本发明专利技术属分析化学领域，本发明专利技术公开了一种用液相色谱法分离测定氢溴酸沃替西汀中间体1‑Bromo‑2‑iodo‑benzene有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的水‑有机相为流动相，可以定量测定氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质的含量，从而有效控制氢溴酸沃替西汀中间体的质量，保证氢溴酸沃替西汀终产品的质量可控。本发明专利技术方法专属性强，准确度高，操作简便。
Method for separation and determination of related substances in intermediates of Dextromethorphan Hydrobromide by HPLC
The invention belongs to the field of chemical analysis, the invention discloses a method for liquid chromatography for the separation and determination of hydrobromic acid for Wo Xi Ting intermediate 1 Bromo benzene iodo 2 related substances, this method takes eighteen alkyl silane bonded silica as chromatographic packing, with a certain percentage of water organic phase as the mobile phase, can be quantitative determination of content and related substances of hydrobromic acid for Wo Xi Ting intermediate quality, so as to effectively control the hydrobromide for Wo vinpocetine intermediates, ensure quality control for vinpocetine hydrobromide Wo end product. The method has the advantages of strong specificity, high accuracy and convenient operation.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及液相色谱法分离测定氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质的方法。
技术介绍
氢溴酸沃替西汀可抑制五羟色胺再摄取，具有5-HT1A受体激动剂、5-HT1B受体部分激动剂及5-HT3’、5-HT1D及5-HT7受体拮抗剂的作用，适用于重度抑郁症的治疗。氢溴酸沃替西汀中间体的化学名为1-Bromo-2-iodo-benzene，分子式为C6H4BrI，氢溴酸沃替西汀中间体的结构式为：。在氢溴酸沃替西汀的合成过程中，需要控制一些关键中间体的纯度，以减少副反应的发生和杂质的生成，从而提高终产品的收率和纯度。对于氢溴酸沃替西汀中间体1-Bromo-2-iodo-benzene的合成主要控制的有关物质为：2-Bromonitrobenzene（有关物质1），1-Bromoaniline（有关物质2），1-Bromo-4-iodo-benzene（有关物质3），结构式分别为：有关物质1有关物质2有关物质3。氢溴酸沃替西汀中间体中的杂质去除不完全，将会引起副反应的发生和杂质的生成，最终影响药物纯度和质量。因此，实现氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质的分离测定，在氢溴酸沃替西汀的生产及其质量控制方面具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种分析氢溴酸沃替西汀中间体有关物质的方法，从而实现氢溴酸沃替西汀中间体与其有关物质的分离和测定，保证氢溴酸沃替西汀中间体的纯度，实现氢溴酸沃替西汀的质量可控。本专利技术所述的用液相色谱法分析氢溴酸沃替西汀中间体有关物质的方法，是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的水-有机相为流动相。上述所说的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，色谱柱选自Alltima、Apollo和Kromasil等品牌。上述所说的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、异丙醇、四氢呋喃等，优选甲醇。上述所说的方法，其流动相水-有机相采用梯度洗脱。本专利技术所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：1)取氢溴酸沃替西汀中间体样品适量，用甲醇溶解样品，配制成每1mL含氢溴酸沃替西汀中间体0.1～1.5mg的样品溶液；2)设置流动相流速为0.5～1.5mL/min，流动相流速优选为1.0mL/min，检测波长为200～250nm，最佳检测波长为230nm，室温检测即可；3)取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，完成氢溴酸沃替西汀中间体与其有关物质的分离测定。其中：高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本专利技术采用的色谱仪为岛津：LC-20AT泵，SPD-M20A检测器，SIL-20AC自动进样器，CBM-20A控制器，CTO-10ASVP柱温箱，LCsolution工作站；色谱柱：C18（Alltima，250×4.6mm，5μm）；流动相：A：水，B：甲醇；按以下梯度进行洗脱：T(min)083535.0145B%6565906565流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；进样体积：10μL。本专利技术采用C18（Alltima，250×4.6mm，5μm）色谱柱，能够有效的分离氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质。本专利技术解决了氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质的分离测定问题，从而减少了副反应的发生，提高了产物的收率和纯度，保证了氢溴酸沃替西汀的质量可控。