复合微生物菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种复合微生物菌剂及其制备方法和应用，属于废气生物净化技术领域。复合微生物菌剂制备方法包括：将氯苯降解专性菌和混合菌种按质量比0.5‑1:1混合后得复合菌种，接种、发酵复合菌种至发酵液的活菌数为1.0×10

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及废气生物净化
，且特别涉及一种氯苯高效降解专性菌、复合微生物菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
据报道，每年约有150万吨的氯苯类有机化合物释放到大气中。美国环保局(EPA)公布的129种优先控制污染物名单中，氯苯类有机化合物占一半以上。我国也将氯苯列为重点污染物的黑名单之中。大部分氯苯类有机化合物是有毒性的，另有一部分被认为具有致癌、致畸、致突变的三致效应。致癌的氯苯类化合物并没有安全阈值剂量，这样说来，一旦暴露其中，不管多小的剂量，都预示着会产生一定的风险。根据国际科学学院的报道，氯苯类有机化合物的释放还会提高大气中红外线的吸收和发射。而一旦地球上的热量散失变得迟钝，地球的温度以及气候就会相应的受到影响。因此，研发氯苯废气的污染控制技术显得十分重要和迫切。目前，生物降解技术是净化这类物质的有效方法之一。现阶段，实际应用的废气生物降解系统多直接采用活性污泥为接种微生物启动反应器。活性污泥接种前一般要经过较长时间的驯化，培养出具有较高降解目标污染物的能力后，再进行生物处理系统接种。通常存在微生物驯化周期长、技术要求高、废气生物处理系统启动时间长、启动期去除效率低、运行不稳定等缺点，特别是在针对难溶难降解废气的生物净化过程中，此类问题尤为突出。此外，污泥活性不易保存，携带、运输不便。废气生物降解系统中，能否接种降解能力强、活性高的微生物是废气生物处理系统迅速完成启动，并成功运行的关键。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种氯苯高效降解专性菌，该专性菌具有较好的氯苯降解作用。本专利技术的第二目的在于提供一种复合微生物菌剂，该复合微生物菌剂可直接应用于处理废气，对氯苯废气降解效果好且易保存、携带方便。本专利技术的第三目的在于提供一种上述复合微生物菌剂的制备方法，此制备方法简单，易操作。本专利技术的第四目的在于提供上述复合微生物菌剂在降解氯苯废气中的应用。本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的：本专利技术提出一种氯苯高效降解专性菌，其生物保藏编号为：CGMCCNo.10053，该专性菌于2014年11月25日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所。本专利技术还提出一种复合微生物菌剂，其包括固体载体，还包括氯苯高效降解专性菌和混合菌种，氯苯高效降解专性菌与混合菌种的质量比为0.5-1:1，混合菌种驯化自石化厂污水处理站曝气池内的活性污泥。该复合微生物菌剂可应用于降解氯苯废气领域。本专利技术还提出一种复合微生物菌剂的制备方法，其包括以下步骤：将氯苯高效降解专性菌和混合菌种按质量比0.5-1:1混合后得复合菌种，接种、发酵复合菌种至发酵液的活菌数为1.0×1010-1.0×1011cfu/mL；将发酵液与固体载体材料按质量百分比1:1-10混合得复合微生物菌剂，混合菌种驯化自石化厂污水处理站曝气池内的活性污泥。本专利技术实施例的氯苯高效降解专性菌、复合微生物菌剂及其制备方法和应用的有益效果是：通过将氯苯高效降解专性菌和混合菌种混合，丰富了复合菌剂所包含的有效菌种；专性菌和混合菌以质量比0.5-1:1混合，使混合后的复合菌种对氯苯的降解效果达到最佳；复合菌种发酵后的发酵液中活菌数为1.0×1010-1.0×1011cfu/mL，保证了活菌的数量，不仅提高了降解率还缩短了降解所需的时间；将发酵液与固体载体材料按质量百分比1:1-10混合，可以便于使用并利于该产品的长期贮存。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实施例提供的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的生物保藏信息及存活证明。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的氯苯高效降解专性菌、复合微生物菌剂及其制备方法和应用进行具体说明。本专利技术实施例提供的用于降解氯苯废气的复合微生物菌剂，以Lysinibacillu属的氯苯高效降解专性菌和具有氯苯高降解活性的混合菌种混合发酵后，将所得的发酵液再与固体载体材料混合而得。