独角莲抗肿瘤活性部位及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及从中药独角莲中发现的一种抗肿瘤活性部位及制备的方法。其中包括将独角莲依次经水提、阳离子交换树脂分离纯化、阴离子交换树脂分离纯化得到抗肿瘤活性部位。采用抗肿瘤活性实验证明，该部位具有显著的抗肿瘤活性，具有开发成相关治疗药物的潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及从中药独角莲中发现的一种抗肿瘤活性部位及该活性部位的制备方法与应用。
技术介绍
独角莲(TyphoniumgiganteumEngl.)为天南星科(Araceae)犁头尖属(TyphoniumSchott)植物，是中国特有的一种植物。独角莲主要产于河南、四川、陕西等地，现全国各地亦多栽培，东北地区产量极高，且价格较低廉。白附子(习称禹白附)为独角莲的干燥块茎。《民间草药》、《中药大辞典》记载，独角莲球茎供药用，逐寒湿、祛风痰、镇痉、治中风痰壅，口眼歪斜、破伤风、治跌打损伤、淋巴结核。迄今为止，对这种植物的研究仍较少，仅限于民间偏方使用。独角莲化学成分的研究主要集中于脂溶性部位，分离得到化合物有脑苷类、有机酸、氨基酸、木脂素类等成分。已有文献对独角莲中氨基酸的含量进行了分析，比如孙启良等(孙启良,卫永第.独角莲各部位氨基酸的含量分析[J].白求恩医科大学学报,1995,21(4):364.)采用氨基酸自动分析仪，测得独角莲的块茎、叶柄、叶片、花和果实的17种氨基酸含量，研究表明独角莲各部位的氨基酸种类齐全，且8种必需氨基酸含量均很高。刘磊等(刘磊，陈燕萍.独角莲地上各部位氨基酸含量的分析[J].吉林大学学报(医学版),2003,29(1)54.刘磊，陈燕萍.独角莲种子中脂肪酸和氨基酸含量分析[J].吉林大学学报(医学版),2003,29(2):168.)分别检测到了独角莲的花蕊、花瓣、果肉、种子、叶中的16种氨基酸成分，且含量随生长期的延长呈有规律性地增长，各部位都以谷氨酸含量最高。目前对独角莲有效活性成分的研究及应用也处于开发阶段。中国专利CN104072627A公开了一种独角莲多糖提取物的制备方法，应用该工艺提取的独角莲多糖节省提取时间，提取率高，提取物具有显著的抗酪氨酸激酶、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。中国专利CN102188564A采用超临界流体技术从独角莲中提取出大量的抗癌活性物质，主要成分是β-谷甾醇和菜油甾醇，该工艺方法要求高，可操作性差。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种独角莲抗肿瘤活性部位，本专利技术另一个目的是提供一种独角莲抗肿瘤活性部位的制备方法及其应用。为了实现以上目的，本专利技术采用的技术方案为：一种独角莲的抗肿瘤活性部位，其通过以下方法制备得到：(1)水提：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，加水加热至微沸提取。合并收集水提液，加入乙醇调节醇浓度，离心取上清，减压浓缩至无醇味，得独角莲水提液。(2)阳离子交换树脂分离纯化：将独角莲水提液转入阳离子交换树脂柱，上样吸附，收集上样流出液；用纯化水冲洗树脂柱，再用氨水洗脱，收集洗脱液减压浓缩后烘干，得中间产物1。(3)阴离子交换树脂分离纯化：取阳离子交换树脂纯化所得中间产物1，用纯化水溶解转入阴离子交换树脂柱，上样吸附，收集上样流出液，浓缩烘干，得独角莲抗肿瘤活性部位。专利技术人对步骤(2)中所用阳离子交换树脂进行了筛选，使用多种型号的阳离子交换树脂作比较，包括001×7、001×4、DL10、DL16和D002等型号的阳离子交换树脂，结果表明001×7阳离子交换树脂柱纯化所得独角莲抗肿瘤活性部位其抗肿瘤活性更好。专利技术人对步骤(3)中所用阴离子交换树脂进行了筛选，使用多种型号的阴离子交换树脂作比较，包括D201、D301、D318、201×4和HZ202等型号的阴离子交换树脂，结果表明201×4阴离子交换树脂柱纯化所得独角莲抗肿瘤活性部位其抗肿瘤活性更好。优选地，本专利技术的制备方法为：(1)水提：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，加入10倍量水加热至微沸提取2～5次，每次提取2h。合并收集水提液，加入乙醇调节醇浓度至30％，离心取上清，减压浓缩至无醇味，得独角莲水提液。(2)阳离子交换树脂分离纯化：将独角莲水提液转入001×7阳离子交换树脂柱，上样吸附10～16h，收集上样流出液；用纯化水冲洗树脂柱，再用0.5％的氨水洗脱，收集洗脱液减压浓缩后烘干，得中间产物1。(3)阴离子交换树脂分离纯化：取阳离子交换树脂纯化所得中间产物1，用纯化水溶解转入201×4阴离子交换树脂柱，上样吸附10～16h，收集上样流出液，浓缩烘干，得独角莲抗肿瘤活性部位。优选地，所述步骤(1)中微沸提取次数为3次。优选地，所述步骤(1)中所用乙醇为75％乙醇或95％乙醇。优选地，所述步骤(2)中，上样吸附时间为12h。优选地，所述步骤(3)中，上样吸附时间为12h。本专利技术的优点与效果是：本专利技术提供的独角莲抗肿瘤活性部位，实验结果表明本专利技术制备方法制备得到的抗肿瘤活性部位对肿瘤细胞具有很好的抑制作用，且长期使用无不良反应，抗肿瘤疗效确切，安全无毒，且可以方便和药学上可接受的载体制备成各种剂型的药物，方便服用。