公开了一种制备杨梅花青素提取物的方法，包括步骤：（ａ）用１－１０倍鲜果重量的５０－９５％重量的乙醇水溶液浸泡杨梅果肉４小时以上；（ｂ）过滤，除去乙醇，得到药液；（ｃ）将所得药液调至ｐＨ至１－４，过大孔树脂吸附柱；（ｄ）用水洗涤柱，至流出液为无色；（ｅ）用２０％－９５％重量的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；（ｆ）过滤，回收乙醇，４０－８０℃真空干燥得到的洗脱液。还公开了用该方法制备的杨梅花青素提取物，及其质量标准和用作食品或药物的着色剂的用途。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物有效成分的提取工艺领域，具体说，是杨梅花青素提取物的提取和制备。本专利技术还涉及杨梅花青素提取物的组合物及其质量标准。
技术介绍
花青素类已是国际公认的安全无毒的天然食品着色剂，欧共体色素标准中对来源于果蔬的花青素的使用不作量的限制。但是由于各种果蔬中的各类成分相差径庭，花青素类成分组成也不同，加之性质不稳定，因此，制备工艺相差很大。我国仅有萝卜红、葡萄皮红、黑豆红三种花青素类天然食品着色剂，质量标准中主要评价指标色价均小于20(按我国定义)，纯度较低。欧共体花青素主要评价指标色价为30(按我国定义)，纯度较高。但无论国内外，都未对主要色素成分进行含量测定，仅使用吸光值来评价色价，这对花青素类天然食品着色剂的内在质量控制是一种欠缺。 本领域中已经有很多对杨梅色素进行的研究。马银海等(食品科学，2004，Vol.25，No.7，p.112-113)公开了一种提取杨梅红色素的方法，主要是通过酸浸泡然后过大孔树脂纯化。该方法是一种实验室方法，其中的树脂、淋洗液、洗脱所用的条件都跟本专利技术的方法不同。林璇等(漳州师范学院化学系，2002年8月，15卷，3期，pp.98-101)公开了一种实验室使用的矢车菊苷分离方法，以及对杨梅红色素进行了研究。然而，该方法是一种非常复杂的实验室级别的方法，因此没有工业上应用的意义。该文献还描述了杨梅红色素中含有矢车菊苷，以及杨梅红色素的理化性质等。然而，该文献中描述的色素随着pH的增加而颜色呈红→绿→蓝变化，而在叶日英，农牧产品开发，2000第1期中，认为色素是呈红色到绿色变化。此外，在高居易，天然产品研究与开发，Vol.13，No.2，pp.59-62中，认为该红色色素在水溶液中34％下就达到饱和。 如上所述，这些研究的结果差异很大，原因是由于提取方法粗，成分差异大。因此，需要一种标准的提取方法，来获得有效的杨梅花青素，以及与其配套的工业生产的检测标准。 此外，食品药品着色剂在工业应用中有相当大的重要性，并且也是常用的工业产品。近年来，对于这些着色剂发生了很多的争端，有许多以前常用的食品着色剂被发现是对人体有害的，例如可能导致癌症等。因此，对于天然无害的食品着色剂有很大的市场需求。
技术实现思路
因此，本专利技术的一个目的是提供一种制备杨梅花青素提取物的方法，该方法包括步骤 (a)用1-10倍鲜果重量的50-95％重量的乙醇水溶液浸泡杨梅果肉4小时以上，优选12小时； (b)过滤，除去乙醇，得到药液； (c)将所得药液调至pH至1-4，优选pH1-2，过大孔树脂吸附柱； (d)用水洗涤柱，至流出液为无色； (e)用20％-95％重量的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液； (f)过滤，回收乙醇，40-80℃真空干燥得到的洗脱液。 在该方面的一个实施例中，步骤(a)中的乙醇水溶液是药材重量的5倍。 在该方面的另一个实施例中，步骤(a)中的乙醇水溶液浓度是90％重量。 在该方面的另一个优选例中，步骤(e)中的乙醇优选是30-85％重量，更优选是50％重量的水溶液。 在该方面的另一个优选例中，步骤(e)中还包括用高效液相层析法在515nm波长下，流速1.0ml/分钟，25℃下，用乙腈∶甲酸∶水＝10∶10∶100检测杨梅花青素成分矢车菊素-3-葡萄糖的含量。 本专利技术的另一个方面，提供了上述方法获得的杨梅花青素提取物。其中杨梅花青素提取物色价(按中国定义)在40以上，矢车菊素-3-葡萄糖在总提取物中的含量为5-30％重量。 本专利技术的另一个方面提供了上述杨梅花青素提取物的用途，其特征在于，用作食品或药物的着色剂。 具体实施例方式 杨梅(Mynica rubra Sied.et Zucc)是一种常见的水果。