,21
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