本专利技术提供的独角莲抗肿瘤活性部位的制备方法简单，可操作性强，成本低，适宜工业化生产。具体实施方式下面结合实施例，对本专利技术作进一步详述。实施例1：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，取5kg加入50L水加热至微沸提取2次，每次提取2h。合并收集水提液，加入95％乙醇调节醇浓度至30％，离心取上清，减压浓缩至无醇味，得独角莲水提液；将独角莲水提液转入001×7阳离子交换树脂柱，上样吸附10h，收集上样流出液；用纯化水冲洗树脂柱，再用0.5％的氨水洗脱，收集洗脱液减压浓缩后烘干，得中间产物1；取中间产物1，用纯化水溶解转入201×4阴离子交换树脂柱，上样吸附16h，收集上样流出液，浓缩烘干，得独角莲抗肿瘤活性部位。实施例2：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，取5kg加入50L水加热至微沸提取3次，每次提取2h。合并收集水提液，加入75％乙醇调节醇浓度至30％，离心取上清，减压浓缩至无醇味，得独角莲水提液；将独角莲水提液转入001×7阳离子交换树脂柱，上样吸附16h，收集上样流出液；用纯化水冲洗树脂柱，再用0.5％的氨水洗脱，收集洗脱液减压浓缩后烘干，得中间产物1；取中间产物1，用纯化水溶解转入201×4阴离子交换树脂柱，上样吸附12h，收集上样流出液，浓缩烘干，得独角莲抗肿瘤活性部位。实施例3：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，取5kg加入50L水加热至微沸提取5次，每次提取2h。合并收集水提液，加入75％乙醇调节醇浓度至30％，离心取上清，减压浓缩至无醇味，得独角莲水提液；将独角莲水提液转入001×7阳离子交换树脂柱，上样吸附12h，收集上样流出液；用纯化水冲洗树脂柱，再用0.5％的氨水洗脱，收集洗脱液减压浓缩后烘干，得中间产物1；取中间产物1，用纯化水溶解转入201×4阴离子交换树脂柱，上样吸附10h，收集上样流出液，浓缩烘干，得独角莲抗肿瘤活性部位。实施例4：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，取5kg加入50L水加热至微沸提取5次，每次提取2h。合并收集水提液，加入95％乙醇调节醇浓度至30％，离心取上清，减压浓缩至无醇味，得独角莲水提液；将独角莲水提液转入001×7阳离子交换树脂柱，上样吸附12h，收集上样流出液；用纯化水冲洗树脂柱，再用0.5％的氨水洗脱，收集洗脱液减压浓缩后烘干，得中间产物1；取中间产物1，用纯化水溶解转入201×4阴离子交换树脂柱，上样吸附16h，收集上样流出液，浓缩烘干，得独角莲抗肿瘤活性部位。实施例5：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，取5kg本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种独角莲抗肿瘤活性部位，其特征在于所述的抗肿瘤活性部位通过以下方法制备得到：(1)水提：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，加水加热至微沸提取，合并收集水提液，加入乙醇调节醇浓度，离心取上清，减压浓缩至无醇味，得独角莲水提液；(2)阳离子交换树脂分离纯化：将独角莲水提液转入阳离子交换树脂柱，上样吸附，收集上样流出液；用纯化水冲洗树脂柱，再用氨水洗脱，收集洗脱液减压浓缩后烘干，得中间产物1；(3)阴离子交换树脂分离纯化：取中间产物1，用纯化水溶解转入阴离子交换树脂柱，上样吸附，收集上样流出液，浓缩烘干，得独角莲抗肿瘤活性部位。

【技术特征摘要】
1.一种独角莲抗肿瘤活性部位，其特征在于所述的抗肿瘤活性部位通过以下方法制备得到：(1)水提：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，加水加热至微沸提取，合并收集水提液，加入乙醇调节醇浓度，离心取上清，减压浓缩至无醇味，得独角莲水提液；(2)阳离子交换树脂分离纯化：将独角莲水提液转入阳离子交换树脂柱，上样吸附，收集上样流出液；用纯化水冲洗树脂柱，再用氨水洗脱，收集洗脱液减压浓缩后烘干，得中间产物1；(3)阴离子交换树脂分离纯化：取中间产物1，用纯化水溶解转入阴离子交换树脂柱，上样吸附，收集上样流出液，浓缩烘干，得独角莲抗肿瘤活性部位。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中阳离子交换树脂型号选自001×7、001×4、DL10、DL16或D002中的一种；所述步骤(3)中阴离子交换树脂型号选自D201、D301、D318、201×4或HZ202中的一种。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中阳离子交换树脂型号为001×7；所述步骤(3)中阴离子交换树脂型号为201×4。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征为包括如下步骤：(1)水提：独角莲鲜品切片烘干，粉碎，加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贵民，关永霞，杜丙源，宁停波，陈小荣，
申请(专利权)人：鲁南制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37