一种Cronobacter sakazakii的类脂A结构突变株的构建及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种Cronobactersakazakii的类脂A突变株的构建及其应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术通过将Cronobacter sakazakii菌株的ESA-02008基因片段进行敲除，使Cronobacter sakazakii菌株对阳离子抗菌肽抗性降低了32倍、Cronobacter sakazakii细胞毒性降低了27％、Cronobacter sakazakii菌株在巨噬细胞中的繁殖水平显著降低，同时还得到了发生结构突变的类脂A。本发明专利技术的结构突变的类脂A的修饰完全缺失。

Construction and application of a novel lipid A mutant strain of Cronobacter sakazakii

The invention discloses a Cronobactersakazakii lipid A mutant strain and the application thereof, belonging to the technical field of gene engineering. The ESA-02008 gene fragment of Cronobacter strain sakazakii were knockout, Cronobacter strain sakazakii resistance to cationic antimicrobial peptides decreased by 32 times, Cronobacter sakazakii cytotoxicity reduces the level of 27%, Cronobacter breeding strain sakazakii in macrophages decreased significantly, also have occurred lipid A structure mutation. The structural modification of lipid A is completely absent in the present invention.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种Cronobactersakazakii的类脂A突变株的构建及其应用，属于基因工程

技术介绍
类脂A可以被宿主细胞表面的Toll样受体4(TollLikeReceptor4，TLR-4)识别，继而引发细胞内一系列的生理生化反应，产生TNF-α、IL-6、IL-8等多种炎性细胞因子。细胞因子的种类和数量主要取决于类脂A的结构，因此，某些特殊结构的类脂A可作为疫苗佐剂，非特异性的增强机体对抗原的免疫应答反应，提高疫苗效率。阪崎克罗诺肠杆菌(Cronobactersakazakii)是一种自然界中广泛存在的食源性革兰氏阴性致病菌，主要污染婴儿配方奶粉。它可以引起新生儿脑膜炎、败血病、菌血症及坏死性小肠结膜炎等疾病。近些年的研究表明，有些革兰氏阴性菌的致病能力与其外膜类脂A的分子结构密切相关，但关于阪崎克罗诺杆菌类脂A分子修饰及作用还有待研究。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供C.sakazakii的类脂A分子修饰相关的突变株。<br>本专利技术的第本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Cronobacter sakazakii的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌缺失了ESA‑02008基因片段。

【技术特征摘要】
1.一种Cronobactersakazakii的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌缺失了ESA-02008
基因片段。
2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述ESA-02008基因片段的核苷酸序列
是SEQIDNO:1的序列。
3.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为无抗性C.sakazakii
BAA894△ESA-02008，以CronobactersakazakiiBAA894为出发菌、缺失了核苷酸序列为SEQ
IDNO:1的ESA-02008基因片段。
4.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌的构建方法如下：将人
工构建的ESA-02008敲除片段电转含pKD46质粒的C.sakazakiiBAA894，获得突变株
C.sakazakiiBAA894ΔESA-02008-loxPkan，再化转入pKD-Cre质粒，通过位点特异性重组敲除<...

【专利技术属性】
技术研发人员：李颜颜，王小元，刘璐，云建，贾向印，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32