其中，本专利技术实施例中的Lysinibacillu属的氯苯高效降解专性菌分离自长期运行处理氯苯废气的生物滴滤塔，具体的，该氯苯高效降解专性菌筛选于附着在生物滴滤塔填料表面的生物膜。经鉴定，本专利技术实施例中氯苯高效降解专性菌属于Lysinibacillus属，其分类命名为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillusfusiformis)，并于2014年11月25日在位于北京朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.10053。本实施例所用的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的生物保藏信息以及存活证明请参见图1。该纺锤形赖氨酸芽孢杆菌具有如下生物学特性：菌落较小，圆形，光滑，隆起，边缘整齐。其菌细胞呈直杆状，直杆两端圆头，细胞大小约为1.4-2.8×0.5-0.8μm，长有数根鞭毛，端生Φ0.3～0.4μm短圆形芽孢。革兰氏阳性，V.P试验阳性，甲基红试验阳性，吲哚试验阳性，能水解明胶，不能水解淀粉。该纺锤形赖氨酸芽孢杆菌具体筛选过程如下：为了提高筛选效率，筛选例如可以包括初筛和复筛。其中初筛通常是从大量的菌落中随机挑取部分菌落进行试验并通过检测得到一些较优菌株，删去明确不符合要求的大部分菌株，把生产形状类似的菌株尽量保留下来，使优良菌种不至于漏网，该筛选类型主要以量为主，精确性为次；复筛则是将初筛得到的较优菌株再进行多次试验，验证其效价和传代稳定性，从而从中得到一两个或少数几个最优的菌株，该筛选类型主要以质为主。本专利技术实施例中的初筛例如可优选采用快速耗时短的无菌滤纸片平板法，该方法通常是将饱浸含有某种指示剂的固体培养基的滤纸片搁于培养皿中，将待筛选的菌悬液稀释后接种到滤纸上，保温培养形成分散的单菌落，菌落周围将会产生对应的颜色变化，进而可以通过指示剂变色圈与菌落直径之比了解菌株的相对产量性状。具体的，本专利技术实施例中优选取1mL稀释后的富集培养液涂布于无机盐培养基上于30-45℃条件下培养1-5d，将长出的菌落逐一挑入事先装有约100-200μL无机盐培养基的96孔平板上，培养0.5-3d后，用4-8mm无菌滤纸片吸收培养液后贴于鉴别培养基上，每皿均匀地贴3-7个，于30-45℃条件下培养0.5-3d，向滤纸片上滴加0.5-1.5mol/L的AgNO3溶液，根据滤纸片周围生长圈和显色圈大小，判断菌株的降解能力，挑取3-5株降解能力较大者作为初筛菌。其中，无机盐培养基例如可以包括质量比为3-5:1-3:1.5-3:0.1-0.3:0.03-0.08:0.005-0.015:0.01-0.05的K2HPO4、KH2PO4、NH4Cl、MgSO4、MnSO4、F本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种氯苯高效降解专性菌，其特征在于，其生物保藏编号为：CGMCC No.10053。

【技术特征摘要】
1.一种氯苯高效降解专性菌，其特征在于，其生物保藏编号为：CGMCCNo.10053。2.一种复合微生物菌剂，包括固体载体，其特征在于，还包括如权利要求1所述的氯苯高效降解专性菌和混合菌种，所述氯苯高效降解专性菌与所述混合菌种的质量比为0.5-1:1，所述混合菌种驯化自石化厂污水处理站曝气池内的活性污泥。3.根据权利要求2所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂的含菌量大于等于1.0×1010cfu/g。4.如权利要求2-3任一项所述的复合微生物菌剂在降解氯苯废气中的应用。5.一种复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将如权利要求1所述的氯苯高效降解专性菌和混合菌种按质量比0.5-1:1混合后得复合菌种，接种、发酵所述复合菌种至发酵液的活菌数为1.0×1010-1.0×1011cfu/mL；将所述发酵液与固体载体材料按质量百分比1:1-10混合得复合微生物菌剂，所述混合菌种驯化自石化厂污水处理站曝气池内的活性污泥。6.根据权利要求5所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，驯化包括以下步骤：将取自石化厂污水处理站曝气池内的所述活性污泥置于容器中进行曝气；向所述容器中添加氯苯乳化液至所述活性污泥中的氯苯质量浓度为1500-2000mg/...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨百忍，丁成，李朝霞，许琦，孙祝秋，
申请(专利权)人：盐城工学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32