一种柴胡药材的提取分离方法技术

本发明专利技术公开了柴胡标准化提取分离方法，采用该方法可较大程度地将中药材中化学成 分提取出来并进一步分离获得柴胡中不同极性的化学组分；具体的说就是将柴胡药材按极性 分成若干化学组分，每个组分中仅包含几个主要化合物，由这些药材组分构成一个药材组分 库。对药材组分库能够进行药物筛选，从而发现新药。该标准化提取分离方法不需要对每个 药材都建立一套提取分离方法，大大缩短了药材提取分离的周期，同时也减少人力物力的消 耗；该方法简便、推广性好，适用大部分药材。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药领域，具体而言是涉及柴胡提取、分离标准化。
技术介绍
目前，在全球范围内，中草药都有一定的市场，随着人们对健康要求认识水平的增高以及人口的老龄化，亚健康状态化，人们更加渴望回归自然，利用纯天然程度高的药物治疗、预防一些化学合成药物所不能解决的问题，因此天然植物药的应用超出它原来民族传统文化的背景。从天然药物中寻求副作用小、且物美价廉的药物成为世界各国医药企业所追逐的目标。欧共体对草药进行了统一立法，加拿大和澳大利亚等国草药地位已经合法化，美国政府也已起草了植物药管理办法，开始接受天然药物的复方混合制剂作为治疗药，这些为中药作为治疗药进入国际医药市场提供了良好的国际环境。另一方面，随着全球经济一体化进程的加快，特别是我国正式加入WTO，中国医药市场融入国际医药大市场的广度和深度将进一步加剧。面临强大跨国医药集团的激烈竞争以及日本、韩国、印度、泰国等亚洲国家传统医药产品和德国、法国等欧洲国家植物药的巨大冲击，我国传统中药产生的众多产品由于尚不能符合国际医药市场的标准和要求而被拒之门外。中药材提取的标准化和中药制备方法的标准化是中成药走向国际市场或者真正实现大工业生产的关键环节，也是中国医药工作者和国外研究天然植物药的科研人员一直努力研究的方向。目前关于中药的提取方法是中药领域研究的重点，科研人员一直将研究的目光着重于采用何种方法才能从中药材中获得的更多的有效成分，因此目前的中药材提取的局面是针对不同的中药材其有效成分的提取方法也不同，而针对不同的中药材采用不同的提取方法需要有大量不同的提取设备用于支持中药材的提取，这不适于中药材提取的标准化。柴胡，为伞形科(Umbelliferae)柴胡属(Bupleurum)植物。全世界有柴胡属植物200种，我国已报道有42种，17变种及7变形(程必强，喻学俭.云南热带亚热带香料植物.昆明云南大学出版社，1995.69-73)。《中华人民共和国典》(1995年版)规定北柴胡Bupleurum chineseDC.和南柴胡B.scorzonerifolium Willd.为药用柴胡。前者主产于辽宁、甘肃、河北、河南、山东等地，后者主产于湖北、四川、江苏、安徽等地。柴胡根中主要成份为柴胡皂苷，其次含有植物甾醇、侧金盏花醇，以及少量挥发油、多糖；地上部分主要含黄酮类、少量皂苷类、木脂素类、香豆素类成分。柴胡皂苷具有镇痛、镇静、抗炎等生理活性；目前发现柴胡多糖有抗炎、降血脂、增强免疫功能和抗病毒等作用，还有较强的抗溃疡作用(张永文.柴胡果胶多糖的结构与药理活性研究进展J.国外医学中医中药分册，1996，18(4)20-23.)，对肝炎以及SLE、肾炎及类风湿等自身免疫疾病具有重要的临床价值。黄酮类具有增强毛细管功能的作用等。如何确定一种提取、分离标准化方法，使柴胡中的药物活性成分不仅能够提取完全，还可以通过分离方法进一步分离所获得的药物活性成分。该提取、分离标准化的确立是目前中药实现现代化的关键因素。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种柴胡提取、分离标准化。具体的说就是将柴胡提取物分成若干组分，每个组分包含几个主要化合物，由这些药材组分构成了一个药材组分库。对药材组分库能够进行药物筛选，从而发现新药。为了实现柴胡提取的现代化、标准化，本专利技术人通过大量的试验，对目前柴胡的有效成分的提取方法进行归纳和整理，以寻求一种可标准化的提取方法，即在该提取条件下采用该标准提取方法对柴胡进行提取，可以最大限度的获得中药中的有效成分。本专利技术所采用的柴胡提取、分离标准化是本专利技术人通过试验，对同一味中药材采用不同的提取方法进行比较后，所得到的可适于工业化生产的柴胡提取、分离标准化。