一种紫花苜蓿EMS突变体库构建的方法技术

本发明专利技术公开了一种紫花苜蓿EMS突变体库构建的方法，是以现有的紫花苜蓿栽培品种为材料，经一定浓度的EMS溶液处理一定时间，利用苗生长发育的各阶段进行突变体鉴定、筛选而获得该品种紫花苜蓿EMS突变体库的方法。本发明专利技术的方法具有操作简便、高效稳定、成本低等特点。利用该方法，可通过生物学性状和农艺性状的鉴定、筛选，得到用于该品种遗传改良的育种材料，同时，为紫花苜蓿的正向遗传学和功能基因组学分析提供丰富的研究材料。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种紫花苜蓿EMS突变体库构建的方法，步骤是：1)种子准备：选择饱满度高的紫花苜蓿种子，并按设定量称取该种子作为诱导剂处理材料；2)甲基磺酸乙酯(EMS)溶液准备：配制0.1mol/L、pH5.8的磷酸缓冲液并将诱导剂甲基磺酸乙酯(EMS)溶于该磷酸缓冲液中，制得甲基磺酸乙酯(EMS)溶液；3)处理种子：用甲基磺酸乙酯(EMS)溶液处理紫花苜蓿种子；4)播种：对处理之后的紫花苜蓿种子分别编号，并播种于含育苗营养土的营养钵中育苗；5)移栽：待紫花苜蓿苗长出四片真叶后，将其移入起垄好的大田；苗生长期间加强肥水管理；6)收种：在苗生长发育的各阶段进行突变体鉴定、筛选、编号，单株收种并记载相关性状；7)将获得的各突变体分别编号并记载性状，建立紫花苜蓿甲基磺酸乙酯(EMS)突变体库，用于后续的紫花苜蓿选择育种和基因功能组学研究；其特征在于：步骤2)所述甲基磺酸乙酯(EMS)溶液浓度以重量百分比计为1.6％；步骤3)所述处理种子的方法是：现将紫花苜蓿种子用蒸馏水浸泡24±4小时，然后去除蒸馏水并用步骤2)所述EMS溶液浸泡处理8±2小时，处理期间将含种子的容器置于摇床上以60±5rpm的转速轻摇；EMS溶液处理结束后，倒掉EMS溶液，将蒸馏水加入含种子的容器中并浸没种子，将该容器置于摇床上以60±5rpm的转速轻摇，每次30分钟，之后倒掉蒸馏水，再向该容器中加入蒸馏水并浸没种子，置于摇床上以60±5rpm的转速轻摇，每次30分钟，之后如此重复用蒸馏水冲洗EMS处理后的种子3‑4次直至去除种子中残留的EMS；步骤4)所述播种方法是：将处理后的种子播于直径6厘米，高10厘米的无纺布育苗营养钵中，人工穴播，播深1‑2厘米；一天喷水3‑4次；其中所述育苗营养土的组分配比以重量份计为：蛭石:泥炭:珍珠岩:腐熟有机堆肥＝1:2:2:3。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：夏阳，孙超，燕丽萍，李丽，刘翠兰，吴兴兰，
申请(专利权)人：山东省林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：山东;37