本专利技术中所用的杨梅为集市购得。 本专利技术的杨梅花青素提取方法采用乙醇作为提取试剂，然后使用大孔树脂纯化，与常规的乙醇粗浸取或酸水提取然后大孔树脂纯化的条件不同，洗脱条件也不相同，因此理化参数等有很大的差异。 本专利技术中步骤(b)中的回收乙醇步骤，使得获得的药液浓缩，从而能吸附在大孔树脂上有效分离所需的组分。回收是通过常规方法进行的，例如减压蒸馏等。 本专利技术的柱层析使用各种常规的大孔树脂吸附柱，可采用各种医药级大孔吸附树脂，常用的树脂是极性苯乙烯骨架。优选树脂购自西安蓝晓科技有限公司的LSA-33、LSA-20和XDA-1。在使用前可先用水平衡。上样，洗涤，洗脱速度不受限制，但优选在30-300ml/分钟之间，最优选是60ml/min。 本专利技术的洗涤液可使用极性溶剂，例如去离子水等对柱进行洗涤。 该方面的另一个实施例中包括了检测步骤，该检测步骤是在步骤(e)洗脱过程中使用常规的HPLC(高效液相层析)，例如硅胶柱等，对洗脱液中的矢车菊素-3-葡萄糖成分进行检测，检测波长为515nm，流速为1.0ml/分钟，25℃下，乙腈∶甲酸∶水＝10∶10∶100。如在该洗脱液中没有矢车菊素-3-葡萄糖峰出现则证明其洗脱完全。 本专利技术(f)中所使用的过滤装置可以是各种常规过滤装置。例如滤纸真空吸滤，多孔树脂，分子筛，填充柱等。 本专利技术提取物色价(中国定义)在40以上，是常规乙醇浸出法的5倍以上，提取效率达到60％以上，有效成分得率为0.2％以上，同时，由于操作步骤简单，没有TLC，电泳等昂贵步骤，可用于大批量工业生产。 本专利技术获得的杨梅花青素提取物的主要成分是矢车菊素-3-葡萄糖，作为着色剂，它完全没有毒性和副作用，因此，非常适合工业和商业用作食品和药品的着色剂。 实施例 实施例1杨梅花青素的提取 1.材料和仪器 材料苏州集市市售的杨梅50kg。 树脂LSA-33、LSA-20和XDA-1，购自西安蓝晓科技有限公司 仪器多功能提取罐(500L)，常州武进孟河制药机械厂 2.提取方法 三批杨梅(集市购得)分别去核取肉，分别用2、5、9倍鲜果量的90、85、65％乙醇浸泡提取12、8、4小时，过滤得乙醇提取液，回收乙醇，残液加水稀释，过滤，滤液以盐酸分别调pH酸性至1、3、5，分别过大孔树脂LSA-33、LSA-20和XDA-1吸附柱，树脂用量为药材量的1/3、1、2，药液过完柱床后用水洗柱床(流速300ml/min、不限)至流出液为无色，再分别用30％、50％、85％乙醇洗脱至流出液为无色(流速200ml/min、100ml/min、50ml/min)，至用高效液相层析柱(反相硅胶柱，中科院大连化学物理研究所)在515nm波长下，流速1.0ml/分钟，25℃下，用乙腈∶甲酸∶水＝10∶10∶100检测矢车菊素-3-葡萄糖的含量，至不出现其峰； 收集乙醇洗脱液，过滤，回收乙醇，80℃水浴蒸干，40-80℃真空烘干，得杨梅花青素提取物。 三批约50公斤的杨梅鲜果经提取，杨梅花青素的最终提取率在60％以上，得率在0.2％以上。用中华人民共和国国家标准GB9992-88的检测矢车菊素-3-半乳糖苷(虽然该方法用于黑豆提取物，但是其同样是用于检测矢车菊素的方法，并且也是用于经植物提取后的固体)，发现检测杨梅花青素提取物的E值大于40(相当于欧共体和国际粮农组织色价定义400，欧共体花青素标准中花青素提取物色价为300)，结果见下表1。 表1本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种制备杨梅花青素提取物的方法，其特征在于，该方法包括步骤：（ａ）用１－１０倍鲜果重量的５０－９５％重量的乙醇水溶液浸泡杨梅果肉４小时以上；（ｂ）过滤，除去乙醇，得到药液；（ｃ）将所得药液调至ｐＨ至１－４，过大孔树脂 吸附柱；（ｄ）用水洗涤柱，至流出液为无色；（ｅ）用２０％－９５％重量的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；（ｆ）过滤，回收乙醇，４０－８０℃真空干燥得到的洗脱液。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：徐丽华，黄芳，
申请(专利权)人：苏州市思源医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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