新的幽门螺杆菌受体及其用途制造技术

本发明专利技术描述了含有结合幽门螺杆菌的寡糖序列［Ｇａｌ（Ａ）↓［ｑ］（ＮＡｃ）↓［ｒ］／Ｇｌｃ（Ａ）↓［ｑ］（ＮＡｃ）↓［ｒ］α３／β３］↓［ｓ］［Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃβ３］↓［ｔ］Ｇａｌβ４Ｇｌｃ（ＮＡｃ）↓［ｕ］的物质或受体，其中ｑ、ｒ、ｓ、ｔ和ｕ各自分别为０或１，以及它们在用于治疗由幽门螺杆菌引起疾病的药用和营养组合物等中的用途。本发明专利技术还涉及使用该受体来诊断幽门螺杆菌。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术描述了一种结合幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)的物质或受体及其在例如治疗由幽门螺杆菌引起疾病的药用和营养组合物中的用途。本专利技术还涉及使用受体来诊断幽门螺杆菌。
技术介绍
幽门螺杆菌被认为与几种胃肠道疾病相关，包括慢性胃炎，非类固醇抗-炎症药物(NSAID)相关联的胃病、十二指肠溃疡和胃溃疡、胃麦芽淋巴瘤和胃腺癌(Axon，1993；Blaser，1992；DeCross和Marshall，1993；Dooley，1993；Dunn等，1997；Lin等，1993，Nomura和Stemmermann，1993；Parsonnet等，1994；Sung等，2000；Wotherspoon等，1993)。全部或部分非肠胃疾病包括婴儿猝死综合症(Kerr等，2000和US 6,083,756)，自体免疫疾病如自体免疫胃炎和恶性贫血(Appelmelk等，1998；Chmiela等，1998；Clayes等，1998；Jassel等，1999；Steininger等，1998)和某些皮肤疾病(Rebora等，1995)，胰腺疾病(Correa等，1990)，肝脏疾病包括腺癌(Nilsson等，2000；Avenaud等，2000)，和如动脉硬化症等心脏疾病(Farsak等，2000)。Pakodi等于2000年回顾了由幽门螺杆菌引起或相关的多种疾病。人们对于细菌定居和感染的主要兴趣点在于细菌粘附于胃粘膜上皮细胞表面的机理。已有报道称基于脂质-和蛋白-的糖缀合物作为受体来与这种微生物结合，如唾液酸糖缀合物(sialylated glycolconjugates)(Evans等，1988)，硫苷脂和GM3(Saitoh等，1991)，Leb血型决定簇(Boren等，1993)，聚糖基神经酰胺(Miller-Podraza等，1996，1997a)，乳糖基酰基鞘氨醇(Angstrom等，1998)，和神经节四糖基酰基鞘氨醇(Lingwood等，1992；angstrm等，1998)。其它潜在的幽门螺杆菌受体包括多糖硫酸乙酰肝素(Ascensio等，1993)和磷脂酰乙醇胺(Lingwood等，1992)。Zopf等的美国专利5,883,079(1999年3月)、5,753,630(1998年5月)和5,514,660(1996年5月)描述了作为幽门螺杆菌粘附素抑制剂的包含Neu5Acα3Gal的化合物。唾液酸乳糖分子抑制了幽门螺杆菌与人类肠胃细胞系的结合(Simon等，1999)，并且它在恒河猴感染的动物模型中也是有效的(Mysore等2000)。该化合物已用于临床试验。美国专利5,446,681(Krivan等，1995年11月)描述了一种细菌受体抗生素共扼物，该共扼物由一个脱唾液酸神经节苷脂缀合一个青霉素抗生素构成。该专利还特别请求保护了用阿莫西林(amoxicillin)-脱唾液酸-GM1共扼物治疗幽门螺杆菌引起的疾病。本专利技术描述的寡糖序列/糖脂不属于神经节类的糖脂。美国专利5,386,027(Krivan等，1995年1月)和5,217,715(1993年6月)描述了寡糖序列或糖脂抑制几种致病菌的用途，可是其中并没有涉及本专利技术所述的结合特异性，而且在其研究或要求的细菌中也没有包括幽门螺杆菌。已有报道糖序列GIcNAcβ3Gal作为链球菌的受体(Andersson等，1986)。某些细菌可能具有重叠结合特异性，但是由此不可能预测出甚至非常接近相关细菌粘附素的结合物质。对于幽门螺杆菌来说，除了Lewis b结合蛋白外其他的糖结合分子还是未知的。