延胡索乙素在制备抗顺铂毒性药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供延胡索乙素在制备抗顺铂毒性药物中的应用。所述毒性包括肾脏毒性、耳毒性及神经毒性。研究表明，延胡索乙素对OCT2与MATE1具有抑制作用，能拮抗顺铂引起的细胞毒性，并在原代培养的肾小管上皮细胞模型上得到较好的验证。且以(-)-THP为代表，研究发现延胡索乙素对顺铂所致小鼠肾损伤具有很好的保护作用。因此，延胡索乙素与顺铂合用，可能减少顺铂在肾脏、耳蜗细胞及背根神经节蓄积，从而达到预防或降低顺铂毒性的预期结果。本发明专利技术拓展了延胡索乙素的新用途；由于肾脏、耳蜗毛细胞及背根神经节高表达OCT2，而肿瘤细胞上往往缺少OCT2的表达，顺铂具有一定的被动透过性，因此，延胡索乙素与顺铂合用，减弱顺铂所致毒性的同时，并不会降低顺铂的抗肿瘤效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属药物用途，涉及延胡索乙素在降低顺铂所致毒性药物中的应用，包括肾脏毒性、耳毒性和神经毒性。技术背景顺铂是目前临床上最有效的广谱抗肿瘤药物之一，广泛用于卵巢癌、前列腺癌、肺癌及乳腺癌等多种实体肿瘤治疗，但其严重的毒副反应，包括肾毒性、耳毒性、神经毒性等限制了其临床应用，尤其是以肾毒性和耳毒性最为严重。临床尽管采用水化疗法或强迫利尿等防护措施，顺铂的肾毒性发生率仍高达25~35%，且在治疗初期随即发生。通过氧化应激、DNA损伤及炎症反应等机制，顺铂可导致肾小管细胞死亡，肾组织损伤，从而使肾小球滤过率下降，肾脏排泄显著减少，导致其在肾脏中大量蓄积，引起严重的肾脏衰竭。顺铂也会损伤耳蜗毛细胞，造成听力丧失，导致耳聋或耳鸣。因此，顺铂所致毒性是临床化疗过程中亟待解决的问题，其防护措施的研究也是近年来的研究热点。临床常用抗炎、抗氧化等措施，以保护顺铂引起的肾脏损伤，耳蜗细胞损伤及周围神经损伤，但效果并不理想。顺铂肾毒性、耳毒性及神经毒性的产生是一个复杂的多因子参与过程，但其在肾小管上皮细胞、耳蜗毛细胞及背根神经节神经元细胞中的高度浓集是其毒性的关键。顺铂经静脉给药后，随血液循环分布至全身各组织器官，其中浓度最高的是肾组织，尤其是肾小管上皮细胞。肾小管上皮细胞膜上表达多种摄取型及外排型药物转运体，包括基底膜侧特异性高表达的有机阳离子转运体2（organiccationtransporter,OCT2）及顶膜侧多药及毒素外排蛋白(multidrugandtoxinextrusionproteins,MATEs)，在阳离子药物的肾脏跨膜转运及肾脏处置中发挥着重要作用。顺铂经OCT2由血液摄取入肾小管细胞，在肾小管蓄积；外排型转运体MATEs(MATE1与MATE2-K)将顺铂泵出肾小管细胞，降低其在肾细胞的浓度。由于OCT2对顺铂的大量摄取，而MATEs对其较弱的外排，使顺铂在肾脏严重蓄积，从而导致肾脏毒性。同样，OCT2转运体高表达于耳蜗毛细胞及背根神经节细胞，介导顺铂的细胞摄取，导致顺铂在细胞积聚而引起严重的耳毒性和神经毒性。临床尝试以伊马替尼、西咪替丁等OCT2抑制剂通过抑制OCT2对顺铂肾细胞摄取，以降低顺铂所致的肾脏毒性。然而，西咪替丁竞争性抑制MATEs作用强于OCT2，反而使顺铂肾毒性增强。对于顺铂耳毒性或神经毒性，临床常用抗氧化清除自由基的方法来拮抗，然而收效甚小。因此，寻找对OCT2强抑制，对MATEs无抑制或弱抑制的药物，以减少顺铂在肾脏、耳蜗细胞及背根神经节的积聚，从而降低其毒性是拓展顺铂临床应用的很好途径。延胡索乙素(tetrahydropalmatine,THP)，包括左旋延胡索乙素((-)-THP)，右旋延胡索乙素((+)-THP)，及消旋延胡索乙素((±)-THP)，是延胡索(元胡)的主要效应成分之一，具有镇痛、抗氧化等多种生理活性。其中(-)-THP常用于缓解头痛、胸痛等多种疼痛，且具有非成瘾性、毒副作用小的优点。本研究首先在稳定表达人OCT2，MATE1，共表达人OCT2和MATE1的转基因细胞以及原代培养的小鼠肾上皮细胞、耳蜗毛细胞、背根神经节细胞上考察延胡索乙素，包括(-)-THP，(+)-THP及(±)-THP对OCT2与MATE1的抑制作用，能减少细胞内顺铂积聚，从而拮抗顺铂所致细胞毒性；进一步以(-)-THP为代表研究其对顺铂在小鼠肾脏、耳蜗与背根神经节蓄积及毒性的影响，以阐明延胡索乙素作为顺铂诱发的肾毒性、耳毒性及神经毒性减毒药物的意义，为肿瘤患者提供兼有减毒、镇痛、无成瘾性的肿瘤辅助治疗药物。延胡索乙素结构式：