附图说明图1为实施例1时的氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质HPLC图；图2为实施例1时的氢溴酸沃替西汀中间体的HPLC图；图3为实施例2时的氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质HPLC图；图4为实施例2时的氢溴酸沃替西汀中间体的HPLC图；图5为实施例3时的溶剂HPLC图；图6为实施例3时的氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质HPLC图；图7为实施例3时的氢溴酸沃替西汀中间体的HPLC图。具体实施方式：以下实施例用于进一步理解本专利技术，但不限于本实施的范围。实施例1仪器与条件高效液相色谱仪：岛津：LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp；色谱柱：C18（Alltima，250×4.6mm，5μm）；流动相：水：甲醇-25：75；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；进样体积：10μL；运行时间：25min。实验步骤取氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质适量，用甲醇溶解样品，配制成含氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质约1.0mg/mL的样品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图1~2，图1中保留时间为18.106min的色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体，其余色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体各有关物质的色谱峰；图2中保留时间为18.359min的色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体。实施例2仪器与条件高效液相色谱仪：岛津：LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp；色谱柱：C18（Alltima，250×4.6mm，5μm）；流动相：水：甲醇-30：70；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；进样体积：10μL；运行时间：40min。实验步骤取氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质适量，用甲醇溶解样品，配制成含氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质约1.0mg/mL的样品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图3~4，图3中保留时间为27.112min的色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体，其余色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体各有关物质的色谱峰；图4中保留时间为27.232min的色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体。实施例3仪器与条件高效液相色谱仪：岛津：LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp；色谱柱：C18（Alltima，250×4.6mm，5μm）；流动相：A：水，B：甲醇；按以下梯度进行洗脱：T(min)083535.0145B%6565906565流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；进样体积：10μL。实验步骤取氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质适量，用甲醇溶解样品，配制成含氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质约1.0mg/mL的样品溶液；另取甲醇适量作为空白溶剂。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图5~7，图5为溶剂色谱图；图6中保留时间为28.593min的色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体，其余色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体各有关物质的色谱峰，由图可以看出，氢溴酸沃替西汀中间体与其有关物质能够达到基线分离，符合中国药典的要求；图7中保留时间为28.609min的色谱峰为氢溴酸沃替西汀中间体，可以看出在该条件下氢溴酸沃替西汀中间体与其有关物质可以完全分离。对上述氢溴酸沃替西汀中间体及其有关物质分析方法的以下项目进行了验证：系统适用性试验根据上述实施例3确定的色谱条件，用氢溴酸沃替西汀中间体和各有关物质的混合物来分析此色谱条件是否符合要求。由图6可见此条件下各个有关物质与主峰之间分离度符合要求，峰纯度和单点阀值均符合要求。耐用性由于本品的色谱条件规定了相应的色谱柱型号，故我们考察了不同品牌色谱柱对方法的影响。结果发现，使用不同品牌色谱柱，羧甲司坦及其有关物质保留时间无显著变化，且均能达到有效分离，该方法对不同品牌的色谱柱耐用性良好。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种液相色谱法分离测定氢溴酸沃替西汀中间体有关物质的方法，其特征在于：十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的水‑有机相为流动相。
【技术特征摘要】
1.一种液相色谱法分离测定氢溴酸沃替西汀中间体有关物质的方法，其特征在于：十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的水-有机相为流动相。2.根据权利要求1所述的分离测定方法，色谱柱选自品牌Alltima、Apollo和Kromasil的色谱柱。3.根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的有机相选自以下化合物中的一种或几种：甲醇、乙腈、异丙醇、四氢呋喃等。4.根据权利要求3所述的分离测定方法，所说的有机相优选甲醇。5.根据权利要求1所述的分离测定方法，其特征在于，包括以下几个步骤：1）取氢溴酸沃替...
【专利技术属性】
技术研发人员：曹祎宁，王宇杰，
申请(专利权)人：万全万特制药江苏有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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