本专利技术可以通过下列步骤实施(1)提取工艺称取柴胡药材，将其粉碎后过筛，然后加入乙酸乙酯和乙醇，加热提取得提取液fr.1；在药渣中加入乙醇，加热提取得提取液fr.2；在药渣中最后加入水，加热提取得提取液fr.3。(2)分离工艺将提取液fr.1浓缩成浸膏后，用硅胶拌样，采用正相硅胶柱对其进行分离，首先用石油醚和乙酸乙酯作为流动相，得洗脱液fr.4，然后改换氯仿和甲醇作为流动相，得洗脱液fr.5，最后用甲醇作为流动相，得洗脱液fr.6；将提取液fr.2浓缩成浸膏后，用甲醇溶解上样，采用ODS-C18柱对其进行分离，首先用低浓度的甲醇作为流动相，得洗脱液fr.7，然后改换中等浓度的甲醇作为流动相，得洗脱液fr.8，最后用纯甲醇溶液作为流动相，得洗脱液fr.9。(3)制备分离工艺用制备液相色谱继续分离前面工艺中得到的fr.5和fr.8。色谱柱为制备柱，流动相为水和乙腈，梯度洗脱，在相应的时间段收集馏分，获得经过了进一步分离的各个组分。优选地，本专利技术可以通过下列步骤实施(1)提取工艺称取柴胡药材，将其粉碎后过筛，然后加入5～12倍量体积比为1∶1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流0.5～3小时，提取1～3次，合并滤液得提取液fr.1；在药渣中加入5～12倍量70％乙醇，加热回流0.5～3小时，提取1～3次，合并滤液得提取液fr.2；在药渣中最后加入水，加热回流0.5～3小时，提取1～3次，合并滤液得提取液fr.3。(2)分离工艺将提取液fr.1浓缩成浸膏后，用硅胶拌样，采用正相硅胶柱对其进行分离，首先用体积比为50∶1的石油醚和乙酸乙酯作为流动相，得洗脱液fr.4，然后改换体积比为10∶1的氯仿和甲醇作为流动相，得洗脱液fr.5，最后用甲醇作为流动相，得洗脱液fr.6；将提取液fr.2浓缩成浸膏后，用2～10％甲醇溶解上样，采用ODS-C18柱对其进行分离，首先用2～10％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.7，然后改换40～80％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.8，最后用100％甲醇溶液作为流动相，得洗脱液fr.9。(3)制备分离工艺用制备液相色谱继续分离前面工艺中得到的fr.5和fr.8。色谱柱为制备柱(Zorbax SB-C18；21.2mm×250mm)，流动相为水和乙腈，梯度洗脱，流速为10ml/min，柱温为室温，在相应的时间段收集馏分，获得经过进一步分离的各个组分。最佳地，本专利技术可以通过下列步骤实施(1)提取工艺称取柴胡药材，将其粉碎后过筛，然后加入8倍量体积比为1∶1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.1；在药渣中加入8倍量70％乙醇，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.2；在药渣中最后加入水，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.3。(2)分离工艺将提取液fr.1浓缩成浸膏，用硅胶拌样，采用正相硅胶柱对其进行分离，首先用体积比为50∶1的石油醚和乙酸乙酯作为流动相，得洗脱液fr.4，然后改换体积比为10∶1的氯仿和甲醇作为流动相，得洗脱液fr.5，最后用甲醇作为流动相，得洗脱液fr.6。将提取液fr.2浓缩成浸膏，用5％甲醇溶解上样，采用ODS-C18柱对其进行分离，首先用5％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.7，然后改换70％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.8，最后用100％甲醇溶液作为流动相，得洗脱液fr.9。(3)制备分离工艺本专利技术中为了从步骤(2)中获得柴胡提取物中fr.5和fr.8更加具体的有效成分，用制备液相色谱继续分离fr.5和fr.8。fr本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：程翼宇，贺庆，王毅，王学伟，李云飞，水文波，胡兴江，葛志伟，
申请(专利权)人：程翼宇，贺庆，王毅，王学伟，李云飞，水文波，胡兴江，葛志伟，
类型：发明
国别省市：