专利技术概述本专利技术涉及含有寡糖序列stGalβ4Glc(NAc)u并能结合幽门螺杆菌的物质或受体的用途，其中q、r、s、t和u各自独立为0或1，所以当t＝0和u＝0时，寡糖序列与多价载体连接或以高浓度的游离寡糖存在，还涉及所述具有结合幽门螺杆菌活性的所述寡糖序列的类似物或衍生物在生产具有结合幽门螺杆菌的或抑制活性的组合物中的用途。本专利技术的目的之一涉及本专利技术描述的作为介质的结合幽门螺杆菌的寡糖序列的用途，以及该物质在制备药物组合物中的用途，尤其是将之用来治疗由本专利技术所述幽门螺杆菌的存在引起的任何一种疾病。本专利技术还涉及治疗由幽门螺杆菌存在引起的疾病的方法。本专利技术还涉及使用本专利技术描述的作为幽门螺杆菌的结合或抑制物质的受体来诊断幽门螺杆菌。本专利技术的另一个目的是提供了含有结合幽门螺杆菌的寡糖序列的物质、药物组合物和营养添加剂或复合物。本专利技术的另一个目的是上述结合幽门螺杆菌的物质在鉴定细菌粘附素、幽门螺杆菌分型和结合幽门螺杆菌检测中的用途。本专利技术的另一个目的是上述结合幽门螺杆菌的物质在生产抗幽门螺杆菌疫苗中的用途。专利技术详述附图说明图1A和1B 由内生糖神经酰胺酶(endoglycoceramidase)消化六糖基神经酰胺(hexaglycosylceramide)获得的过甲基化(permethylated)寡糖的EI/MS，该寡糖的气相色谱图(上部)和峰A和B各自的EI/MS波谱图(底部)。图2A和2B 六糖基神经酰胺(2A)和五糖基神经酰胺(2B)的阴离子FAB质谱图。图3A和3B 显示了六糖糖脂(3A)和五糖糖脂(3B)端基异构体区域的质子NMR波谱图，过夜获得的较小1型(minor type 1)成分的波谱达到了良好的的信号-噪音比。图4A、4B和4C兔胸腺糖鞘脂的酶降解结果。硅胶薄层板置于C/M/H20(体积比为60∶35∶8)中，其中图4A和4B为4-甲氧基苯甲醛显像板，图4C为涂覆35S-标记的幽门螺杆后获得的放射自显影照片。1、七糖基神经酰胺(结构1，表I)；2、脱唾液酸(desialylated)七糖基神经酰胺(经酸处理后获得)；3、用β4-半乳糖苷酶处理的脱唾液酸(desialylated)七糖基神经酰胺；4、用唾液酸酶和β4-半乳糖苷酶处理的七糖基神经酰胺；5、来自于人红血球的对照糖鞘脂(glycosphingolipids)(乳糖苷神经酰胺(lactosylceramide)，三己糖苷神经酰胺和红细胞糖苷脂)；6、用β4-半乳糖苷酶和β-己糖胺酶处理的脱唾液酸七糖基神经酰胺；7、用唾液酸酶、β4-半乳糖苷酶和β-己糖胺酶处理的七糖基神经酰胺。图5A和5B兔胸腺七糖基神经酰胺(结构1，表I)的部分酸水解后获得产物的TLC。显影溶剂同图4A、4B和4C。5A，4-甲氧基苯甲醛-显影板；5B，涂覆35S-标记的幽门螺杆菌后获得的放射自显影照片。1、七糖基神经酰胺；2、脱唾液酸七糖基神经酰胺(酸处理)；3、五糖基神经酰胺；4、水解产物；5、对照糖鞘脂(同图4A、4B和4C)。图6A和6B系列稀释的糖鞘脂。使用细菌覆盖技术在TLC板上鉴定结合活性。TLC显影溶剂同图4A、4B和4C。不同的糖脂以克分子数相等的量加到板上。基于己糖的量量化糖脂。6A、六和七糖基神经酰胺(结构2和3，表I)；6B、五和四糖基神经酰胺(结构4和5，表I)。糖脂数量(用pmols表示)如下所示1，1280(每一)；2，640；3，320；4，160；5，80；6，40；7，20pmol(每一)。图7A和7B用4-甲氧基苯甲醛检测分离糖鞘脂的薄层色谱本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有结合幽门螺杆菌的寡糖序列［Ｇａｌ（Ａ）↓［ｑ］（ＮＡｃ）↓［ｒ］／Ｇｌｃ（Ａ）↓［ｑ］（ＮＡｃ）↓［ｒ］α３／β３］↓［ｓ］［Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃβ３］↓［ｔ］Ｇａｌβ４Ｇｌｃ（ＮＡｃ）↓［ｕ］的物质，以及具有结合幽门螺杆菌活性的所述寡糖序列的类似物或衍生物在制备具有幽门螺杆菌结合或抑制活性的组合物中的用途，其中ｑ、ｒ、ｓ、ｔ和ｕ各自独立为０或１，当ｔ＝０和ｕ＝０时，寡糖序列与多价载体连接或以高浓度的游离寡糖存在。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：哈利那米勒波德拉扎，苏珊特尼伯格，乔纳斯安格斯特罗姆，卡尔安德斯卡尔森，贾里纳图南，
申请(专利权)人：比奥蒂治疗公司，
类型：发明
国别省市：FI[芬兰]