技术实现思路
本专利技术的目的是提供延胡索乙素在制备抗顺铂毒性药物中的应用。所述毒性包括肾脏毒性、耳毒性及神经毒性。研究表明，延胡索乙素，包括(-)-THP，(+)-THP及(±)-THP对OCT2与MATE1具有抑制作用，能拮抗顺铂引起的细胞毒性，并在原代培养的肾小管上皮细胞模型上得到较好的验证。且以(-)-THP为代表，研究发现延胡索乙素对顺铂所致小鼠肾损伤具有很好的保护作用。因此，延胡索乙素与顺铂合用，可能减少顺铂在肾脏、耳蜗细胞及背根神经节蓄积，从而达到预防或降低顺铂毒性的预期结果。本专利技术的有益之处是：(1)延胡索乙素是“浙八味”之一元胡的主要有效成分，也是元胡止痛方主要有效成分，(-)-THP更是临床常用镇痛药，已用于治疗肿瘤引起的疼痛，且无成隐性。因此本专利技术将拓展元胡、元胡止痛方及(-)-THP的新用途；(2)虽然已有研究者希望通过顺铂联用药物对OCT2的抑制以降低顺铂肾毒性，但是临床尝试的OCT2抑制剂(如西咪替丁)往往由于对MATE1介导的顺铂外排具有更强的抑制，反而使顺铂在肾脏蓄积更多，毒性更强。本研究发现，延胡索乙素对OCT2的抑制显著大于对MATE1的抑制，能显著降低顺铂的肾毒性、耳毒性及神经毒性；(3)由于肾脏、耳蜗毛细胞及背根神经节高表达OCT2，而肿瘤细胞上往往缺少OCT2的表达，由于顺铂具有一定的被动透过性，因此，延胡索乙素与顺铂合用，减弱顺铂所致毒性的同时，并不会降低顺铂的抗肿瘤效果。附图说明图1.顺铂在MDCK-hOCT2，MDCK-hOCT2/hMATE1和mock细胞上浓度依赖性毒性。以溶剂对照组细胞活性均值为100%，图中数据以mean±SD表示,n=3；与mock细胞比较，*P<0.05，**P<0.01和***P<0.001。图2.(-)-THP,(+)-THP及(±)-THP浓度依懒性抑制MPP+在MDCK-hOCT2细胞上的积聚。以溶剂对照组MPP+摄取值为100%，图中数据以mean±SD表示，n=3。图3.(-)-THP,(+)-THP及(±)-THP浓度依懒性抑制MPP+在MDCK-hMATE1细胞上的积聚。以溶剂对照组MPP+摄取值为100%，图中数据以mean±SD表示，n=3。图4.(-)-THP,(+)-THP及(±)-THP对顺铂在MDCK-hOCT2细胞上毒性的浓度依懒性抑制作用。以溶剂对照组数值为100%，图中数据以mean±SD表示，n=3；与对照组比较，###P<0.001；与顺铂组比较，***P<0.001。图5.(-)-THP,(+)-THP及(±)-THP对顺铂在MDCK-hOCT2/hMATE1细胞上毒性的浓度依懒性抑制作用。以溶剂对照组数值为100%，图中数据以mean±SD表示，n=3；与对照组比较，###P<0.001；与顺铂组比较，*P<0.05，**P<0.01和***P<0.001。图6.(-)-THP,(+)-THP及(±)-THP浓度依懒性减少顺铂引起的MDCK-hOCT2细胞乳酸脱氢酶(LDH)的渗漏。以溶剂对照组LDH活力为100%，图中数据以mean±SD表示，n=3；与对照组比较,###P<0.001；与顺铂组比较，**P<0.01和***P<0.001。图7.(-)-THP,(+)-THP及(±)-THP浓度依懒性减少顺铂引起MDCK-hOCT2/hMATE1细胞乳酸脱氢酶(LDH)的渗漏。以溶剂对照组LDH活力为100%，图中数据以mean±SD表示，n=3；与对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种延胡索乙素在制备抗顺铂毒性药物中的应用，所述毒性包括肾脏毒性、耳毒性及神经毒性。

【技术特征摘要】
1.一种延胡索乙素在制备抗顺铂毒性药物中的应用，所述毒性包括肾脏毒性、耳毒性及神经毒性。2.根据权利要求1所述的应用，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：李丽萍，蒋惠娣，周慧，曾苏，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33